实验六 细菌的荚膜染色法
实验六
细菌的荚膜染色
1
实验目的
•
掌握细菌的荚膜染色法
•
熟炼显微镜使用
2
实验原理
•
由于荚膜与染料间的亲和力弱，不易着色，通常采用负染色法染荚膜，即设法使菌体和背景着色而荚
膜不着色，从而使荚膜在菌体周围呈一透明圈。由于荚膜的含水量在
90%
以上，故染色时一般不加热
固定，以免荚膜皱缩变形。
3
实验器材
•
涂片染色用的细菌培养物
–
荚膜染色（钾细菌）
24h
的斜面培养物。
•
用滤纸过滤后的墨汁、复红染色液。
•
显微镜、松柏油、擦镜纸、吸水纸等。
4
实验步骤
•
（
1
）制片：取洁净的载玻片一块，加蒸馏水一滴，取少量菌体放入水滴中混匀并涂布。
•
（
2
）干燥：将涂片放在空气中晾干或用电吹风冷风吹干。
•
（
3
）染色：在涂面上加复红染色液染色
3
—
5min
。
•
（
4
）水洗：用水洗去复红染液。
•
（
5
）干燥：将染色片放空气中晾干。
•
（
6
）涂黑素：在染色涂面左边加一小滴墨汁，用一边缘光滑的载玻片轻轻接触墨汁，使墨汁沿玻片后
缘散开（夹角
30
度）
，然后推向另一侧，使黑素在染色涂面上成为一薄层，并迅速风干。
•
（
7
）镜检：先低倍镜，再高倍镜油镜观察。
•
观察：背景、菌体、荚膜、细菌形态等，并绘图。
5
实验记录（绘图）
6
思考题
•
荚膜负染法为什么不用热固定？
•
为什么包在荚膜内的菌体着色，而荚膜不着色？
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发布于 ： 2018-08-06
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