染料信息
-20℃保存,有效期见外包装。产品应用Super-n-stain® 抗体标记试剂盒包含您需要的利用本公司YF 染料或生物素(Biotin)迅速标记抗体的所有组分。标记过程只需将抗体和染料简单混合于试剂盒内提供的反应缓冲溶液中,进行短时间的孵育即可。Super-n-stain® 染料在标记结束时不再反应,因此无需进一步纯化步骤。标记后,约4-6分子染料与1分子抗体共价结合。Super-n-stain®是共价标记,所以用它标记的抗体可以用于多色荧光染色,而不会发生抗体间的染料转移现象。Super-n-stain® 标记可以兼容NaN3、低浓度的甘油、Tris和甘氨酸。试剂盒里提供的微型超滤离心管可以在标记前快速去除不兼容的小分子抗体稳定剂。标准Super-n-stain® 标记步骤可以用于多于IgG (μg) 4倍的BSA或明胶样品。根据您希望标记的IgG量来选择试剂盒大小。优化标记步骤适用于稳定蛋白质过剩或腹水的IgG样品。在这种情况下,根据需要标记抗体样本的蛋白质总量(IgG + 稳定剂,或腹水中总蛋白量)来选择试剂盒大小。优化步骤也可用于标记IgG量低于最低范围的样品,通过添加稳定剂蛋白使总蛋白量达到试剂盒的标记范围。优化步骤不建议用于标记天然抗血清或杂交瘤细胞株培养上清,因为这些样本的抗体含量相对于总蛋白非常低。当用荧光标记抗体直接进行免疫荧光时,您可能需要使用更高浓度的抗体来实现类似间接免疫荧光法检测(一抗加标记二抗)染色的强度。在我们的内部测试中发现,间接免疫荧光染色结果是直接免疫荧光染色信号的三倍左右。标记二抗仍可以连接到使用Super-n-stain® 试剂盒标记的一抗上,因此如果多个来自同一物种的抗体用于多色免疫荧光染色法,二抗无法区分同一物种来源的未标记的一抗和使用Super-n-stain® 试剂盒标记的一抗。Super-n-stain®标记抗体可以用作传统间接免疫荧光法检测后的三级染色。UElandy 还提供生物素Super-n-stain® 标记试剂盒、二次检测使用的YF 染料标记的链霉亲和素或YF染料标记的单克隆生物素抗体。我们还提供酶标记和荧光蛋白标记的 Super-n-stain®试剂盒,以及小配体标记试剂盒(请访问www.uelandy.com)。更多信息,请参见常见问题。
UE-S601106S/S601106M/S601106LYF 染料是一种水溶性较好、用于标记蛋白和核酸的小分子有机染料。我们可提供多达 20 种的此类 YF 染料。
每种 YF 染料,我们都提供三种不同抗体标记量的试剂盒,分别是:5-20 μg, 20-50 μg, 50-100 μg。对于没有稳定剂的抗体标记,根据抗体规格,选择其中一种即可,含有稳定剂的抗体标记,请参考产品描述中的表 1。
如果待标记的抗体量在试剂盒范围内,无需改变染料量或反应时间,因为 Super-n-stain® 试剂盒中染料和反应缓冲液可以确保较好的标记效果。
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产品主要应用:点击化学(Clickchemistry)、蛋白质组学研究中的双向荧光差异凝胶电泳(2DDIGE)和实时荧光定量PCR(RealtimePCR)。
菁染料是性能优良的荧光标记染料,摩尔吸光系数在荧光染料中是最高的。N-羟基琥珀酰亚胺酯是最常用的脂肪氨基标记试剂,广泛用于蛋白质、氨基酸多肽、抗体、核酸及其他生物分子的标记和检测。通过改变次甲基链的长度,可改变其荧光发射波长,每增加一个双键,按照Huoffman规则正好红移约100nm。
菁染料Cy3和Cy5已成为基因芯片的首选荧光标记物;另外,Cy5,Cy5.5和Cy7,Cy7.5的吸收在近红外区背景非常低,是荧光强度最高、最稳定的长波长染料,特别适合于活体小动物体内成像。但由于菁染料,尤其是不对称菁染料的合成副反应多,副产物极性相近,产物的分离提纯相当困难。菁染料特别是水溶性菁染料分子极性大,分离提纯越加困难。Lumiprobe供应脂溶性和水溶性菁染料。
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产品分子结构可替代染料编号:AGF1371A
6-ROX-N-羟基琥珀酰亚胺酯
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羧酸类染料
分子生物学实验的染料主要涉及到核酸染料和蛋白质染料.核酸染料主要有EB(溴化乙锭,高致癌性),goldview,sybr green(实时定量PCR时常用染料).这些染料可以和核酸双链分子特异性结合发出强荧光而被检测到.蛋白质染料最常用的是考马斯亮蓝 R-250,硝酸银.其中硝酸银有时也用于核酸染色.
染料分为天然染料和人工染料两种。天然染料有胭脂虫红、地衣素、石蕊和苏木素等,它们多从植物体中提取得到,其成分复杂,有些至今还未搞清楚。目前主要采用人工染料,也称煤焦油染料,多从煤焦油中提取获得,是苯的衍生物。多数染料为带色的有机酸或碱类,难溶于水,而易溶于有机溶剂中。为使它们易溶于水,通常制成盐类。
染料可按其电离后染料离子所带电荷的性质,分为酸性染料、碱性染料、中性(复合)染料和单纯染料四大类。 标本干燥后即进行固定,固定的目的有三个:
1)杀死微生物,固定细胞结构。
2)保证菌体能更牢的粘附在载玻片上,防止标本被水冲洗掉。
3)改变染料对细胞的通透性,因为死的原生质比活的原生质易于染色。
抗原抗体反应后,利用特殊仪器测定荧光强度而推算被测物浓度的检测方法
⑴荧光物质
1)荧光色素
许多物质都可产生荧光现象,但并非都可用作荧光色素。只有那些能产生明显的荧光并能作为染料使用的有机化合物才能称为免疫荧光色素或荧光染料。常用的荧光色素有:
⑴异硫氰酸荧光素(fluoresceinisothiocyanate,FITC)为黄色或橙黄色结晶粉末,易溶于水或酒精等溶剂。分子量为389.4,最大吸收光波长为490--495nm,最大发射光波长520--530nm,呈现明亮的黄绿色荧光,结构式如下:
有两种同分异结构,其中异构体Ⅰ型在效率、稳定性、与蛋白质结合能力等方面都更好,在冷暗干燥处可保存多年,是应用最广泛的荧光素。其主要优点是:①人眼对黄绿色较为敏感,②通常切片标本中的绿色荧光少于红色。
⑵四乙基罗丹明(rhodamine,RIB200)为橘红色粉末,不溶于水,易溶于酒精和丙酮。性质稳定,可长期保存。结构式如下:
最大吸收光波长为570nm,最大发射光波长为595~600nm,呈橘红色荧光。
⑶四甲基异硫氰酸罗丹明(tetramethylrhodamineisothiocyanate,TRITC)结构式如下:
最大吸引光波长为550nm,最大发射光波长为620nm,呈橙红色荧光。与FITC的翠绿色荧光对比鲜明,可配合用于双重标记或对比染色。其异硫氰基可与蛋白质结合,但荧光效率较低。
⑵其他荧光物质
1)酶作用后产生荧光的物质某些化合物本身无荧光效应,一旦经酶作用便形成具有强荧光的物质。例如4-甲基伞酮-β-D半乳糖苷受β-半乳糖苷酶的作用分解成4-甲基伞酮,后者可发出荧光,激发光波长为360nm,发射光波长为450nm。其他如碱性酸酶的底物4-甲基伞酮磷酸盐和辣根过氧化物酶的底物对羟基苯乙酸等。
2)镧系螯合物某些3价稀土镧系元素如铕(Eu3 )、铽(Tb3 )、铈(Ce3 )等的螯合物经激发后也可发射特征性的荧光,其中以Eu3 应用最广。Eu3
螯合物的激发光波长范围宽,发射光波长范围窄,荧光衰变时间长,最适合用于分辨荧光免疫测定。展开

