【求助】RNA干扰中转染细胞的筛选
2021-07-27
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leijun7709123
用户
你做转染的目的是什么，没说清楚，别人不好判断！
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ahdongyh
用户你是不是想筛那些稳转的细胞系啊！如果是的话那就看你的质粒上是什么抗性了，很多都是NeoR基因的，也就是能抗G418，通过一定浓度的G418去筛。另外质粒上如果有GFP，看荧光有无好了。选定目的细胞，有限稀释拿到细胞单克隆并验证，这个时间的确是很长的，如果你用的细胞娇贵那就更长了，如果像3T3那样，就容易多了。
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ahdongyh
用户你是不是想筛那些稳转的细胞系啊！如果是的话那就看你的质粒上是什么抗性了，很多都是NeoR基因的，也就是能抗G418，通过一定浓度的G418去筛。另外质粒上如果有GFP，看荧光有无好了。选定目的细胞，有限稀释拿到细胞单克隆并验证，这个时间的确是很长的，如果你用的细胞娇贵那就更长了，如果像3T3那样，就容易多了。
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ahdongyh
用户你是不是想筛那些稳转的细胞系啊！如果是的话那就看你的质粒上是什么抗性了，很多都是NeoR基因的，也就是能抗G418，通过一定浓度的G418去筛。另外质粒上如果有GFP，看荧光有无好了。选定目的细胞，有限稀释拿到细胞单克隆并验证，这个时间的确是很长的，如果你用的细胞娇贵那就更长了，如果像3T3那样，就容易多了。
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