微量免疫电泳实验_微笑smileeveryday
| 实验方法原理 | 免疫电泳法（immunoelectrophoresis）是把蛋白质电泳分离技术（琼脂电泳）和免疫学检测技术（双向扩散）结合起来的检测法。此法在微量的基础上具有分辨率高，灵敏度高，时间短等优点，是很理想的分离和鉴定蛋白质混合物的方法。用于抗原、抗体定性及纯度的测定。在临床诊断方面也有应用价值。 （来源：物化学与分子生物学实验指导，邵雪玲等，武汉大学出版社，2003） | ||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 实验材料 | 人IgG兔抗人IgG 试剂、试剂盒 | 琼脂巴比妥钠牛血清白蛋白 仪器、耗材 | 电泳仪水平电泳槽打孔器微量加样器牙签载玻片恒温水浴小刀 实验步骤 | 1.琼脂板的铺制 如下图铺好琼脂板，然后按下图打孔划槽，电泳时不要把槽中的琼脂挑出来（槽的两纵向平行边先不划开）。  2. 加样 使琼脂板的上孔里充满抗原溶液，下孔里充满着指示蛋白。 3.电泳 同上操作方法，调电流强度为2～4mA/cm。当指示蛋白质到达滤纸的边缘时就可以停止电泳。一般需要40～60min。 4.扩散 电泳结束后，从琼脂板中间的槽里用牙签挑出琼脂凝胶，并加入免疫血清。将琼脂板置温盒内（或培养皿中），盖好盖子放置一夜。次日可以观察到凝胶内出现的沉淀线。一般情况下每一沉淀线即代表一种抗原成分。根据沉淀的数量、位置可以判断抗原的纯度以及抗原蛋白质的种类。微量免疫电泳常用于分析样品的血清成分。 5.观察 免疫电泳的图谱可以直接观察到抗原抗体沉淀线，也可以用0.1%的氨基黑染色后观察。如果需要保存可以拍照。 |
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发布于 ： 2018-08-06
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