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RayBiotech/Human GATA-2 Transcription Factor Activity Assay/1 Plate Kit/TFEH-GATA2-1
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4000-520-616
Antigen Information
Accession Number:
- P23769
Gene ID:
- 2624
Gene Symbols:
- GATA2
Protein Name & Synonyms:
Endothelial transcription factor GATA-2, GATA-binding protein 2
Target Species:
- Human
Assay Format
Specificity:
The olionucleotide/antibody pair provided in this kit recognizes human FRA-2 in whole lysates and nuclear extracts.
Product Specifications
Size:
1, 2, or 5 x 96-Well Microplate Kit
Introduction
GATA transcription factors have a characteristic feature that they all bind to the DNA consensus sequence (A/T)GATA(A/G) of target gene promoters by two adjacent zinc fingers (Cys-X2-Cys-X17-Cys-X2-Cys). These transcription factors regulate differentiation, growth and survival of a wide range of cell types. The GATA family consists of six transcription factors, GATA1 to GATA6, between which the DNA-binding regions, two zinc finger domains are highly conserved. The C-terminal ‘‘C-finger’’ and its adjacent basic region are necessary and sufficient for GATA to bind to its cognate sequence. The N-terminal ‘‘N-finger’’ can also bind DNA independently, but has a preference for GATC core motifs. Both fingers participate in binding the palindromic GATA motif ATCWGATA (W = A/T), resulting in markedly increased affinity.
Product Features
- Specific transcription factor-DNA binding assay
- Perfect alternative to EMSA
- Easy to perform in an ELISA format
- Non-radioactive assay
- High throughput (96-well plate format)
- Assay can be completed within 5 hours
Application Notes
Kit Components
- 96-well Strip Microplate pre-coated with DNA probes
- DNA Binding Buffer
- Positive Control Sample
- Specific Competitor DNA probe
- Non-specific Competitor DNA probe
- Assay Reagent
- DTT
- Wash Buffer
- Primary Antibody
- HRP-conjugated Secondary Antibody
- Antibody Diluent Buffer
- TMB One-Step Substrate Reagent
- Stop Solution
Other Materials Required
- Distilled or deionized water
- 100 ml and 1 liter graduated cylinders
- Tubes to prepare sample dilutions
- Absorbent paper
- Precision pipettes to deliver 2 µl to 1 ml volumes
- Adjustable 1-25 ml pipettes for reagent preparation
- Microplate reader capable of measuring absorbance at 450 nm
Protocol Outline
- Prepare all reagents and samples as instructed in the manual.
- Add 100 µl of sample or positive control to each well.
- Incubate 2 h at RT or O/N at 4 °C.
- Add 100 µl of prepared primary antibody to each well.
- Incubate 1 h at RT.
- Add 100 µl of prepared HRP-secondary antibody to each well.
- Incubate 1 h at RT.
- Add 100 µl of TMB One-Step Substrate Reagent to each well.
- Incubate 30 min at RT.
- Add 50 µl of Stop Solution to each well.
- Read at 450 nm immediately.
Typical Data
Figure 1Transcription factor activity assay of GATA-2 from nuclear extracts of K562 cells or HeLa cells. A. Western-blot result of GATA-2 from cytoplasmic and nuclear fractions. B. Transcription factor activity assay of GATA-2 from nuclear fractions with the RayBio® GATA-2 TF-Activity Assay Kit.
Figure 2Transcription factor activity assay of GATA-2 from nuclear extracts of K562 cells or HeLa cells with the specific competitor or non-specific competitor. The result shows specific binding of GATA-2 to the GATA conserved binding site detected by using the RayBio® GATA-2 TF-Activity Assay Kit.
Storage/Stability
Upon receipt, the positive control should be removed and stored at -20° or -80°C. The remainder of the kit can be stored for up to 6 months at 2-8°C from the date of shipment. Opened Microplate Wells or reagents may be stored for up to 1 month at 2° to 8°C. Return unused wells to the pouch containing desiccant pack, reseal along entire edge. Note: The kit can be used within one year if the whole kit is stored at -20°C upon receipt. Avoid repeated freeze-thaw cycles.
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Manual
SDS
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运输到中国口岸，最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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活体染色是利用某些无毒或毒性很小的染料来显示细胞内某些天然结构，而不影响细胞的生命活动或产生任何物理、化学变化以致引起细胞的死亡。... 查看更多
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2018-08-10
台盼蓝是细胞活性染料，常用于检测细胞膜的完整性。还常用于检测细胞是否存活。活细胞不会被染成蓝色，而死细胞会被染成淡蓝色。 查看更多
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2021-08-05
荧光素标记的抗体与标本中的抗原特异性结合后，形成抗原抗体复合物并带有荧光素；再用荧光显微镜检查上述标本，荧光素受光照射激发就会发出荧光，在显微镜下可以清晰地看见荧光所在的细胞，从而能检测某种抗原的存在与否，并可结合定量技术计算含量。内容来源：组织培养和分子细胞学技术。（北京出版社） 查看更多
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2018-08-06
在间期细胞核中，女性X 染色质和男性Y 染色质均可用特殊染色法显示出来。内容来源：组织培养和分子细胞学技术。（北京出版社） 查看更多
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2018-12-26
Invertebrate embryos develop at different rates depending on the temperature of incubation. Descriptive stages based on the number of cells and their arrangeme 查看更多
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2021-09-20
L-乳酸脱氢酶测定实验的相关实验步骤、实验技巧、实验protocol、实验经验及常见问题。<link rel="stylesheet" type="text/css" href="/ueditor/themes/ifra... 查看更多
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2018-08-10
在临床细胞遗传学历史上，G 显带作为「金标准」用于检测临床样本的总染色体异常，从简单的数量改变到识别复杂的结构重排。「标记染色体」或「衍生染色体」指的是那些 G 带不能鉴定和识别的异常。这通常是因为重排的复杂性造成缺乏连续的可识别的带型。各种多色荧光原位杂交（FISH) 的染色体涂染技术 [1，2] 的出现能够识别所有的标记染色体，但应用这些技术快速鉴定复杂染色体重排的目标仍然需要精心的设计来达到。 查看更多
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2018-12-26
Integrating extrachromasomal arrays into the C. elegans chromosomesWhy and how to do itby Michael Koelle12/20/94What is the benefit of integrating an extrachro 查看更多
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2018-08-05
本章介绍了酵母遗传学实验相关技术和方案。 查看更多
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2018-08-06
使用重组的果蝇因子进行染色质装配实验的相关实验步骤、实验技巧、实验protocol、实验经验及常见问题。<link rel="stylesheet" type="text/css" href="/ueditor/them... 查看更多
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2018-08-06
本节提供了多种对癌症患者的血液标本的细胞进行遗传学分析的实验方法。由于研究方便，白细胞很久以来一直被用来分析染色体重组。观察到标志性重组染色体，如费城染色体（Ph 染色体）有助于诊断和后续治疗。许多肿瘤特异性的标志染色体已经在白血病中被发现，它们的发现对于在早期选择适合的治疗方案非常重要。细胞遗传学分析还用于对骨髓移植后的移植物分型。 查看更多
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阅读下面语段.完成下题. 金龟子科中有一些贪食树根或农作物根的...123
星月青城2018-01-26
运用了哪些说明方法，有什么作用？新兴的生物循环再生技术将染料及其他材料完全去除，无限循环再生。这和在一定条件下从石油中制造出聚醋原料再焚烧相比，能量消耗量及二氧化碳排出量均可削减80%。而回收的服装可以返回工厂，重新再生为长纤维。这种方法为延...
同一基因突变,为何向左为LQT3,向右为Brugada综合征?_心肌细胞123
第537位访客2018-02-18
在生物中，健那绿染液是专一性染线粒体的活细胞染料。
健那绿染液是一种活体染液，实验对象必须是活细胞，健那绿可以使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色，而细胞质接近无色。
健那绿染液是一种活体染液，实验对象必须是活细胞，健那绿可以使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色，而细胞质接近无色。
荧光颜料有毒么? 123
713417ztUO2021-08-05
绝大部分合成染料本身都是没有特殊味道的，但你拿到的成品染料可能有味道，因在商品化过程都添加了助剂，有些助剂味道是很大的，比如木质素磺酸钠等。
Akce的个人空间 ( ゜ ゜)つロ 乾杯~ Bilibili123
td哥哥69262018-02-18
PCR生物实验常用的染料有哪些
分子生物学实验的染料主要涉及到核酸染料和蛋白质染料.核酸染料主要有EB（溴化乙锭,高致癌性）,goldview,sybr green（实时定量PCR时常用染料）.这些染料可以和核酸双链分子特异性结合发出强荧光而被检测到.蛋白质染料最常用的是考马斯亮蓝 R-250,硝酸银.其中硝酸银有时也用于核酸染色.
染料分为天然染料和人工染料两种。天然染料有胭脂虫红、地衣素、石蕊和苏木素等，它们多从植物体中提取得到，其成分复杂，有些至今还未搞清楚。目前主要采用人工染料，也称煤焦油染料，多从煤焦油中提取获得，是苯的衍生物。多数染料为带色的有机酸或碱类，难溶于水，而易溶于有机溶剂中。为使它们易溶于水，通常制成盐类。
染料可按其电离后染料离子所带电荷的性质，分为酸性染料、碱性染料、中性（复合）染料和单纯染料四大类。 标本干燥后即进行固定，固定的目的有三个：
1）杀死微生物，固定细胞结构。
2）保证菌体能更牢的粘附在载玻片上，防止标本被水冲洗掉。
3）改变染料对细胞的通透性，因为死的原生质比活的原生质易于染色。
分子生物学实验的染料主要涉及到核酸染料和蛋白质染料.核酸染料主要有EB（溴化乙锭,高致癌性）,goldview,sybr green（实时定量PCR时常用染料）.这些染料可以和核酸双链分子特异性结合发出强荧光而被检测到.蛋白质染料最常用的是考马斯亮蓝 R-250,硝酸银.其中硝酸银有时也用于核酸染色.
染料分为天然染料和人工染料两种。天然染料有胭脂虫红、地衣素、石蕊和苏木素等，它们多从植物体中提取得到，其成分复杂，有些至今还未搞清楚。目前主要采用人工染料，也称煤焦油染料，多从煤焦油中提取获得，是苯的衍生物。多数染料为带色的有机酸或碱类，难溶于水，而易溶于有机溶剂中。为使它们易溶于水，通常制成盐类。
染料可按其电离后染料离子所带电荷的性质，分为酸性染料、碱性染料、中性（复合）染料和单纯染料四大类。 标本干燥后即进行固定，固定的目的有三个：
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3）改变染料对细胞的通透性，因为死的原生质比活的原生质易于染色。
【评论】谁知道赛百盛出品的GoldView核酸染料的具体情况123
arpe06202007-04-09
谁知道赛百盛出品的GoldView核酸染料的具体情况
前一阵子实验室开始使用一种新的核酸染料-goldview,取代原先用的溴化乙锭-EB.goldview现在是由赛百盛出售.以下摘自官方网站:
GoldViewTM核酸染料——使用说明
概述
GoldViewTM是一种可代替溴化乙锭（EB）的新型核酸染料，采用琼脂糖电泳检测DNA时，GoldViewTM与核酸结合后能产生很强的荧光信号，其灵敏度与EB相当，使用方法与之完全相同。在紫外透射光下双链DNA呈现绿色荧光，而单链DNA呈红色荧光。GoldView不仅能染DNA，也可用于染RNA。
通过Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠睾丸精母细胞染色体畸变试验，致突变性结果均为阴性；而溴化乙锭（EB）是一种强致癌剂。因此用GoldviewTM代替EB不失为一种明智的选择。
使用方法
1.将100ml琼脂糖凝胶溶液（浓度一般为0.8%~2%）在微波炉中融化。
2.加入5µlGoldView，轻轻摇匀，避免产生气泡。
3.冷却至不烫手时倒胶，待琼脂糖凝胶完全凝固后上样电泳。
4.电泳完毕在紫外灯下观察。若使用数码相机照像记录，则关闭相机的闪光灯，放在自动档即可；若使用凝胶成像系统照相，通过调节光圈、曝光时间，选择合适的滤光片，可得到成像清晰、背景较低的照片。
注意事项
1.胶厚度不宜超过0.5cm，胶太厚会影响检测的灵敏度。
2.加入GoldView的琼脂糖凝胶反复融化可能会对核酸检测的灵敏度产生一定影响，但不明显。
3.通过凝胶电泳回收DNA片段时，建议使用GoldView染色，在自然光下切割DNA条带，避免紫外线与EB对目的DNA产生的损伤，可明显提高克隆、转化、转录等分子生物学下游操作的效率。
4.虽然未发现GoldView有致癌作用，但对皮肤、眼睛会有一定的刺激，操作时应戴上手套。
电泳结果显示GV灵敏度与EB相当
问题1.Goldview到底是不是丫啶橙？
2.赛百盛不公布其成分的原因是害怕其为丫啶橙还是出于技术保密？
前一阵子实验室开始使用一种新的核酸染料-goldview,取代原先用的溴化乙锭-EB.goldview现在是由赛百盛出售.以下摘自官方网站:
GoldViewTM核酸染料——使用说明
概述
GoldViewTM是一种可代替溴化乙锭（EB）的新型核酸染料，采用琼脂糖电泳检测DNA时，GoldViewTM与核酸结合后能产生很强的荧光信号，其灵敏度与EB相当，使用方法与之完全相同。在紫外透射光下双链DNA呈现绿色荧光，而单链DNA呈红色荧光。GoldView不仅能染DNA，也可用于染RNA。
通过Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠睾丸精母细胞染色体畸变试验，致突变性结果均为阴性；而溴化乙锭（EB）是一种强致癌剂。因此用GoldviewTM代替EB不失为一种明智的选择。
使用方法
1.将100ml琼脂糖凝胶溶液（浓度一般为0.8%~2%）在微波炉中融化。
2.加入5µlGoldView，轻轻摇匀，避免产生气泡。
3.冷却至不烫手时倒胶，待琼脂糖凝胶完全凝固后上样电泳。
4.电泳完毕在紫外灯下观察。若使用数码相机照像记录，则关闭相机的闪光灯，放在自动档即可；若使用凝胶成像系统照相，通过调节光圈、曝光时间，选择合适的滤光片，可得到成像清晰、背景较低的照片。
注意事项
1.胶厚度不宜超过0.5cm，胶太厚会影响检测的灵敏度。
2.加入GoldView的琼脂糖凝胶反复融化可能会对核酸检测的灵敏度产生一定影响，但不明显。
3.通过凝胶电泳回收DNA片段时，建议使用GoldView染色，在自然光下切割DNA条带，避免紫外线与EB对目的DNA产生的损伤，可明显提高克隆、转化、转录等分子生物学下游操作的效率。
4.虽然未发现GoldView有致癌作用，但对皮肤、眼睛会有一定的刺激，操作时应戴上手套。
电泳结果显示GV灵敏度与EB相当
问题1.Goldview到底是不是丫啶橙？
2.赛百盛不公布其成分的原因是害怕其为丫啶橙还是出于技术保密？
用激光共聚焦显微镜观察材料表面粘附的细菌,荧光染料如何选择...123
xyjiayou2021-08-03
【资源】蛋白质、多肽、核酸等生物分子标记染料_问答123
cnbio62172014-05-23
lumiprobeCorporation是美国一家高品质生物技术公司，专业提供分子生物学研究用的活性荧光染料。从2006年开始，公司生产并销售生命科学研究和诊断学应用的优质化学药品。产品主要有：活性染料(ReactiveDye)和SYBRGreenI染料，用于寡核苷酸合成的亚磷酰胺，点击化学和其它试剂。
产品主要应用：点击化学(Clickchemistry)、蛋白质组学研究中的双向荧光差异凝胶电泳(2DDIGE)和实时荧光定量PCR(RealtimePCR)。
N-羟基琥珀酰亚胺酯类活性染料 罗丹明类化合物是以氧杂蕙为母体的碱性咕吨染料，由于特殊的结构及相应的荧光特性，使罗丹明类荧光染料成为化学和生物分析领域中研究较为广泛的课题。与其他常用的荧光染料相比，罗丹明类荧光染料具有光稳定性好、对PH不敏感、较宽的波长范围和较高的荧光量子产率等优点，因此被广泛应用在医学、生物学、环境化学等方面，是分析化学和生物技术领域中最常用的荧光染料。
菁染料是性能优良的荧光标记染料，摩尔吸光系数在荧光染料中是最高的。N-羟基琥珀酰亚胺酯是最常用的脂肪氨基标记试剂，广泛用于蛋白质、氨基酸多肽、抗体、核酸及其他生物分子的标记和检测。通过改变次甲基链的长度,可改变其荧光发射波长，每增加一个双键，按照Huoffman规则正好红移约100nm。
菁染料Cy3和Cy5已成为基因芯片的首选荧光标记物；另外,Cy5,Cy5.5和Cy7，Cy7.5的吸收在近红外区背景非常低，是荧光强度最高、最稳定的长波长染料，特别适合于活体小动物体内成像。但由于菁染料,尤其是不对称菁染料的合成副反应多,副产物极性相近,产物的分离提纯相当困难。菁染料特别是水溶性菁染料分子极性大,分离提纯越加困难。Lumiprobe供应脂溶性和水溶性菁染料。
相关产品：
产品分子结构可替代染料编号：AGF1371A
6-ROX-N-羟基琥珀酰亚胺酯
ROXNHSester,pure6-isomer[img]/KindEditor_4.0.1/attached/image/20130704/20130704102819_7906.jpg[/img]AlexaFluor568编号：AGF1326A
Cy3-N-羟基琥珀酰亚胺酯
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编号：AGF1330A
Cy3.5-N-羟基琥珀酰亚胺酯
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编号：AGF1338A
Cy5-N-羟基琥珀酰亚胺酯
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编号：AGF1345A
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编号：AGF1349A
Cy7-N-羟基琥珀酰亚胺酯
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Cy7.5-N-羟基琥珀酰亚胺酯
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磺酸基-Cy3-N-羟基琥珀酰亚胺酯
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编号：AGF1377A
磺酸基-Cy5-N-羟基琥珀酰亚胺酯
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羰基活性荧光染料
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DyLight649NHSester
编号：AGF1345A
Cy5.5-N-羟基琥珀酰亚胺酯
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DyLight680NHSester
编号：AGF1349A
Cy7-N-羟基琥珀酰亚胺酯
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Cy7.5-N-羟基琥珀酰亚胺酯
Cy7.5NHSester[img]/KindEditor_4.0.1/attached/image/20130704/20130704103756_5406.jpg[/img]编号：AGF1374A
磺酸基-Cy3-N-羟基琥珀酰亚胺酯
Sulfo-Cy3NHSester[img]/KindEditor_4.0.1/attached/image/20130704/20130704103830_1656.jpg[/img]AlexaFluor546
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编号：AGF1377A
磺酸基-Cy5-N-羟基琥珀酰亚胺酯
Sulfo-Cy5NHSester[img]/KindEditor_4.0.1/attached/image/20130705/20130705095752_6656.jpg[/img]AlexaFluor647
DyLight649
编号：AGF1379A
磺酸基-Cy7-N-羟基琥珀酰亚胺酯
Sulfo-Cy7NHSester[img]/KindEditor_4.0.1/attached/image/20130704/20130704104047_6968.jpg[/img]相似系列产品：
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巯基反应性染料
羧酸类染料
荧光染料激发光和发射光什么意思123
鱼死网破痰蘸92021-08-09
荧光激发光谱：让不同波长的激发光激发荧光物质使之发生荧光，而让荧光以固定的发射波长照射到检测器上，然后以激发光波长为横坐标，以荧光强度为纵坐标所绘制的图，即为荧光激发光谱。荧光发射光谱的形状与激发光的波长无关 。 荧光发射光谱：...
【一般的染料是不是都含荧光剂】123
晚枫秋竹00432017-10-02
染料的荧光跟重金属之间没有必然联系。一般含有重金属的染料都是金属络合染料，现在几乎绝迹了。现在大多数染料都是活性、直接、还原和分散这几种类型。都是不含重金属的。而带有荧光的染料是非常少的，只有那么几种，跟重金属没有丝毫关系。
高中生物实验所有染色剂及其性质详解(完整版)123
枫岛LO03392018-02-18
1、菲林试剂 还原糖 砖红色沉淀（需水域）
2、苏丹三 脂肪 橙红
3、苏丹四 脂肪 红
4、双缩脲 蛋白质 紫
5、龙胆紫 染色质 紫
6、碘 淀粉 蓝
7、健那绿 线粒体 绿
8、甲基绿 DNA 绿
9、吡罗红 RNA 红
10、溴麝香草酚蓝 CO2 由蓝变绿再变黄
11、重铬酸钾 酒精 酸性条件下由橙色变成灰绿
12、醋酸洋红（龙胆紫、改良苯酚品红） 染色质 红
13、台盼蓝 检验活死细胞 死细胞会被染成蓝色（不常用）
2、苏丹三 脂肪 橙红
3、苏丹四 脂肪 红
4、双缩脲 蛋白质 紫
5、龙胆紫 染色质 紫
6、碘 淀粉 蓝
7、健那绿 线粒体 绿
8、甲基绿 DNA 绿
9、吡罗红 RNA 红
10、溴麝香草酚蓝 CO2 由蓝变绿再变黄
11、重铬酸钾 酒精 酸性条件下由橙色变成灰绿
12、醋酸洋红（龙胆紫、改良苯酚品红） 染色质 红
13、台盼蓝 检验活死细胞 死细胞会被染成蓝色（不常用）
荧光染料的简介及BODIPY类的发展历程 123
乌退思2021-07-22
荧光染料泛指吸收某一波长的光波后能发射出另一波长大于吸收光的光波的物质。它们大多是含有苯环或杂环并带有共轭双键的化合物。向左转|向右转
活体成像dir染料与cy5.5荧光染料哪个好– 960问答123
小星星___02672017-10-02
小动物活体荧光成像技术在国内外得到越来越的普及应用，越来越多的科研人员希望能通过该技术来长时间追踪观察活体动物体内肿瘤细胞的生长以及对药物治疗的反应，希望能观察到荧光标记的多肽、抗体、小分子药物在体内的分布和代谢情况。
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