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RayBiotech/Human GATA-2 Transcription Factor Activity Assay/1 Plate Kit/TFEH-GATA2-1
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RayBiotech/Human GATA-2 Transcription Factor Activity Assay/1 Plate Kit/TFEH-GATA2-1
品牌 / 
RayBiotech
货号 / 
TFEH-GATA2-1
美元价:
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数    量:
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4000-520-616

Antigen Information

Accession Number:
  • P23769
Gene ID:
  • 2624
Gene Symbols:
  • GATA2
Protein Name & Synonyms:
Endothelial transcription factor GATA-2, GATA-binding protein 2
Target Species:
  • Human

Assay Format

Specificity:
The olionucleotide/antibody pair provided in this kit recognizes human FRA-2 in whole lysates and nuclear extracts.

Product Specifications

Size:
1, 2, or 5 x 96-Well Microplate Kit

Introduction

GATA transcription factors have a characteristic feature that they all bind to the DNA consensus sequence (A/T)GATA(A/G) of target gene promoters by two adjacent zinc fingers (Cys-X2-Cys-X17-Cys-X2-Cys). These transcription factors regulate differentiation, growth and survival of a wide range of cell types. The GATA family consists of six transcription factors, GATA1 to GATA6, between which the DNA-binding regions, two zinc finger domains are highly conserved. The C-terminal ‘‘C-finger’’ and its adjacent basic region are necessary and sufficient for GATA to bind to its cognate sequence. The N-terminal ‘‘N-finger’’ can also bind DNA independently, but has a preference for GATC core motifs. Both fingers participate in binding the palindromic GATA motif ATCWGATA (W = A/T), resulting in markedly increased affinity.

Product Features

  • Specific transcription factor-DNA binding assay
  • Perfect alternative to EMSA
  • Easy to perform in an ELISA format
  • Non-radioactive assay
  • High throughput (96-well plate format)
  • Assay can be completed within 5 hours

Application Notes

Kit Components
  • 96-well Strip Microplate pre-coated with DNA probes
  • DNA Binding Buffer
  • Positive Control Sample
  • Specific Competitor DNA probe
  • Non-specific Competitor DNA probe
  • Assay Reagent
  • DTT
  • Wash Buffer
  • Primary Antibody
  • HRP-conjugated Secondary Antibody
  • Antibody Diluent Buffer
  • TMB One-Step Substrate Reagent
  • Stop Solution
Other Materials Required
  • Distilled or deionized water
  • 100 ml and 1 liter graduated cylinders
  • Tubes to prepare sample dilutions
  • Absorbent paper
  • Precision pipettes to deliver 2 µl to 1 ml volumes
  • Adjustable 1-25 ml pipettes for reagent preparation
  • < li="">
  • Microplate reader capable of measuring absorbance at 450 nm
Protocol Outline
  1. Prepare all reagents and samples as instructed in the manual.
  2. Add 100 µl of sample or positive control to each well.
  3. Incubate 2 h at RT or O/N at 4 °C.
  4. Add 100 µl of prepared primary antibody to each well.
  5. Incubate 1 h at RT.
  6. Add 100 µl of prepared HRP-secondary antibody to each well.
  7. Incubate 1 h at RT.
  8. Add 100 µl of TMB One-Step Substrate Reagent to each well.
  9. Incubate 30 min at RT.
  10. Add 50 µl of Stop Solution to each well.
  11. Read at 450 nm immediately.

Typical Data

Figure 1Transcription factor activity assay of GATA-2 from nuclear extracts of K562 cells or HeLa cells. A. Western-blot result of GATA-2 from cytoplasmic and nuclear fractions. B. Transcription factor activity assay of GATA-2 from nuclear fractions with the RayBio® GATA-2 TF-Activity Assay Kit.

Figure 2Transcription factor activity assay of GATA-2 from nuclear extracts of K562 cells or HeLa cells with the specific competitor or non-specific competitor. The result shows specific binding of GATA-2 to the GATA conserved binding site detected by using the RayBio® GATA-2 TF-Activity Assay Kit.

Storage/Stability

Upon receipt, the positive control should be removed and stored at -20° or -80°C. The remainder of the kit can be stored for up to 6 months at 2-8°C from the date of shipment. Opened Microplate Wells or reagents may be stored for up to 1 month at 2° to 8°C. Return unused wells to the pouch containing desiccant pack, reseal along entire edge. Note: The kit can be used within one year if the whole kit is stored at -20°C upon receipt. Avoid repeated freeze-thaw cycles.

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荧光染料与DNA作用机制123
zhang8404072021-08-17
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听说活性荧光染料只有红黄,并且价格很高
小动物活体荧光成像技术在国内外得到越来越的普及应用,越来越多的科研人员希望能通过该技术来长时间追踪观察活体动物体内肿瘤细胞的生长以及对药物治疗的反应,希望能观察到荧光标记的多肽、抗体、小分子药物在体内的分布和代谢情况。
第一批用于细胞生物学的荧光蛋白包括藻胆蛋白(phycobiliproteins)和从蓝藻(cyanobacteria)中提取的触角光合色素(photosynthetic antenna pigments)。这些生物大分子都含有多种胆汁三烯生色基团(bilin chromophores)。这些生色基团都包裹在一种基质结构中,这样就能将它们的淬灭作用降至最小,因此这些藻胆蛋白的荧光亮度要比小分子荧光染料的亮度高出两个数量级。不过这些藻胆蛋白的“个头(分子量高达200KD)”也限制了它们在细胞内的扩散,因此,它们也只能与抗体联用,在流式细胞术试验或ELISA试验中用来检测细胞表面的蛋白质分子。
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1.小鼠Lewis肺癌细胞DNA含量测定方法
(1).从C57BL/6小鼠上切除肿块,在培养皿内用PBS冲洗.
(2).去除结缔组织及脂肪,剪碎肿块.
(3).小碎片移入1.20×38mm注射针,加压使其通过,于4℃条件下重悬细胞于HBSS中.
(4).将200~300μL细胞悬液(5×105细胞/mL)中加入3mL PI(50μg/mL),染色3LL细胞,于4℃存放20~30分钟.
(5).测定580~750nm之间的发射荧光,以去除末结合PI产生的激发光与发射光谱线之间的重叠部分.
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高中学的只有健那绿 染线粒体的
挺多的呀,AF532,AF555, Cy3,ATTO532之类的。如果是要用来做原料合成其他的分子的话,这几种就不合适了,太贵...罗丹明类的会便宜些
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我想测定中药中总生物碱的含量,不知道用酸性染料法该注意哪些事项?
请各位大侠给予帮助!!
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希望同路人多多交流啊!
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光扫描共聚焦显微镜(Confocal laser scanning microscopeCLSM)近代先进细胞物医析仪器目前激光扫描共聚焦显微技术已用于细胞形态定位、理、立体结构重组、态变化程等研究并提供定量荧光测定、定量图像析等实用研究手段结合其相关物技术形态、
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