BIOORGAN MED CHEM 2010 SCI影响因子
实验材料 | 细胞 试剂、试剂盒 | 溶解缓冲液RNA酶AT1混合液蛋白酶KDNA加样缓冲液 仪器、耗材 | Eppendorf管移液管琼脂糖凝胶 实验步骤 | 1.将5X105细胞移入无菌的1.5mlEppendorf管中,4℃2000r/min离心5分钟,弃上清。 2.加入20μl溶解缓冲液。用移液管尖头混匀细胞沉淀。 3.加10μlRNA酶A/T1混合液,轻弹管尖混匀,不要形成旋涡。37℃孵育30~120分钟。 4.加10μl蛋白酶K,轻弹管尖混匀,50℃孵育至少90min,也可过夜。 5.加5μl6XDNA加样缓冲液,在含0.5μg/ml溴化乙锭TAE的1%~1.5%琼脂糖凝胶于孔中加DNA样品。 6.低电压电泳,可以促进DNA片段的分离。 7.DNA序列梯最后有紫外光显示,摄影。凋亡细胞形成明显的DNA梯度,而坏死细胞为不清晰的成片条带。活细胞DNA在胶顶部,是一个高分子量条带。 |
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发布于 : 2018-08-03
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