微生物实验中的接种、分离和培养操作步骤
| 试剂、试剂盒 | 丙烯酰胺单体贮液磷酸缓冲液贮液咪唑缓冲液贮液过硫酸铵浓缩胶缓冲液贮液分离胶缓冲液贮液SDSTEMED 实验步骤 | 一、垂直电泳 SDS和常规聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳的方法基本相同。将缓冲液贮液稀释一倍便为连续电泳的电极缓冲液。不连续SDS电泳的电极缓冲液常用Tris-甘氨酸系统（0.025mol/LTris，0.192mol/L甘氨酸，0.1%SDS，pH8.3)。 二、水平电泳 和常规聚丙烯酰胺凝胶电泳一样，SDS水平电泳目前也有三种方式，即经典的搭接滤纸桥的方式和二种半干方式。前者操作麻烦，电泳时间长。半干技术在保证分辨率的前提下，电泳时间只需1小时（分离距离8cm)，且节省材料，操作简便。 搭滤纸桥的SDS水平电泳方法与常规聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法相同。连续和不连续电泳的电极缓冲液和上述的SDS垂直电泳相同。电泳可采用恒电流方式，加样时用低电流，以使样品分子可顺利地进入凝胶，见表5.8。  小孔梯度聚丙烯酰胺凝胶SDS电泳的电极缓冲液也为0.025mol/LTris，0.192mol/L甘氨酸，0.1%SDS，pH8.3。电泳条件则常采用恒功率方式，见表5.9。  |
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发布于 ： 2018-08-06
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