| Overview |  PrinterFriendlyVersion |
| Ex/Em(nm) | 501/520 |
| MW | 661.17 |
| CAS# | N/A |
| Solvent | N/A |
| Storage | F/D/L |
| Category | NucleicAcidDetection DNADetection |
| Related | LabelingCells FluorescenceImaging BiochemicalAssays |
1.PreparingtheHelixyteGreen™workingsolution:
1.1 PrepareanaqueousworkingsolutionoftheHelixyteGreen™bymakinga200-folddilutionoftheconcentratedDMSOsolutioninTE(10mMTris-HCl,1mMEDTA,pH7.5–8.0).Forexample,add50μLHelixyteGreen™to10mLTEtoprepareenoughworkingsolutiontoassay100samplesina200µLfinalvolume.Protecttheworkingsolutionfromlightbycoveringitwithfoilorplacingitinthedark.
Note1:Werecommendpreparingthissolutioninaplasticcontainerratherthanglass,asthedyemayadsorbtoglasssurfaces.
Note2:Forbestresults,thissolutionshouldbeusedwithinafewhoursofitspreparation.
2.PrepareserialdilutionsofdsDNAstandard(0to3ng/mL):
2.1 Preparea1mg/mLstocksolutionofdsDNA(suchascalfthymusDNAfromSigma)inddH2O.
2.2 Add10μLof1mg/mLdsDNAstocksolution(fromStep2.1)to998µLTEbuffertohave10μg/mLdsDNAsolution,andthenperform1:10and1:2serialdilutionstoget1000,100,50,25,12.5,6.25,3.125,and0ng/mL.
2.3 AdddsDNAstandardsandDNAcontainingtestsamplesintoa96-wellsolidblackmicroplateasdescribedinTables1and2.
Table1.LayoutofdsDNAstandardsandtestsamplesinasolidblack96-wellmicroplate*
BL | BL | TS | TS | …. | …. |
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DS1 | DS1 | …. | …. | …. | …. |
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DS2 | DS2 |
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DS3 | DS3 |
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DS4 | DS4 |
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DS5 | DS5 |
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DS6 | DS6 |
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DS7 | DS7 |
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*Note:DS=dsDNAStandards;BL=BlankControl;TS=TestSamples
Table2.Reagentcompositionforeachwell*
dsDNAStandard | BlankControl | TestSample |
Serialdilutions*(100μL) | TE:100μL | 100μL |
*Note:AddtheseriallydilutionsofdsDNAstandardsfrom0.1to1000ng/mLintowellsfromDS1toDS7induplicate.
3.RundsDNAassay:
3.1 Add100μLofdsDNAassaymixture(fromStep1.1)toeachwellofthedsDNAstandard,blankcontrol,andtestsamples(seeStep2.3)tomakethetotaldsDNAassayvolumeof200µL/well.
Note1:Fora384-wellplate,add25μLsampleand25μLofdsDNAassaymixtureperwell.
Note2:Forcurvetbasedassays,add1mLsampleand1mLofdsDNAassaymixturepercurvet.
3.2 Incubatethereactionatroomtemperaturefor5to10minutes,protectedfromlight.
3.3 MonitorthefluorescenceincreasewithafluorescencemicroplatereaderatEx/Em=490/525nm(cutoffat515nm).
3.4 Thefluorescenceinblankwells(withtheTEbufferonly)isusedasacontrol,andissubtractedfromthevaluesforthosewellswiththedsDNAreactions.TheDNAconcentrationsofthesamplesaredeterminedfromthestandardcurvegeneratedinDNAStandardCurve.
| References&Citations |  PrinterFriendlyVersion |
1. PetersonEJ,KireevD,MoonAF,MidonM,JanzenWP,PingoudA,PedersenLC,SingletonSF.(2013)InhibitorsofStreptococcuspneumoniaesurfaceendonucleaseEndAdiscoveredbyhigh-throughputscreeningusingaPicoGreenfluorescenceassay.JBiomolScreen,18,247.
2. ChenY,SonnaertM,RobertsSJ,LuytenFP,SchrootenJ.(2012)ValidationofaPicoGreen-basedDNAquantificationintegratedinanRNAextractionmethodfortwo-dimensionalandthree-dimensionalcellcultures.TissueEngPartCMethods,18,444.
3. MorenoLA,CoxKL.(2010)QuantificationofdsDNAusingtheHitachiF-7000FluorescenceSpectrophotometerandPicoGreendye.JVisExp.
4. DraganAI,Casas-FinetJR,BishopES,StrouseRJ,SchenermanMA,GeddesCD.(2010)CharacterizationofPicoGreeninteractionwithdsDNAandtheoriginofitsfluorescenceenhancementuponbinding.BiophysJ,99,3010.
5. DraganAI,BishopES,Casas-FinetJR,StrouseRJ,SchenermanMA,GeddesCD.(2010)Metal-enhancedPicoGreenfluorescence:applicationtofastandultra-sensitivepg/mlDNAquantitation.JImmunolMethods,362,95.
6. ABIodunOO,GbotoshoGO,AjaiyeobaEO,HappiCT,HoferS,WittlinS,SowunmiA,BrunR,OduolaAM.(2010)ComparisonofSYBRGreenI-,PicoGreen-,and[3H]-hypoxanthine-basedassaysforinvitroantimalarialscreeningofplantsfromNigerianethnomedicine.ParasitolRes,106,933.
7. DraganAI,BishopES,Casas-FinetJR,StrouseRJ,SchenermanMA,GeddesCD.(2010)Metal-enhancedPicoGreenfluorescence:applicationfordouble-strandedDNAquantification.AnalBiochem,396,8.
8. HoldenMJ,HaynesRJ,RabbSA,SatijaN,YangK,BlasicJR,Jr.(2009)FactorsaffectingquantificationoftotalDNAbyUVspectroscopyandPicoGreenfluorescence.JAgricFoodChem,57,7221.
9. IkedaY,IwakiriS,YoshimoriT.(2009)DevelopmentandcharacterizationofanovelhostcellDNAassayusingultra-sensitivefluorescentnucleicacidstain"PicoGreen".JPharmBiomedAnal,49,997.
10. RenX,XuQH.(2009)Label-freeDNAsequencedetectionwithenhancedsensitivityandselectivityusingcationicconjugatedpolymersandPicoGreen.Langmuir,25,43.
AAT Bioquest AAT Bioquest是一家位于美国的生物公司，前身为ABD Bioquest，总部位于加利福尼亚州。专门从事光学检测技术十多年，一直致力于光谱学检测领域技术的创新和突破。其独特的光学检测技术，综合了化学、生物学和信息学等各个领域的研究，引领了比色、荧光和发光技术新一代光学探针的浪潮。AAT Bioquest在全球拥有强大的经验丰富的专业分销商网络，为从小型研究机构到《财富》500强企业的各类客户提供卓越的产品和定制服务。
美国AATBioquestInc.(前身是ABDBioquest，Inc.)是一家为从事生命科学研究、诊断研发及药物开发的科学家研发、生产和销售生物分析研究试剂和试剂盒的公司。公司致力于光谱学检测领域，包括吸收（颜色），荧光和发光技术。AATBioquest的产品帮助全世界的科学家和生物医药研究者更好的了解生物化学，免疫学，细胞生物学和分子生物学等领域。AATBioquest会不断介绍新产品，快速的丰富各个领域的产品。
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作为AATBioquestInc.的中国区域代理，艾美捷科技为中国客户提供光谱学检测领域，包括吸收（颜色），荧光和发光技术等全系列解决方案。我们也将一如既往更加努力为国内用户提供快捷、方便的高质量产品，同时更为您售前售后全面技术支持。
AATBioquest,Inc.(formerlyABDBioquest,Inc.)develops,manufacturesandmarketsbioanalyticalresearchreagentsandkitstoscientistsengagedinlifesciencesresearch,diagnosticR&Danddrugdiscovery.Wespecializeintheareaofphotometricdetectionsincludingabsorption(color),fluorescenceandluminescencetechnologies.TheCompany"sproductsenablescientistsandbiomedicalresearcherstobetterunderstandbiochemistry,immunology,cellBIOLOGyandmolecularbiology.AATBioquestconstantlyintroducesnewproducts,andoffersarapidlyexpandinglistofproductsthataregroupedintoseveralproductlines.
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Besidesthestandardcatalogproductswealsooffercustomservicetomeetyourspecialresearchneeds.Ourcurrentservicesincludecustomsynthesisofcolorimetric,fluorescentandluminescentprobes,customdevelopmentofbiochemical,cell-basedanddiagnosticassaysandcustomscreeningofyourcompoundlibrariesagainstyourdefinedtargetsusingourvalidatedHTSassays.
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请各位大侠给予帮助！！
谢谢！！
产品主要应用：点击化学(Clickchemistry)、蛋白质组学研究中的双向荧光差异凝胶电泳(2DDIGE)和实时荧光定量PCR(RealtimePCR)。
氨基类染料是包含自由氨基的活性染料，染料可与活化羧酸衍生物和其他亲电子的试剂结合。比如：氨基与EDC-活化的羧基结合。
相关产品如下：
中文名英文名产品编号分子结构Cy7.5胺Cy7.5amineAGF1350A[img]/KindEditor_4.0.1/attached/image/20130704/20130704110804_5250.jpg[/img]Cy5胺Cy5amineAGF1332A[img]/KindEditor_4.0.1/attached/image/20130704/20130704110715_7750.jpg[/img]相似系列产品：
抗体、核酸、蛋白质等生物分子标记染料
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健那绿染液是一种活体染液，实验对象必须是活细胞，健那绿可以使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色，而细胞质接近无色。
分子生物学实验的染料主要涉及到核酸染料和蛋白质染料.核酸染料主要有EB（溴化乙锭,高致癌性）,goldview,sybr green（实时定量PCR时常用染料）.这些染料可以和核酸双链分子特异性结合发出强荧光而被检测到.蛋白质染料最常用的是考马斯亮蓝 R-250,硝酸银.其中硝酸银有时也用于核酸染色.
染料分为天然染料和人工染料两种。天然染料有胭脂虫红、地衣素、石蕊和苏木素等，它们多从植物体中提取得到，其成分复杂，有些至今还未搞清楚。目前主要采用人工染料，也称煤焦油染料，多从煤焦油中提取获得，是苯的衍生物。多数染料为带色的有机酸或碱类，难溶于水，而易溶于有机溶剂中。为使它们易溶于水，通常制成盐类。
染料可按其电离后染料离子所带电荷的性质，分为酸性染料、碱性染料、中性（复合）染料和单纯染料四大类。 标本干燥后即进行固定，固定的目的有三个：
1）杀死微生物，固定细胞结构。
2）保证菌体能更牢的粘附在载玻片上，防止标本被水冲洗掉。
3）改变染料对细胞的通透性，因为死的原生质比活的原生质易于染色。
而且样品中的无水硫酸钠未变色,而做标准曲线的五个和空白对照的变为蓝色了,请高手指教,多谢!
还有,是否变蓝对测定结果有影响吗?
谢了哈
欢迎你！请下次规范发贴:)
产品主要应用：点击化学(Clickchemistry)、蛋白质组学研究中的双向荧光差异凝胶电泳(2DDIGE)和实时荧光定量PCR(RealtimePCR)。
菁染料是性能优良的荧光标记染料，摩尔吸光系数在荧光染料中是最高的。N-羟基琥珀酰亚胺酯是最常用的脂肪氨基标记试剂，广泛用于蛋白质、氨基酸多肽、抗体、核酸及其他生物分子的标记和检测。通过改变次甲基链的长度,可改变其荧光发射波长，每增加一个双键，按照Huoffman规则正好红移约100nm。
菁染料Cy3和Cy5已成为基因芯片的首选荧光标记物；另外,Cy5,Cy5.5和Cy7，Cy7.5的吸收在近红外区背景非常低，是荧光强度最高、最稳定的长波长染料，特别适合于活体小动物体内成像。但由于菁染料,尤其是不对称菁染料的合成副反应多,副产物极性相近,产物的分离提纯相当困难。菁染料特别是水溶性菁染料分子极性大,分离提纯越加困难。Lumiprobe供应脂溶性和水溶性菁染料。
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2、苏丹三 脂肪 橙红
3、苏丹四 脂肪 红
4、双缩脲 蛋白质 紫
5、龙胆紫 染色质 紫
6、碘 淀粉 蓝
7、健那绿 线粒体 绿
8、甲基绿 DNA 绿
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10、溴麝香草酚蓝 CO2 由蓝变绿再变黄
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