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6-FAM-11-dCTP
Metkinen Chemistry - reagents for DNA and RNA synthesisMetkinen Chemistry - Reagents for RNA and DNA synthesis.
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6-FAM-11-dCTP

5-[3-(6-(fluoresceinyl-6-carboxamido)hexanoylamido)-propenyl]-2"-deoxycytidine-5"-triphosphate, triethylammonium or tetralithium (optional) saltCatalogue number: 303-22Purity: > 95%Diluent: dd-H2OStorage: Freezer storage in dark, -10 to -30°C, dry.Stability in Solution: 1 month as 1 mM solution in water or neutral buffers at +4°C in dark, 6 months as 1 mM solution in water or neutral buffers at -20°C in dark.Price and Ordering Information
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所有产品都有正品保障,透析袋现货,为美国spectrumlabs、viskase、MFPI cellu.sep三大公司生产留言框 感兴趣的产品: * 留言内容: * 您的姓名: * 您... 查看更多>
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实验小白刚刚起步,一般采用等质量上样的方法,但我算的上样量是没加缓冲液之前的,加完缓冲液蛋白样品浓度会变么?师姐说不会变,就按照算好的上样量加就行。

前几天提的样按50ug算每个样本的上样量也只有上5ul左右,按师姐说的就那么上了,结果发完光只有内参有条带,目标蛋白一点也没有,但以前做过一次是出过一点趋势的,而且这次整个过程感觉做的很仔细,发完光结果也很干净整齐,所以我在想是不是跟上样量有关系?上样缓冲液加入之后会使样本浓度稀释五倍么,这样的话上样量就得乘5。

变性前后加上样缓冲液的区别是什么呢?哪一种会改变蛋白浓度从而改变上样量呢?


今天老师跟我说,mark可以用蛋白上样缓冲液稀释,两者一比一稀释,蛋白上样缓冲液用两成的!这样可以吗?各位大神,给个答案吧!
蛋白质(经硫酸铵和等电点沉淀后用1MKCL复溶)一加2x或6X上样缓冲液就产生沉淀,试问何故?怎样解决?
经搜索发现类似的问题,但人家的裂解液中含盐酸胍,而我的溶液中是不含含盐酸胍啊。
请做蛋白质的行家帮忙解答,谢谢。
提取蛋白,western上样前,加上样缓冲液煮,煮之前是澄清透明的,煮完就有挺多的沉淀生成,不知道什么原因,怎么解决,求帮忙!
(以下内容仅供参考)
2乘SDS-PAGE上样缓冲液(20ml体系)
1.0mol/L Tris-HCL (pH 6.8) 2ml
1.0mol/L DTT 4ml
SDS 0.8g
溴芬蓝 0.04g
甘油 4ml
dd水 定容至20ml
4℃冰箱保存,可以不分装,我们实验室一般用三个月以上
先配1.0mol/L的DTT,双蒸无菌水溶解4℃冰箱保存,配上样缓冲液的时候加入就可以了,都混匀保存也没问题的
sds电泳上样缓冲液如何配置
50×TAE Buffer 配制方法:
1。称量氨基丁三醇 242g,Na2EDTA.2H2O 37.2g 于1L烧杯中;
2。向烧杯中加入约600ml去离子水,充分搅拌均匀;
3。加入57.1ml的冰乙酸,充分溶解;
4。用NaOH调pH至8.3,加去离子水定容至1L后,室温保存。
使用时稀释50倍 即1×TAE Buffer
10×TBE Buffer配制方法:
1。称量氨基丁三醇 108g,Na2EDTA.2H2O 7.44g,硼酸55g 于1L烧杯中;
2。加入约700ml去离子水,搅拌均匀;
3。用NaOH调pH至8.3,加去离子水定容至1L后,室温保存。
使用时稀释10倍 即1×TBE Buffer
我做的是明胶酶谱实验,开始用以前师姐剩下的还原型上样缓冲液(成分不详)上样组织蛋白酶,电泳后洗脱掉SDS,置入反应液中,酶可以在相应位置降解明胶,这次换了新的上样缓冲液,就是含巯基乙醇的,可是电泳后酶却不能降解明胶了,不知道这个巯基乙醇打开蛋白质的结构后,对酶的活性有没有不可逆的影响,如果有的话,是不是要换一种上样缓冲液了?谢谢
凝胶电泳是为了分离不同物理性质(如大小、形状、等电点等)的分子。加入缓冲溶液是为了调节合适的离子浓度和PH值,保持分离物质分子构象不变。缓冲液在电泳过程中的一个作用是维持合适的pH。电泳时正极与负极都会发生电解反应,正极发生的是氧化反应(4OH--4e->2H2O+O2),负极发生的是还原反应(4H++4e->2H2),长时间的电泳将使正极变酸,负极变碱。一个好的缓冲系统应有较强的缓冲能力,是溶液两极的pH保持基本不变。

电泳缓冲液的另一个作用是使溶液具有一定的导电性,以利于DNA分子的迁移,例如,一般电泳缓冲液中应含有0.01-0.04mol/L的Na+离子,Na+离子的浓度太低时电泳速度变慢;太高时就会造成过大的电流使胶发热甚至熔化。

电泳缓冲液还有一个组分是EDTA,加入浓度为1-2mmol/L,目的是螯合Mg2+ 等离子,防止电泳时激活 DNA酶,此外还可防止Mg2+离子与核酸生成沉淀。
同仁好,我想请教一下大家,6Xloddingbuffer1%琼脂糖凝胶电泳TBE缓冲液,5ul
DNA样品和1ul上样缓冲液怎么就是跑不出主带啊?都是弥散带,给点建议我哪里有问题啊?

提了蛋白,加上样缓冲液煮过,但发现还是有很多胶状的沉淀,比较黏稠,堵枪头。于是自作主张又超声了一次,结果跑了一次,内参都没有。煮过之后的蛋白不能超声么?