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2021-07-16
在我们做生物医学实验或者某些物理化学实验时，为了更好地观察到实验效果，通常会选用合理的染色剂，在选择适当的染色剂后，我们就能够很好地观察到预期的实验现象或结果。染色剂依据来源可分为天然染色剂和人工合成染色剂，各种不同的实验选择不同的染色剂，同一种染色剂也可以用不同的... 查看更多
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2018-08-06
在比较蛋白质组学中关于待测蛋白的数量、蛋白点的准确定量及其与质谱技术的兼容性研究过程中，双相凝胶电泳的染色是至关重要的一步。本章描述了多种与质谱技术兼容的用于凝胶染色的染料：考马斯亮蓝、硝酸银、Sypro Ruby、Deep Purple。本实验来源「植物蛋白质组学实验指南」〔法〕H.蒂勒门特、M.齐维、C.达默韦尔、V.米琴主编。 查看更多
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2018-12-26
快速分析过去已确定的相互作用l 利用BIAcore通过表面胞质基因共振光谱学分析相互作用的蛋白质RAMc通过伯氨基与CM-5传感芯片表面的结合1．将CM-5传感芯片模块嵌入BIAcore仪器。2．全部采用过滤并除气的HEPES缓冲盐溶液。3．将分别含有NHS、EDC、乙醇胺和RAM Fc以及20 mmol/L HCl 查看更多
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2018-12-26
Koshland Lab,Carnegie Institute http://www.ciwemb.edu/labs/koshland/Protocols/MICROTUBULE/mmb.html Determine the OD600 and correlate the cell density from the 查看更多
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2018-08-07
钙调素（CaM) 是普遍分布的蛋白质，参与钙介入的信号转导。当 Ca2+ 流入时，CaM 获得强亲和力，结合各种带有一个或多个CaM 识别序列的胞内蛋白，启动或终止 Ca2+ 调控的信号串联。本实验来源「现代蛋白质工程实验指南」〔德〕K.M.阿恩特、K.M.米勒编著。 查看更多
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2021-07-23
Solution PreparationLysis buffer:0.15 M NaCl, 5 mM EDTA, pH 8.0, 1% Triton X100, 10 mM Tris-Cl, pH 7.4. Just before use, add 5 mM DTT, 0.1 mM PMSF inisopropanol, 5 mM ε-aminocaproic acid.2X Sample buffer:130 mM Tris-Cl, pH8.0, 20% (v/v) glycerol, 4.6% (w/ 查看更多
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2018-12-26
原代培养细胞，关键是消化，我一般酶液是新配的，要足量啊（又一次还剩三排的时候，一同学把酶液碰到水浴锅，害的我借得酶液，耽误了时间，而且组间数据紊乱，最后浪费细胞和染料，大家要注意保护好酶液啊），这样每次心理都有底，而且放入水浴37度30min，甚至扔到培养箱（不建议采用）升温。 查看更多
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2021-09-20
L-乳酸脱氢酶测定实验的相关实验步骤、实验技巧、实验protocol、实验经验及常见问题。<link rel="stylesheet" type="text/css" href="/ueditor/themes/ifra... 查看更多
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2018-12-26
Two Hand Technique Download Video(2.2 MB, 240 x180 pixels, Web quality) Download Video(1.8 MB, 312 x232 pixels, CD quality) Download Video(1.7 MB, 240 x180 pi 查看更多
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2021-08-12
免疫荧光技术又称荧光抗体技术，是标记免疫技术中发展最早的一种免疫荧光技术。它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。 查看更多
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2018-08-06
三酰甘油脂肪酶，三酰甘油酰基水解酶。 查看更多
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2018-08-06
进行蛋白质定位的免疫组织化学技术。来源：《精编分子生物学实验指南》第五版 查看更多
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【求助】共聚焦荧光染料选择问题_问答详情_荧光染料_染色剂_...123
shachajiang2021-07-21
一种染料的激发发射波长是488/560nm，显红色，其在细胞内分布未知，一种是核染料DAPI，这两种是确定会存在的荧光物质，而现在想选择一种能染出细胞轮廓（细胞膜或细胞骨架）的荧光染料，不知可选择哪些荧光染料染的效果比较好。FITC-鬼笔环肽不知是否可以，因为FITC的激发发射波长是495/520nm，想知道选择FITC-鬼笔环肽的话，在做共聚焦时会不会跟488/560nm的染料有干扰？因为好像使用的是同一个激发器。
常用荧光染料的激发和发射波长 123
梓惭炒322021-08-08
激发波段在488的荧光染料有哪些
碘化丙啶(propiolium iodide,PI)能嵌入DNA双螺旋中,可使荧光强度增加约20倍,以488nm波长激发,DNA/PI复合物最大的发射波长约为615nm.
1.小鼠Lewis肺癌细胞DNA含量测定方法
(1).从C57BL/6小鼠上切除肿块,在培养皿内用PBS冲洗.
(2).去除结缔组织及脂肪,剪碎肿块.
(3).小碎片移入1.20×38mm注射针,加压使其通过,于4℃条件下重悬细胞于HBSS中.
(4).将200～300μL细胞悬液(5×105细胞/mL)中加入3mL PI(50μg/mL),染色3LL细胞,于4℃存放20～30分钟.
(5).测定580～750nm之间的发射荧光,以去除末结合PI产生的激发光与发射光谱线之间的重叠部分.
碘化丙啶(propiolium iodide,PI)能嵌入DNA双螺旋中,可使荧光强度增加约20倍,以488nm波长激发,DNA/PI复合物最大的发射波长约为615nm.
1.小鼠Lewis肺癌细胞DNA含量测定方法
(1).从C57BL/6小鼠上切除肿块,在培养皿内用PBS冲洗.
(2).去除结缔组织及脂肪,剪碎肿块.
(3).小碎片移入1.20×38mm注射针,加压使其通过,于4℃条件下重悬细胞于HBSS中.
(4).将200～300μL细胞悬液(5×105细胞/mL)中加入3mL PI(50μg/mL),染色3LL细胞,于4℃存放20～30分钟.
(5).测定580～750nm之间的发射荧光,以去除末结合PI产生的激发光与发射光谱线之间的重叠部分.
荧光颜料的成分结构及分类贤集网123
砾子24532021-08-02
荧光染料是一些具有特殊结构的化合物，其结构特征主要有以下三点:
(1)、分子内含有发射荧光的基团，如羰基、氮氮双键、碳氮双键等。
(2)、分子内含有助色基团。助色基团使光谱红移并增大荧光效率，如伯胺基、仲胺基、羟基、醚键、酰胺基等。
(3)、分子内含有刚性平面结构的共轭π键。分子内共轭体系愈大平面性愈强其荧光强度愈高。一些能提高共轭度的因素能提高荧光效率，并使荧光波长向长波方向移动。 就是荧光染料的附着物，主要作用有帮助荧光染料展色、提高荧光染料与下游树酯的相溶性、保护荧光染料的性能。通常载体树脂是强极性树脂，分子中含有胺基、羟基、醚键、酰胺基等强极性基团，一方面有助色作用，增大荧光效率;另一方面与荧光染料有很好的相溶性，有助于染料的均匀分散。
荧光颜料常用的载体树脂有胺基树脂、苯代三聚氰胺一甲醛树脂、聚丙烯酸酯树脂、聚酰胺树酯、聚酯树脂、聚氨酯树脂等。 （1）、热塑性荧光颜料：线型
（2）、热固性荧光颜料： 体型
（3）、可溶解色精荧光颜料
（4）、水乳型荧光颜料 （1）、胺基树酯
（2）、聚酰胺树酯
（3）、聚酯树酯
（4）、丙烯酸乳液 （1）、塑胶类
低温型
中温型
高温型
（2）、涂料类
水性涂料
油性涂料
粉末涂料 （1）、含甲醛
（2）、不含甲醛
(1)、分子内含有发射荧光的基团，如羰基、氮氮双键、碳氮双键等。
(2)、分子内含有助色基团。助色基团使光谱红移并增大荧光效率，如伯胺基、仲胺基、羟基、醚键、酰胺基等。
(3)、分子内含有刚性平面结构的共轭π键。分子内共轭体系愈大平面性愈强其荧光强度愈高。一些能提高共轭度的因素能提高荧光效率，并使荧光波长向长波方向移动。 就是荧光染料的附着物，主要作用有帮助荧光染料展色、提高荧光染料与下游树酯的相溶性、保护荧光染料的性能。通常载体树脂是强极性树脂，分子中含有胺基、羟基、醚键、酰胺基等强极性基团，一方面有助色作用，增大荧光效率;另一方面与荧光染料有很好的相溶性，有助于染料的均匀分散。
荧光颜料常用的载体树脂有胺基树脂、苯代三聚氰胺一甲醛树脂、聚丙烯酸酯树脂、聚酰胺树酯、聚酯树脂、聚氨酯树脂等。 （1）、热塑性荧光颜料：线型
（2）、热固性荧光颜料： 体型
（3）、可溶解色精荧光颜料
（4）、水乳型荧光颜料 （1）、胺基树酯
（2）、聚酰胺树酯
（3）、聚酯树酯
（4）、丙烯酸乳液 （1）、塑胶类
低温型
中温型
高温型
（2）、涂料类
水性涂料
油性涂料
粉末涂料 （1）、含甲醛
（2）、不含甲醛
流式荧光染料搭配六点技巧 (...123
七情GAKK2017-10-02
示踪染料有很多种，跟据你的目的和实验方法来选取，比如calcein，dri，cfda，还有bcef等。这些染料都非常成熟，光毒和淬灭都很低，当然要考虑到你采集图像时的显微镜参数。比如calcein，常用的示踪，绿光（虽然这些颜色只是根据光谱加上去的伪彩），但要考虑你的实验过程中结合细胞结构，是否会伴随calcein的泄漏，就是荧光降低。dri，还可以看膜啊cfda也不错bcef虽是ph指示，但你试验时不仅可观察细胞，还可看细胞ph变化，也行。当然你或许还要结合其他方法，如细胞免疫化学等手段去双染或多染，都需要综合考虑染料之间特性。单独染一个染料，有点浪费，不如多染，数据和图像也好看些。现在流行细胞成像。
荧光显微镜用什么染料较好_这样 123
晓星后勤部cmCL2021-07-23
荧光显微镜是最经典的灵敏的荧光染料，它可对细胞中的DNA和RNA同时染色而显示不同颜色的荧光，DNA呈绿色荧光，RNA呈橙红色荧光。EB:染色DNA和RNA荧光素双醋酸酯(FDA)：FAD 本身无荧光,无极性,可透过完整的原生质膜。 一旦进入原生质体后,由于受到酯酶分解而产生 具有荧光的极性物质荧光素。它不能自由出入原 生质膜,因此有活力的细胞能产生荧光,无活力 的原生质体不能分解FAD无荧光产生。5mgFDA溶于1ml丙酮中,避光4℃下贮存,使用 时取0.22mlFDA贮存液加入5ml0.65mol/L甘露醇中.使用时,使最终浓度为0.01%。荧光染料Ho33342和若丹明123: 活细胞双荧光染色观察细胞核和线粒体。一般的生物染料不能穿透细胞膜，只有当细胞被固定后改变了细胞膜的通透性，染料才能进入细胞内。但有些活体染料能进入活细胞，并对细胞不产生毒性作用。荧光染料Ho33342和若丹明123都是活体染料。Ho33342能与细胞中DNA进行特异的结合，若丹明123能与线粒体进行特异的结合。采用两种荧光染料的混合染液可对一个活细胞的核和线粒体同时染色。
【求助】急问:只有SYBR GREEN I荧光染料可以作相对定量PCR吗?...123
guoziyang19822021-08-12
【求助】脂质体包裹荧光染料问题 制剂技术讨论版123
verafangfeng2008-04-07
日常生活用品基本都含有荧光剂_有哪些洗发水,沐浴露,洗衣液和_...123
2021-07-25
荧光剂日常用品有哪些
【求助】荧光素FAM 和FITC分别是什么? 生物材料 学术...123
yumingxi2021-08-04
我现在正在做细胞吞噬铁的实验,想在共聚焦下观察细胞吞噬的实验,想找一个荧光染料可以染到细胞膜的?新手上路,还望各路高手多多指点啊!
希望同路人多多交流啊!
希望同路人多多交流啊!
【求助】做细胞免疫荧光实验,请问波长为633nm的选用那种荧光染料...123
chenying8129242021-08-01
做细胞免疫荧光实验，请问波长为633nm的选用那种荧光染料，从没接触到这样的实验，一切都要从头开始做，好晕呢．作实验真的郁闷．
目前荧光免疫产品中多数用的是荧光素还是荧光微球还是荧光染料 ...123
灼眼丶夏娜亍2021-07-30
目前荧光免疫产品中多数用的是荧光素还是荧光微球还是荧光染料
抗原抗体反应后，利用特殊仪器测定荧光强度而推算被测物浓度的检测方法
⑴荧光物质
1）荧光色素
许多物质都可产生荧光现象，但并非都可用作荧光色素。只有那些能产生明显的荧光并能作为染料使用的有机化合物才能称为免疫荧光色素或荧光染料。常用的荧光色素有：
⑴异硫氰酸荧光素（fluoresceinisothiocyanate，FITC）为黄色或橙黄色结晶粉末，易溶于水或酒精等溶剂。分子量为389.4，最大吸收光波长为490--495nm，最大发射光波长520--530nm，呈现明亮的黄绿色荧光，结构式如下：
有两种同分异结构，其中异构体Ⅰ型在效率、稳定性、与蛋白质结合能力等方面都更好，在冷暗干燥处可保存多年，是应用最广泛的荧光素。其主要优点是：①人眼对黄绿色较为敏感，②通常切片标本中的绿色荧光少于红色。
⑵四乙基罗丹明（rhodamine，RIB200）为橘红色粉末，不溶于水，易溶于酒精和丙酮。性质稳定，可长期保存。结构式如下：
最大吸收光波长为570nm，最大发射光波长为595～600nm，呈橘红色荧光。
⑶四甲基异硫氰酸罗丹明（tetramethylrhodamineisothiocyanate，TRITC）结构式如下：
最大吸引光波长为550nm，最大发射光波长为620nm，呈橙红色荧光。与FITC的翠绿色荧光对比鲜明，可配合用于双重标记或对比染色。其异硫氰基可与蛋白质结合，但荧光效率较低。
⑵其他荧光物质
1）酶作用后产生荧光的物质某些化合物本身无荧光效应，一旦经酶作用便形成具有强荧光的物质。例如4-甲基伞酮-β-D半乳糖苷受β-半乳糖苷酶的作用分解成4-甲基伞酮，后者可发出荧光，激发光波长为360nm，发射光波长为450nm。其他如碱性酸酶的底物4-甲基伞酮磷酸盐和辣根过氧化物酶的底物对羟基苯乙酸等。
2）镧系螯合物某些3价稀土镧系元素如铕（Eu3 ）、铽（Tb3 ）、铈（Ce3 ）等的螯合物经激发后也可发射特征性的荧光，其中以Eu3 应用最广。Eu3
螯合物的激发光波长范围宽，发射光波长范围窄，荧光衰变时间长，最适合用于分辨荧光免疫测定。展开
抗原抗体反应后，利用特殊仪器测定荧光强度而推算被测物浓度的检测方法
⑴荧光物质
1）荧光色素
许多物质都可产生荧光现象，但并非都可用作荧光色素。只有那些能产生明显的荧光并能作为染料使用的有机化合物才能称为免疫荧光色素或荧光染料。常用的荧光色素有：
⑴异硫氰酸荧光素（fluoresceinisothiocyanate，FITC）为黄色或橙黄色结晶粉末，易溶于水或酒精等溶剂。分子量为389.4，最大吸收光波长为490--495nm，最大发射光波长520--530nm，呈现明亮的黄绿色荧光，结构式如下：
有两种同分异结构，其中异构体Ⅰ型在效率、稳定性、与蛋白质结合能力等方面都更好，在冷暗干燥处可保存多年，是应用最广泛的荧光素。其主要优点是：①人眼对黄绿色较为敏感，②通常切片标本中的绿色荧光少于红色。
⑵四乙基罗丹明（rhodamine，RIB200）为橘红色粉末，不溶于水，易溶于酒精和丙酮。性质稳定，可长期保存。结构式如下：
最大吸收光波长为570nm，最大发射光波长为595～600nm，呈橘红色荧光。
⑶四甲基异硫氰酸罗丹明（tetramethylrhodamineisothiocyanate，TRITC）结构式如下：
最大吸引光波长为550nm，最大发射光波长为620nm，呈橙红色荧光。与FITC的翠绿色荧光对比鲜明，可配合用于双重标记或对比染色。其异硫氰基可与蛋白质结合，但荧光效率较低。
⑵其他荧光物质
1）酶作用后产生荧光的物质某些化合物本身无荧光效应，一旦经酶作用便形成具有强荧光的物质。例如4-甲基伞酮-β-D半乳糖苷受β-半乳糖苷酶的作用分解成4-甲基伞酮，后者可发出荧光，激发光波长为360nm，发射光波长为450nm。其他如碱性酸酶的底物4-甲基伞酮磷酸盐和辣根过氧化物酶的底物对羟基苯乙酸等。
2）镧系螯合物某些3价稀土镧系元素如铕（Eu3 ）、铽（Tb3 ）、铈（Ce3 ）等的螯合物经激发后也可发射特征性的荧光，其中以Eu3 应用最广。Eu3
螯合物的激发光波长范围宽，发射光波长范围窄，荧光衰变时间长，最适合用于分辨荧光免疫测定。展开
纺织科学技术:染整技术试题及答案(每日一练) 考试题库 91考试网123
maxlove20002017-10-02
听说活性荧光染料只有红黄，并且价格很高
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