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RayBiotech/Human GATA-2 Transcription Factor Activity Assay/1 Plate Kit/TFEH-GATA2-1
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4000-520-616
Antigen Information
Accession Number:
- P23769
Gene ID:
- 2624
Gene Symbols:
- GATA2
Protein Name & Synonyms:
Endothelial transcription factor GATA-2, GATA-binding protein 2
Target Species:
- Human
Assay Format
Specificity:
The olionucleotide/antibody pair provided in this kit recognizes human FRA-2 in whole lysates and nuclear extracts.
Product Specifications
Size:
1, 2, or 5 x 96-Well Microplate Kit
Introduction
GATA transcription factors have a characteristic feature that they all bind to the DNA consensus sequence (A/T)GATA(A/G) of target gene promoters by two adjacent zinc fingers (Cys-X2-Cys-X17-Cys-X2-Cys). These transcription factors regulate differentiation, growth and survival of a wide range of cell types. The GATA family consists of six transcription factors, GATA1 to GATA6, between which the DNA-binding regions, two zinc finger domains are highly conserved. The C-terminal ‘‘C-finger’’ and its adjacent basic region are necessary and sufficient for GATA to bind to its cognate sequence. The N-terminal ‘‘N-finger’’ can also bind DNA independently, but has a preference for GATC core motifs. Both fingers participate in binding the palindromic GATA motif ATCWGATA (W = A/T), resulting in markedly increased affinity.
Product Features
- Specific transcription factor-DNA binding assay
- Perfect alternative to EMSA
- Easy to perform in an ELISA format
- Non-radioactive assay
- High throughput (96-well plate format)
- Assay can be completed within 5 hours
Application Notes
Kit Components
- 96-well Strip Microplate pre-coated with DNA probes
- DNA Binding Buffer
- Positive Control Sample
- Specific Competitor DNA probe
- Non-specific Competitor DNA probe
- Assay Reagent
- DTT
- Wash Buffer
- Primary Antibody
- HRP-conjugated Secondary Antibody
- Antibody Diluent Buffer
- TMB One-Step Substrate Reagent
- Stop Solution
Other Materials Required
- Distilled or deionized water
- 100 ml and 1 liter graduated cylinders
- Tubes to prepare sample dilutions
- Absorbent paper
- Precision pipettes to deliver 2 µl to 1 ml volumes
- Adjustable 1-25 ml pipettes for reagent preparation
- Microplate reader capable of measuring absorbance at 450 nm
Protocol Outline
- Prepare all reagents and samples as instructed in the manual.
- Add 100 µl of sample or positive control to each well.
- Incubate 2 h at RT or O/N at 4 °C.
- Add 100 µl of prepared primary antibody to each well.
- Incubate 1 h at RT.
- Add 100 µl of prepared HRP-secondary antibody to each well.
- Incubate 1 h at RT.
- Add 100 µl of TMB One-Step Substrate Reagent to each well.
- Incubate 30 min at RT.
- Add 50 µl of Stop Solution to each well.
- Read at 450 nm immediately.
Typical Data
Figure 1Transcription factor activity assay of GATA-2 from nuclear extracts of K562 cells or HeLa cells. A. Western-blot result of GATA-2 from cytoplasmic and nuclear fractions. B. Transcription factor activity assay of GATA-2 from nuclear fractions with the RayBio® GATA-2 TF-Activity Assay Kit.
Figure 2Transcription factor activity assay of GATA-2 from nuclear extracts of K562 cells or HeLa cells with the specific competitor or non-specific competitor. The result shows specific binding of GATA-2 to the GATA conserved binding site detected by using the RayBio® GATA-2 TF-Activity Assay Kit.
Storage/Stability
Upon receipt, the positive control should be removed and stored at -20° or -80°C. The remainder of the kit can be stored for up to 6 months at 2-8°C from the date of shipment. Opened Microplate Wells or reagents may be stored for up to 1 month at 2° to 8°C. Return unused wells to the pouch containing desiccant pack, reseal along entire edge. Note: The kit can be used within one year if the whole kit is stored at -20°C upon receipt. Avoid repeated freeze-thaw cycles.
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Manual
SDS
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公司简介
蚂蚁淘（www.ebiomall.cn）是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台，
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运输到中国口岸，最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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流式细胞仪用于分析细胞表达的膜表面抗原和胞内抗原，能够特异性地区分异质性群体中的不同细胞类型、评价分离细胞亚群的纯度、分析细胞大小和体积。该技术主要检测结合了某种细胞抗原分子的荧光偶联抗体或配体的荧光强度。作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指南」 查看更多
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2021-08-21
本实验来源「实用流式细胞术彩色图谱」 王书奎、周振英主编。 查看更多
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2018-08-10
免疫组织化学染色法是指在抗体上结合萤光或可呈色的化学物质，利用免疫学原理中抗原和抗体间专一性的结合反应，检测细胞或组织中是否有目标抗原的存在，此方式不只可以用来测知抗原的表现量也可观察抗原所表现的位置。只要是能够让抗体结合的物质，也就是具有抗原性的物质包括蛋白质、核酸、多糖、病原体等都可侦测。 查看更多
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2018-12-26
Segmented and polarity-marked microtubules are very useful for many different types of in vitro assays. Segmented microtubules are microtubules with a bright s 查看更多
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2021-08-09
所有的生物都是由细胞组成的，只是不同的生物体细胞的大小和形状有所不同。有的细胞人的眼睛可以看得见，如鸟类的蛋，最大的直径近10厘米（鸵鸟蛋）。 查看更多
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活体染色是利用某些无毒或毒性很小的染料来显示细胞内某些天然结构，而不影响细胞的生命活动或产生任何物理、化学变化以致引起细胞的死亡。... 查看更多
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区分活细胞和死亡细胞的关键在于死亡细胞膜转运功能及膜完整性的丧失。许多阳离子染料，如台盼蓝、碘化丙锭（PI）、溴化乙锭（EB）以及7-氨基放线菌素D（7-ADD）等，常被用于检测细胞的存活率。活细胞由于膜具有完整性而不被着色，死亡细胞（如坏死细胞或晚期凋亡细胞）由于其膜完整性的丧失而被着色。 查看更多
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2021-08-01
B细胞膜表面有一种特征性的免疫球蛋白（surface membrane immunoglobulin，SmIg）。早期的前B细胞表达IgM，成熟的B细胞表达IgD、IgM或IgA、IgE等。用荧光标记羊抗人IgG、IgM、IgA、IgD或IgE抗体，分别与活性淋巴细胞反应，于荧光显微镜下观察呈显荧光的细胞（绿色为SmIg阳性的B细胞）。（来源：免疫学实习指导——北京大学医学部基础医学院免疫学系） 查看更多
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2021-08-10
本章所讲述的方法应尽可能地与特定的功能相结合，但在应用到某一给定的问题时，没有硬性和快捷的准则可以判断哪一种方法是最合适的，这取决于许多因素，并非所有的因素都在研究者的控制之中，包括个人的经验、材料的来源、成像的有效性和数据记录的仪器。 查看更多
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2018-08-10
台盼蓝是细胞活性染料，常用于检测细胞膜的完整性。还常用于检测细胞是否存活。活细胞不会被染成蓝色，而死细胞会被染成淡蓝色。 查看更多
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2021-07-25
荧光原位杂交（Fluorescence in situ hybridization FISH）是一门新兴的分子细胞遗传学技术，是20世纪80年代末期在原有的放射性原位杂交技术的基础上发展起来的一种非放射性原位杂交技术。目前这项技术已经广泛应用于动植物基因组结构研究、染色体精细结构变异分析、病毒感染分析、人类产前诊断、肿瘤遗传学和基因组进化研究待许多领域。 查看更多
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2018-08-07
淋巴细胞表面标记主要包括表面受体和表面抗原，淋巴细胞表面标记的检测已广泛用于基础、临床免疫学研究和患者免疫功能的测定。检测方法主要应用同位素、酶和荧光素及其它标记技术。（来源：医学基础免疫学实验指导，主编金伯泉李恩善，第1 版，北京：世界图书出版社，1990） 查看更多
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急求!关于DAPI荧光染料的问题 细胞技术讨论版论坛123
Wang8890912021-07-24
想请问一下，DAPI这个染料到底有没有膜通透性，我通过百度搜索查询关于DAPI染料的，基本上是说它能透过细胞膜对活细胞和死细胞均能染上蓝色；但是也有人说DAPI只可以透过死细胞膜，不能对活细胞进行染色，用以区分活死细胞，到底哪个是对的啊，蒙了！！！！！！
【求助】(急)求荧光染料monodansylcadaverine(MDC)的配方 实验室...123
swl200220012021-07-20
实验要用荧光染料monodansylcadaverine(MDC)（0.1mmol/l)，但不清楚MDC要用什么溶剂溶解，如何配制，及配好后如何储存？请高手们帮忙，谢谢！！！
高中生物实验所有染色剂及其性质详解(完整版)123
枫岛LO03392018-02-18
1、菲林试剂 还原糖 砖红色沉淀（需水域）
2、苏丹三 脂肪 橙红
3、苏丹四 脂肪 红
4、双缩脲 蛋白质 紫
5、龙胆紫 染色质 紫
6、碘 淀粉 蓝
7、健那绿 线粒体 绿
8、甲基绿 DNA 绿
9、吡罗红 RNA 红
10、溴麝香草酚蓝 CO2 由蓝变绿再变黄
11、重铬酸钾 酒精 酸性条件下由橙色变成灰绿
12、醋酸洋红（龙胆紫、改良苯酚品红） 染色质 红
13、台盼蓝 检验活死细胞 死细胞会被染成蓝色（不常用）
2、苏丹三 脂肪 橙红
3、苏丹四 脂肪 红
4、双缩脲 蛋白质 紫
5、龙胆紫 染色质 紫
6、碘 淀粉 蓝
7、健那绿 线粒体 绿
8、甲基绿 DNA 绿
9、吡罗红 RNA 红
10、溴麝香草酚蓝 CO2 由蓝变绿再变黄
11、重铬酸钾 酒精 酸性条件下由橙色变成灰绿
12、醋酸洋红（龙胆紫、改良苯酚品红） 染色质 红
13、台盼蓝 检验活死细胞 死细胞会被染成蓝色（不常用）
用激光共聚焦显微镜观察材料表面粘附的细菌,荧光染料如何选择...123
xyjiayou2021-08-03
【资源】蛋白质、多肽、核酸等生物分子标记染料_问答123
cnbio62172014-05-23
lumiprobeCorporation是美国一家高品质生物技术公司，专业提供分子生物学研究用的活性荧光染料。从2006年开始，公司生产并销售生命科学研究和诊断学应用的优质化学药品。产品主要有：活性染料(ReactiveDye)和SYBRGreenI染料，用于寡核苷酸合成的亚磷酰胺，点击化学和其它试剂。
产品主要应用：点击化学(Clickchemistry)、蛋白质组学研究中的双向荧光差异凝胶电泳(2DDIGE)和实时荧光定量PCR(RealtimePCR)。
N-羟基琥珀酰亚胺酯类活性染料 罗丹明类化合物是以氧杂蕙为母体的碱性咕吨染料，由于特殊的结构及相应的荧光特性，使罗丹明类荧光染料成为化学和生物分析领域中研究较为广泛的课题。与其他常用的荧光染料相比，罗丹明类荧光染料具有光稳定性好、对PH不敏感、较宽的波长范围和较高的荧光量子产率等优点，因此被广泛应用在医学、生物学、环境化学等方面，是分析化学和生物技术领域中最常用的荧光染料。
菁染料是性能优良的荧光标记染料，摩尔吸光系数在荧光染料中是最高的。N-羟基琥珀酰亚胺酯是最常用的脂肪氨基标记试剂，广泛用于蛋白质、氨基酸多肽、抗体、核酸及其他生物分子的标记和检测。通过改变次甲基链的长度,可改变其荧光发射波长，每增加一个双键，按照Huoffman规则正好红移约100nm。
菁染料Cy3和Cy5已成为基因芯片的首选荧光标记物；另外,Cy5,Cy5.5和Cy7，Cy7.5的吸收在近红外区背景非常低，是荧光强度最高、最稳定的长波长染料，特别适合于活体小动物体内成像。但由于菁染料,尤其是不对称菁染料的合成副反应多,副产物极性相近,产物的分离提纯相当困难。菁染料特别是水溶性菁染料分子极性大,分离提纯越加困难。Lumiprobe供应脂溶性和水溶性菁染料。
相关产品：
产品分子结构可替代染料编号：AGF1371A
6-ROX-N-羟基琥珀酰亚胺酯
ROXNHSester,pure6-isomer[img]/KindEditor_4.0.1/attached/image/20130704/20130704102819_7906.jpg[/img]AlexaFluor568编号：AGF1326A
Cy3-N-羟基琥珀酰亚胺酯
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Cy3.5-N-羟基琥珀酰亚胺酯
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编号：AGF1338A
Cy5-N-羟基琥珀酰亚胺酯
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编号：AGF1345A
Cy5.5-N-羟基琥珀酰亚胺酯
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编号：AGF1349A
Cy7-N-羟基琥珀酰亚胺酯
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Cy7.5-N-羟基琥珀酰亚胺酯
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磺酸基-Cy3-N-羟基琥珀酰亚胺酯
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编号：AGF1377A
磺酸基-Cy5-N-羟基琥珀酰亚胺酯
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编号：AGF1379A
磺酸基-Cy7-N-羟基琥珀酰亚胺酯
Sulfo-Cy7NHSester[img]/KindEditor_4.0.1/attached/image/20130704/20130704104047_6968.jpg[/img]相似系列产品：
羰基活性荧光染料
氨基类染料
巯基反应性染料
羧酸类染料
产品主要应用：点击化学(Clickchemistry)、蛋白质组学研究中的双向荧光差异凝胶电泳(2DDIGE)和实时荧光定量PCR(RealtimePCR)。
菁染料是性能优良的荧光标记染料，摩尔吸光系数在荧光染料中是最高的。N-羟基琥珀酰亚胺酯是最常用的脂肪氨基标记试剂，广泛用于蛋白质、氨基酸多肽、抗体、核酸及其他生物分子的标记和检测。通过改变次甲基链的长度,可改变其荧光发射波长，每增加一个双键，按照Huoffman规则正好红移约100nm。
菁染料Cy3和Cy5已成为基因芯片的首选荧光标记物；另外,Cy5,Cy5.5和Cy7，Cy7.5的吸收在近红外区背景非常低，是荧光强度最高、最稳定的长波长染料，特别适合于活体小动物体内成像。但由于菁染料,尤其是不对称菁染料的合成副反应多,副产物极性相近,产物的分离提纯相当困难。菁染料特别是水溶性菁染料分子极性大,分离提纯越加困难。Lumiprobe供应脂溶性和水溶性菁染料。
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Cy3-N-羟基琥珀酰亚胺酯
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DyLight549NHSester
编号：AGF1330A
Cy3.5-N-羟基琥珀酰亚胺酯
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Cy7-N-羟基琥珀酰亚胺酯
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编号：AGF1377A
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编号：AGF1379A
磺酸基-Cy7-N-羟基琥珀酰亚胺酯
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求助:怎样用荧光染料标记蛋白– 960问答123
冷冽゛4152017-10-02
第一批用于细胞生物学的荧光蛋白包括藻胆蛋白（phycobiliproteins）和从蓝藻（cyanobacteria）中提取的触角光合色素（photosynthetic antenna pigments）。这些生物大分子都含有多种胆汁三烯生色基团（bilin chromophores）。这些生色基团都包裹在一种基质结构中，这样就能将它们的淬灭作用降至最小，因此这些藻胆蛋白的荧光亮度要比小分子荧光染料的亮度高出两个数量级。不过这些藻胆蛋白的“个头（分子量高达200KD）”也限制了它们在细胞内的扩散，因此，它们也只能与抗体联用，在流式细胞术试验或ELISA试验中用来检测细胞表面的蛋白质分子。
DNA重组与转化_实验方法123
丿宏旭丶MaGe灬2018-02-24
高中学的只有健那绿 染线粒体的
荧光剂对身体有多大危害,你知道吗?123
2017-10-02
那种一掰就咔嚓一下的，然后出现荧光的能戴在手上的一次性荧光棒有辐射吗？带的时间长点会对身体有害吗?希望专业人士解答，说下自己的工作好吗？
【求助】急问:只有SYBR GREEN I荧光染料可以作相对定量PCR吗?...123
guoziyang19822021-08-12
在流式细胞术分析的荧光染料中,何为背景荧光 123
静子°14452021-08-11
生物物质，比如细胞内的大分子，都会产生荧光。不过比起专门的荧光染料来，强度要低很多。被激光照射后，所产生的荧光就是背景荧光
请问PCR常用荧光染料的化学结构是什么? 123
popofun2017-10-02
PCR核酸检测试剂中常用的荧光染料，如RTGreen、SYBRGreen、EvaGreen等，其核心原料的化学结构是什么？它们到底是菁基染料、酞菁、方酸染料，还是新型罗丹明？有没有相关技术说明？FITC-异硫氰酸荧光素（CAS:3326-32-7）算不算是其中常用的一个？
数字PCR之Evagreen染料法(一) 分析行业新闻123
霸主无名2021-08-14
请问有哪位高手用过EvaGreen的荧光染料，最近有人推荐其性能很好，目前已经有很多原来使用SYBRGreen的国内用户都已经改用该产品，不知具体效果究竟如何，有谁亲自用过啊，介绍一下经验吧，非常感谢！！！
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