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Variable volume controller knob for 10-100ul Capp pipettes

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蚂蚁淘(www.ebiomall.cn)是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台, 该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁 淘搜索全球供应信息,找到合适的产品后在蚂蚁淘下单,然后蚂蚁淘的海外买手进行跨境采购、 运输到中国口岸,最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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刘芝华 中国医学科学院肿瘤研究所分子肿瘤学国家重点实验室 概念: 基因组文库是含有某种生物体全部基因的随机片段的重组DNA克隆群体;cDNA文库是指含有所有重组cDNA的克隆群体。 基因组 查看更多>
2017-06-12
基因测序让我们的生活更加美好! 查看更多>
IlluminaNextSeqCN500基因测序仪是由北京安麦格贸易有限公司代理或销售的Illumina品牌的仪器,产品来源于美国。北京安麦格贸易有限公司是中国最权威的IlluminaNextSeqCN500基因测序仪销售服务商之一,在北京等地方销售IlluminaNextSeqCN500基因测序仪已经多年。同时,生物在线为您提供众多企业IlluminaNextSeqCN500基因测序仪仪器产品及图片,以便挑选到性价比高,合适的IlluminaNextSeqCN500基因测序仪产品 查看更多>
全基因组测序是对未知基因组序列的物种进行个体的基因组测序。1986年,RenatoDulbecco是最早提出人类基因组定序的科学家之一。他认为如果能够知道所有人类基因的序列,对于癌症的研究将会很有帮助。美国能源部(DOE)与美国国家卫生研究院(NIH),分别在1986年与1987年加入人类基因组计划。  检测结果让人满意,我得赶紧抽根中华、喝杯茅台压压惊。”李先生日前在朋友圈这样写道。什么检查能让人又抽烟又喝酒?答案是全基因... 查看更多>
2021-07-16
嘉美生物是一家主要从事Annexin V,信号转导抗体,重组人和动物蛋白,磷酸化抗体,各种动物ELISA试剂盒,生物实验服务等研发与销售的高科技生物公司,免费热线:400-698-4168。 查看更多>
2018 年 1 月 12 日,上海——近日,科学服务领域的世界领导者赛默飞世尔科技(以下简称:赛默飞)宣布推出最新系列桌上型下一代基因测序仪 Ion GeneStudio S5 Series,配套包括最新的 Ion 550 的 5 款芯片。同时,赛默飞也于近日宣布与 Illumina 公司(NASDAQ:ILMN)达成协议,授权 Illumina 销售 Ion AmpliSeq 产品给 Illumina 下一代测序平台(以下简称:... 查看更多>
北京标凯科技有限公司在发布的均一化cDNA文库构建供应信息,浏览与均一化cDNA文库构建相关的产品或在搜索更多与均一化cDNA文库构建相关的内容。 查看更多>
cDNA文库构建/EST测序分析 cDNA文库构建/EST测序分析【相关服务:DNA测序】,DNA测序 8月2日,绿叶制药(02186.HK)母公司绿叶集团宣布收购新加坡基因测序公司Vela Diagnostics。这标志着绿叶集团正式进军精准医疗市场,而该公司的基因测序技术将与绿叶集团现有业务产生协同效应,形成从诊断到治疗的精准医疗全产业服务。绿叶集团人士告诉21世纪经济报道记者:“这家公司生产的设备、试剂已经拿到批文,接下来在国内注 查看更多>
1988年2月22日,我对自己新发现的基因开始准备进行基因测序,这一工作遇到困难,终于在1988年8月8日完成。其后,我做了转基因,将我克隆和分析过的DNA导入动物体内,它可以“治疗”动物脑发育的“疾病”。 查看更多>
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近日,有媒体公布了国家卫计委通过的第一批高通量测序技术临床应用试点单位名单,此前已经获得二代测序注册证的华大基因和达安基因(002030.SZ)再次入选。尽管目前卫计委网站上还未正式公布此消息,但在去年12月底,华大基因董事长汪建在接受《第一财经日报》记者采访时曾印证过此消息。“有关全基因组测序的批文估计最近会出来,预计会涉及20家医院以及七个临床检测实验室的试点,华大都在这几个名单内。”汪建告知记者。市场广阔据... 查看更多>
中国基因测序技术发展迅速,有望超过美国翘楚下一代基因测序技术。 查看更多>
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蚂蚁淘的创始人兼CEO是钟定松先生,具有十年的从业经验,在业界享有良好的口碑; Ebiomall是跨境直采平台,我们直接从厂家采购,自己的团队负责国际物流和清关,中间没有第三方,蚂蚁淘承诺所售产品仅为正品,假一罚十。
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天根的DNA提取试剂盒中,组织样品要求先将组织制备成单细胞悬液,再进行下一步操作。http://www.tiangen.com/?productShow/t1/1/id/26.html请问大家用过这个试剂盒的是怎么操作的?
构建部分基因文库为什么要用CDNa而不用dna
基因组文库用dna还是rna
请教DOP-PCR和ALU-PCR在扩增BAC/PACDNA制备探针文库时的优劣,或者说都可以。
我正在准备制备细胞样品用于检测凋亡的DNAladder,不知道DNAladder的DNA提取与普通的DNA提取有无不同之处,可否用tripure或者一般的DNA提取试剂盒提取细胞的DNA用于凋亡的DNAladder检测吗?也就是可不可以不用专用的用于凋亡检测的DNAladder提取试剂盒?
QPCR常见问题123
富家子弟2021-07-30

各位好,希望能得到你的建议与帮助!

从人的冰冻组织提取DNA,Nanodrop定量纯度a260/a280在1.86左右,qubit2.0定量浓度达到了100ng/ul以上,按照Thermo的建库试剂盒操作,建库完成后,利用qPCR进行文库定量,有几个文库定量值只有20pM,问题在哪呢?

我试着更换Barcode重新建库,部分文库定量居然达到了600多pM,问了技术支持,他们也没有相关经验,请问群里的大神可否遇到过?

建库试剂盒是在保质期内IONAmpliseqlibrarykit2.0,引物是2013年自己定制的panel,一直储藏在-20℃冰箱,Barcode超出保质期半年。

是单链cDNA,想合成双链cDNA需要另外操作:一、cDNA第二链的合成:1. 第一链反应完成后,取2ul一链产物-20℃冰箱中保存,待电泳检测。其余的产物合并,混匀,然后顺序加入下列试剂(promega):20ul 10×DNA Polymerase I buffer6ul10mM dNTP(自己配制)xuldd H2O1ulRNase H(2U/ul)10ul DNA Polymerase I(10U/ul)总体系为200ul;2. 混匀后,16℃反应2.5小时;3. 70℃灭活10分钟;4. 反应完成后,得到200ul cDNA第二链反应体系,将此体系置于冰上;5.取2ul二链产物,同保存的一链产物一起电泳鉴定。同时上1kb ladder,确定双链的大小范围。注:一链,二链的电泳图是smear,且二链稍比一链大一些。二、双链cDNA末端补平:1. 在第二链反应体系中,顺序加入下列试剂(promega):6ul 10mM dNTP2ul T4 DNA Polymerase(8.7U/ul) 2ul BSA(10mg/ml)2. 稍微离心混匀反应物, 37℃反应至少30分钟,然后75℃灭活10分钟;3. 加入等体积酚/氯仿/异戊醇,剧烈振荡后,常温下13000g离心5分钟;4. 离心后,吸取上清于另一1.5ml eppendof管中,加入等体积氯仿,上下颠倒几次混匀后,常温下13000g离心5分钟;5. 吸取上清至另一eppendof管,加入1/10V3M NaAc(PH5.2)和2.5V预冷的无水乙醇,混匀,-20℃放置过夜以沉淀双链cDNA;6. 第二日,将昨日沉淀物在4℃,13000g离心60分钟以充分沉淀双链cDNA;7.离心完毕,弃上清,加入1ml 70%乙醇洗涤沉淀,常温下13000g离心5分钟;8.离心完毕,弃上清,干燥沉淀至无乙醇气味.注:第3,第4步可以用PCR 纯化试剂盒代替。PCR纯化试剂盒操作流程:1.溶液PE使用前应加入适量体积95%-100%的乙醇,混匀。2.向200ul二链补平产物中加入5倍体积的buffer PB,混匀。3.加入spin column中,13000rpm离心1min。4.加入0.75ml buffer PE,13000rpm离心1min。5.13000rpm,再离心1min。6.将spin column放入一新的离心管中,加入50ul buffer EB,静置10min。7.13000rpm离心2min。8.加入30ul buffer EB,静置10min。9.13000rpm离心2min。10.加入1/10体积3M的NaAc,2.5倍体积无水乙醇,混匀,-20℃沉淀过夜。
axygen dna提取试剂盒有证书的,一般代理商都有证书,
这个是用于代理授权的,这个可以说是唯一辨别产品真伪的方法,
有证书的企业,销售的产品可信度比较高。
产品介绍:
普通的手提或者试剂盒提取的土壤基因组DNA由于常常残留有PCR的强烈抑制物如腐殖酸、棕黄酸等杂质造成实验失败,此外,由于采用了剧烈的玻璃珠击打来破裂菌体,常常造成DNA剪切和降解。本公司经过长期研发开发出了具有自主知识产权的土壤基因组DNA,通过专利配方的腐殖酸和棕黄酸去除试剂配合特殊处理的纯化柱,可以最大程度的去除这些杂质,同时加上多次柱漂洗,确保得到的DNA具有极高纯度,此外独特的抽提和裂解体系可以迅速裂解细胞(壁)和灭活细胞内核酸酶,不需要借助玻璃珠破壁,有效保证了基因组DNA的完整性。
产品特点:
1.本公司独有的专利配方和纯化柱能有效去除腐殖酸等杂质。
2.不需要借助玻璃珠破壁,有效保证了基因组DNA的完整性,长度可达30kb -50kb,可直接用于PCR,Southern-blot和各种酶切反应。
3.兼容性强,适用于各种不同的土壤包括淤泥等提取困难的土壤。
4.多步骤去除各种杂质和抑制物,保证了极高纯度,OD260/OD280典型的比值达1.7~1.9。
5.不需要使用有毒的苯酚等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤。
6.快速,简捷,单个样品操作一般可在60分钟内完成。
你找下,杭州昊鑫生物
作为何种用途啊,还有材料的种类呢?动植物方面差别很大,我个人只了解植物、细菌、藻类、土壤DNA的提取,植物总DNA的哪里的都差不多,价格0.5-2.5元每个样品,关键在研磨和酚类、多糖的去除(抽提),细菌核基因组DNA和土壤宏基因组冻融1.5*CTAB法足以,也没有太好的盒子。volume62提到的磁珠法绝对是非常好的方法,而且十分高效,适合高通量,就是贵啊,对样品的要求也较严格。其实大多数DNA试剂盒都是基于CTAB或SDS法制作的,其优点一般是简单快速,外加药品的来源稳定(自己配药的话这方面可以考虑西格玛分装或者国药,其实真的国药的是很不错的,只是不好搞),再就是配方好了,毕竟试剂公司的研发部门也不是白饭的。
全血基因组DNA提取试剂盒(离心柱型)作用原来具体是这样的:独特的结合液/蛋白酶K迅速裂解细胞和灭活细胞内核酸酶,然后基因组DNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜,再通过一系列快速的漂洗-离心的步骤,抑制物去除液和漂洗液将细胞代谢物,蛋白等杂质去除,最后低盐的洗脱缓冲液将纯净基因组DNA从硅基质膜上洗脱.  试剂盒特点:  不需要使用有毒的苯酚等试剂,也不需要乙醇沉淀等步骤.  快速,简捷,单个样品操作一般可在20分钟内完成.  多次柱漂洗确保高纯度,典型的产量200μl全血可提取出3-6μg,纯度达1.1.9,长度可达30Kb-50kb,可直接用于PCR,Southern-blot和各种酶切反应.  从十几个配方中优选出的红细胞裂解液配方,裂解快速完全,客户可根据需要选择购买.  说明书中针对实验过程出现的疑难做出了详细的解答,帮助你解决实验过程中遇到的问题(如标本中含有血凝块、红细胞裂解不完全、DNA产量低、DNA下游酶切不能切开或者酶切不完全、DNA长度小于15kb、A260吸光值异常偏高、洗脱下来的DNA溶液还带有轻微的颜色等).
规格50T售价300,规格100T售价560。以下为试剂盒使用方法及介绍。保存:室温(15℃-25℃) 干燥保存,复检期12个月,2℃-8℃保存时间更长。试剂盒内容: 向左转|向右转产品简介:本试剂盒采用可以特异性结合DNA的离心吸附柱和独特的缓冲液系统,提取细菌基因组DNA。离心吸附柱中采用的硅基质材料为本公司特有新型材料,能够高效专一吸附DNA,可最大限度去除杂质蛋白及细胞中其他有机化合物。提取的基因组DNA片段大,纯度高,质量稳定可靠。使用本试剂盒提取的基因组DNA可用于各种常规操作,包括酶切、PCR、文库构建、Southern杂交等实验。操作步骤:使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶体上的标签。 所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。1、取细菌培养液1ml,12000rpm离心1min.,尽量吸除上清。2、向菌体中加入200ul溶液A,振荡或用移液器吹打使菌体充分悬浮(如果是革兰氏阳性菌,可在此步骤加入终浓度为20mg/ml的溶菌酶),向悬浮液中加入20ul的RNase A (10mg/ml),充分颠倒混匀,室温放置15-30min。3、向管中加入20ul的蛋白酶K(10mg/ml),充分混匀,55℃消化30-60min,消化期间可颠倒离心管混匀数次,直至样品消化完全为止,此时可见菌液呈清亮粘稠状。4、向管中加入200ul溶液B,充分颠倒混匀,如出现白色沉淀,可于75℃放置15-30min,沉淀即会消失,不影响后续实验。如果溶液未变清亮,说明样品消化不彻底,可能会导致DNA的提取量以及纯度降低,还可能堵塞吸附柱。5、向管中加入200ul无水乙醇,充分混匀,此时还可能会出现絮状沉淀,不影响DNA的提取,可将溶液和絮状沉淀都加入到吸附柱中,静置2min。6、12000rpm离心2min.弃废液,将吸附柱放入收集管中。7、向吸附柱中加入600ul漂洗液(使用前请先检查是否己加入无水乙醇)。12000rpm离心1min,弃废液,将吸附柱放入收集管中。8、向吸附柱中加入600ul漂洗液,12000rpm离心l min, 弃废液,将吸附柱放入收集管中。9、12000rpm离心2min,将吸附柱敞口置于室温或50℃温箱放置数分钟,目的是将吸附柱中残余的漂洗液去除,否则漂洗液中的乙醇会影响后续实验如酶切、PCR等。10、将吸附柱放入一个干净的离心管中,向吸附膜中央悬空滴加50-200ul经65℃水浴预热的洗脱液,室温放置5min,12000rpm离心1min。11、离心所得洗脱液再加入吸附柱中,室温放置2min,12000rpm离心2 min,即可得到高质量的细菌基因组DNA。注意事项:1、样品应避免反复冻融,否则会导致提取的DNA片段较小且提取量下降。2、若试剂盒中的溶液出现沉淀,可在65℃水浴中重新溶解后再使用,不影响提取效果。3、如果实验中的离心步骤出现柱子堵塞的情况,可适当延长离心时间。4、洗脱缓冲液的体积最好不少于50ul,体积过小会影响回收效率;洗脱液的pH值对洗脱效率也有影响,若需要用水做洗脱液应保证其pH值在8.0左右(可用NaOH将水的pH值调至此范围),pH值低于7. 0会降低洗脱效率。DNA产物应保存在-20℃,以防DNA降解。5、DNA浓度及纯度检测:得到的基因组DNA片段的大小与样品保存时间、操作过程中的剪切力等因素有关。 回收得到的DNA片段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。DNA应在OD260处有显著吸收峰,OD260值为1.0相当于大约50μg/ml双链DNA、40μg/ml单链DNA。OD260/0D280比值应为1.7-1.9,如果洗脱时不使用洗脱缓冲液,而使用去离子水,比值会偏低,因为pH值和离子存在会影响光吸收值,但并不表示纯度低。
1、DNA提取问题:现在核算提取试剂盒大部分都是吸附柱法,相信你应该不会操作错误,如果提取之后进行核酸定量结果很低的话,试着再最后一步溶解核算的时候把水稍微加温(37℃就可以了),溶解时间稍微长一些,然后再离心的时候采用分次离心,比如开始你用200ul溶解的话,你可以分两次用100ul水溶解离心,这样可以提高DNA的产率.
2、电泳问题:如果你核酸定量浓度不低的话就考虑电泳问题,电泳的时候加上1kb的marker,如果marker跑不出来说明你凝胶有问题,一般只要marker跑出来了,DNA浓度又比较高,而没有条带这样的现象很少见,DNA提取比较简单而且相当稳定,本人当时做甲基化提取的DNA有一次拿出来电泳忘了放回冰箱了,结果大夏天的在外面放了一天,心怀忐忑的进行了一次电泳,结果条带依然给力,一点都没有降解.