常规聚丙烯酰胺凝胶电泳实验——照相、凝胶干燥资讯分析测试...
| 试剂、试剂盒 | 丙烯酰胺单体贮液Tris-甘氨酸缓冲液贮液电极缓冲液样品缓冲液过硫醆铵浓缩胶缓冲液贮液分离胶缓冲液贮液 实验步骤 | 为了发表文章和分析结果的保存，应将有价值的结果在干燥以前先进行照相，以免在干燥时降低分辨率，甚至失去弱带。 凝胶可直接放在带有乳白色屏幕的发光板上，使用细颗粒的全色胶卷和一个中红滤片照相，以增加蛋白带和背景的反差。 虽然平板凝胶可存放在含有7%醋酸的密封的塑料袋中。但是即使如此也只能保存1~3个月，且占有空间太多，不易保管。 凝胶干燥目前有两种方法，厚度大于约1.0mm的凝胶为防止日后凝胶的龟裂，应该用凝胶干燥仪进行干燥。厚度小于1.0mm的凝胶则可采用自然干燥法。 采用凝胶干燥仪干燥。一个好的凝胶干燥仪应有足够大的尺寸，内装加热器和定时器，能抽真空。根据进一步处理的需要，可将凝胶干燥在支持膜上或滤纸上。前者透明，后者不透明。 随着电泳技术的不断发展，薄层平板凝胶正在替代厚胶。在凝胶干燥保存这一点上，薄胶也体现了它的优点。不需要用凝胶干燥仪，采用自然干燥方法也可以长期保存而不会龟裂。通常将凝胶浸泡在用脱色液配制的3%~10%的甘油溶液中约半小时左右，视凝胶的pH，浓度和厚度而定。将带有支持膜的凝胶晾在平板玻璃上室温过夜（待凝胶发黏便可，时间视当地的温、湿度而定)，用保存液浸湿过的玻璃纸或一块透明的塑料膜包在凝胶上，晾干，以上操作避免陷入气泡。如果在上面再压一块玻璃，可使干燥后的凝胶更平整，但会延长干燥时间。对没有支持膜的凝胶在保存液中浸泡后，先将凝胶铺在塑料膜上，再用保存液浸湿的玻璃纸包裹，组成“三明治”，再用玻璃板压紧，晾干。 |
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发布于 ： 2018-08-06
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