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AAT Bioquest/ApoBrite™ U470 caspase 3/7 substrate *Cell-Permeable*/20200/100 Tests
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AAT Bioquest/ApoBrite™ U470 caspase 3/7 substrate *Cell-Permeable*/20200/100 Tests
品牌 / 
AAT Bioquest
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20200
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Ex/Em(nm)350/470
MWN/A
CAS#N/A
SolventDMSO
StorageF/D/L
CategoryCellAnalysis
CellApoptosis
RelatedApoptosisandCytotoxicity
BiochemicalAssays
ApoBrite™U470isourrecentlydevelopedcell-permeablefluorogeniccaspasesubstrate,thefirstfluorogenicprobeforthedirectdetectionofcaspaseactivitiesinlivecells.ApoBriteU470consistsofthreemoietiesincludinga).maskedfluorophore,b).caspase-selectivepeptidefragment(DEVD),andc).cell-penetratingmoiety.Thecell-penetratingmoietycarriestheprobeintolivecells.Uponenteringlivecellsthecaspase-selectivepeptidefragmentiscleavedbyacaspasetoreleasethemaskedfluorophore.Theintensityofrecoveredfluorescenceisdirectlyrelatedtotheactivityofcaspasetobemeasured.Comparedtotheexistingcaspaseassaysinlivecells,ApoBrite™U470ismuchmorerobust,convenientandaccurate.ApoBrite™U470releasesafluorophorethathasEx/Em~350/470.ItdoesnotneedaDNAinteractiontobefluorescentasreportedforNucViewreagents.ItdoesnotinhibitcaspaseactivityasreportedfortheFMKpeptideprobes.AlthoughfluorescentFMKpeptideinhibitorsofcaspasesarewidelyusedfordetectingcaspaseactivitiesinlivecells,thistechnologyhasafewseverelimitations:a).FMKcaspaseinhibitorshavehighcytotoxicitysinceFMKpeptidesbindcovalentlytoactivecaspases;b).TheirreversIBLycovalentbindingofFMKpeptidestocaspasesinhibitscaspaseactivities,causingfalsepositiveapoptosis;c).FMKassayshaveextremelyhighbackground,andrequireintensivewashings,resultinginverylowthroughput;d).FMKpeptidesarenotstableinaqueoussolutions,andhavetobeusedimmediately.

Thisprotocolonlyprovidesaguideline,andshouldbemodifiedaccordingtoyourspecificneeds.

TheApoBrite™substratesare500XstocksolutionsinDMSO

 

1)      Platecellsovernightingrowthmedium.

2)      Make1XApoBrite™caspasesubstrateworkingsolutionbyadding2µLof500XApoBrite™caspasesubstratesDMSOstocksolutioninto1mLHHBS.

3)      Removegrowthmedium,andwashoncewithHHBS.

4)      Add100µL/well/96wellplateof1XApoBrite™caspasesubstrateworkingsolution,andincubateat37ºC,5%CO2incubatorfor2hours.

5)      RemoveApoBrite™caspasesubstrateworkingsolutionandwashoncewithHHBS.

6)      AddgrowthmediumbacktotheApoBrite™caspasesubstrateloadedcells,andtreatthecellsasdesired(suchas1µMStaurosporinefor1hour).

7)      Analyzethecellswithaproperfluorescenceinstrument(e.g.,afluorescencemicroscope,orflowcytometer).

References&Citations
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HelicobacterpyloriSecretedProteinHP1286TriggersApoptosisinMacrophagesviaTNF-IndependentandERKMAPK-DependentPathways
Authors:RaquelTavares,SushilKumarPathak
Journal:FrontiersinCellularandInfectionMicroBIOLOGy(2017):58

Deathreceptor3mediatesnecroptoticcelldeath
Authors:SebastianBittner,GertrudKnoll,MartinEhrenschwender
Journal:CellularandMolecularLifeSciences(2016):1--12

HelicobacterpyloriproteinJHP0290exhibitsproliferativeandanti-apoptoticeffectsingastricepithelialcells
Authors:RaquelTavares,SushilKumarPathak
Journal:PloSone(2015):e0124407


AAT Bioquest AAT Bioquest是一家位于美国的生物公司,前身为ABD Bioquest,总部位于加利福尼亚州。专门从事光学检测技术十多年,一直致力于光谱学检测领域技术的创新和突破。其独特的光学检测技术,综合了化学、生物学和信息学等各个领域的研究,引领了比色、荧光和发光技术新一代光学探针的浪潮。AAT Bioquest在全球拥有强大的经验丰富的专业分销商网络,为从小型研究机构到《财富》500强企业的各类客户提供卓越的产品和定制服务。


美国AATBioquestInc.(前身是ABDBioquest,Inc.)是一家为从事生命科学研究、诊断研发及药物开发的科学家研发、生产和销售生物分析研究试剂和试剂盒的公司。公司致力于光谱学检测领域,包括吸收(颜色),荧光和发光技术。AATBioquest的产品帮助全世界的科学家和生物医药研究者更好的了解生物化学,免疫学,细胞生物学和分子生物学等领域。AATBioquest会不断介绍新产品,快速的丰富各个领域的产品。

1)我们提供反应荧光探针和发光探针,生物素和端粒酶能够应用于标记药物小分子和生物聚合物,如蛋白、核酸以及其他碳水化合物;2)我们研究并生产荧光和发光探针用于检测蛋白,核酸和活细胞。3)我们不断的推出新型的荧光和发光探针用于检测多种酶,特别是检测水解酶和氧化还原酶类;4)我们致力于开发用于信号转导研究的试剂;5)我们提供生理和神经探针,特别是钙离子指示剂和膜电位探针。

作为AATBioquestInc.的中国区域代理,艾美捷科技为中国客户提供光谱学检测领域,包括吸收(颜色),荧光和发光技术等全系列解决方案。我们也将一如既往更加努力为国内用户提供快捷、方便的高质量产品,同时更为您售前售后全面技术支持。

AATBioquest,Inc.(formerlyABDBioquest,Inc.)develops,manufacturesandmarketsbioanalyticalresearchreagentsandkitstoscientistsengagedinlifesciencesresearch,diagnosticR&Danddrugdiscovery.Wespecializeintheareaofphotometricdetectionsincludingabsorption(color),fluorescenceandluminescencetechnologies.TheCompany"sproductsenablescientistsandbiomedicalresearcherstobetterunderstandbiochemistry,immunology,cellBIOLOGyandmolecularbiology.AATBioquestconstantlyintroducesnewproducts,andoffersarapidlyexpandinglistofproductsthataregroupedintoseveralproductlines.

1)Ourreactivefluorescentandluminescentprobes,biotinsandtagenzymesareusedforlabelingsmalldrugmoleculesandbiopolymers,e.g,proteins,nucleicacidsandcarbohydrates;2)Wedevelopfluorescentandluminescentprobesfordetectingproteins,nucleicacidsandlivecells;3)Weconstantlyintroducenovelfluorescentandluminescentprobesfordetectingvariousenzymes,inparticular,hydrolyticandredoxenzymes;4)Wefocusondevelopingreagentsforsignaltransductionresearch;and5)Wealsoofferphysiologicalandneurologicalprobes,e.g.,calciumindicatorsandmembranepotentialprobes.

Besidesthestandardcatalogproductswealsooffercustomservicetomeetyourspecialresearchneeds.Ourcurrentservicesincludecustomsynthesisofcolorimetric,fluorescentandluminescentprobes,customdevelopmentofbiochemical,cell-basedanddiagnosticassaysandcustomscreeningofyourcompoundlibrariesagainstyourdefinedtargetsusingourvalidatedHTSassays.

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本实验来源「实用流式细胞术彩色图谱」 王书奎、周振英主编。 查看更多>
染料染色法测定细胞数1)结晶紫检测法1.在96孔细胞培养板各孔中加0.1ml含5×104~10×4 WEHI-164细胞的培养液(含10%小牛血清的RPMI-1640培养液),37℃ 5% CO2的二氧化碳培养箱中培养2~3小时,让细胞帖壁。2.用RPMI-1640培养液10倍递次稀释TNF标准品,根据需要3~5倍递 查看更多>
来源:《神经生物学实用实验技术》 查看更多>
本章介绍了酵母遗传学实验相关技术和方案。 查看更多>
免疫酶染色试验一般都由两部分组成,即一次或数次抗原和抗体的免疫学反应和一次酶促反应。第一步抗原抗体结合中,酶结合物起抗体作用,在第二步加入底物后,酶起到了催化的生物放大作用。该方法具有敏感性高,标本可长期保存,使用一般光学显微镜就能观察等优点,但有时也存在非特异性染色的问题。来源:《病毒学检验》 查看更多>
区分活细胞和死亡细胞的关键在于死亡细胞膜转运功能及膜完整性的丧失。许多阳离子染料,如台盼蓝、碘化丙锭(PI)、溴化乙锭(EB)以及7-氨基放线菌素D(7-ADD)等,常被用于检测细胞的存活率。活细胞由于膜具有完整性而不被着色,死亡细胞(如坏死细胞或晚期凋亡细胞)由于其膜完整性的丧失而被着色。 查看更多>
本节提供了多种对癌症患者的血液标本的细胞进行遗传学分析的实验方法。由于研究方便,白细胞很久以来一直被用来分析染色体重组。观察到标志性重组染色体,如费城染色体(Ph 染色体)有助于诊断和后续治疗。许多肿瘤特异性的标志染色体已经在白血病中被发现,它们的发现对于在早期选择适合的治疗方案非常重要。细胞遗传学分析还用于对骨髓移植后的移植物分型。 查看更多>
流式细胞仪检测细胞凋亡可以:(1)鉴定细胞凋亡形态;(2)可以准确的进行凋亡细胞的计数;(3)可以进行特异的定性分析和定量分析。 查看更多>
肥大细胞来源于未分化的间质细胞,分布于血管周围黏膜下、疏松结缔组织、肿瘤组织及过敏性疾病等组织中,易被异染性染料着色。 查看更多>
在临床细胞遗传学历史上,G 显带作为「金标准」用于检测临床样本的总染色体异常,从简单的数量改变到识别复杂的结构重排。「标记染色体」或「衍生染色体」指的是那些 G 带不能鉴定和识别的异常。这通常是因为重排的复杂性造成缺乏连续的可识别的带型。各种多色荧光原位杂交(FISH) 的染色体涂染技术 [1,2] 的出现能够识别所有的标记染色体,但应用这些技术快速鉴定复杂染色体重排的目标仍然需要精心的设计来达到。 查看更多>
Immunostaining of Cells Adherent to Coverslips1) Immerse 18 mm2 glass coverslips in EtOH. In the tissue culture hood, individually pull out and carefully flame 查看更多>
2018-12-26
相互作用在生理上的证实和探索l 通过免疫共沉淀确定结合蛋白1.用磷酸盐缓冲液洗30块10 cm培养板上的适宜细胞。刮去每块板上的细胞到1 ml冰冷的EBC裂解缓冲液中。2.将每毫升细胞悬液转移到微量离心管中,在微量离心机上4℃以最大速度离心15 min。3.收集上清(约30 ml)并加入30μg的适当抗体,4℃摇动 查看更多>
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运用了哪些说明方法,有什么作用?新兴的生物循环再生技术将染料及其他材料完全去除,无限循环再生。这和在一定条件下从石油中制造出聚醋原料再焚烧相比,能量消耗量及二氧化碳排出量均可削减80%。而回收的服装可以返回工厂,重新再生为长纤维。这种方法为延...
一新药,以麻黄总生物碱作溶出方法学研究如下:
取片剂一片,照溶出度测定法(中国药典2000年版二部附录ⅩC第三法),以水250ml为溶剂,转速为每分钟50转,依法操作,分别经15、30、45、60、75、210分钟取溶液滤过,精密量取续滤液5ml于分液漏斗中,加入pH7.4磷酸盐缓冲液5ml,5ml0.3%溴麝香草酚蓝溶液,用15ml氯仿分两次萃取,合并萃取液,加入0.4g无水硫酸钠,照分光光度法(中国药典2000年版二部附录ⅥA),在410nm波长处测得溶出A值。现15、30、45、60、75、210分钟溶出A值分别为0.0413、0.0544、0.0437、0.0479、0.0394、0.0302。(测定吸收度偏小是否不准,有影响。)

请各位站友指教。
一般分固体成型燃料、气体燃料和液体燃料
PCR生物实验常用的染料有哪些
分子生物学实验的染料主要涉及到核酸染料和蛋白质染料.核酸染料主要有EB(溴化乙锭,高致癌性),goldview,sybr green(实时定量PCR时常用染料).这些染料可以和核酸双链分子特异性结合发出强荧光而被检测到.蛋白质染料最常用的是考马斯亮蓝 R-250,硝酸银.其中硝酸银有时也用于核酸染色.
染料分为天然染料和人工染料两种。天然染料有胭脂虫红、地衣素、石蕊和苏木素等,它们多从植物体中提取得到,其成分复杂,有些至今还未搞清楚。目前主要采用人工染料,也称煤焦油染料,多从煤焦油中提取获得,是苯的衍生物。多数染料为带色的有机酸或碱类,难溶于水,而易溶于有机溶剂中。为使它们易溶于水,通常制成盐类。
染料可按其电离后染料离子所带电荷的性质,分为酸性染料、碱性染料、中性(复合)染料和单纯染料四大类。 标本干燥后即进行固定,固定的目的有三个:
1)杀死微生物,固定细胞结构。
2)保证菌体能更牢的粘附在载玻片上,防止标本被水冲洗掉。
3)改变染料对细胞的通透性,因为死的原生质比活的原生质易于染色。
高中生物,老师貌似说了有三种染料都可以染色dna。而且用处不一样
二苯胺
甲基绿派洛宁
还有一种忘了。
假期没法联系老师呵呵。
这三种的作用都是什么。
1、菲林试剂 还原糖 砖红色沉淀(需水域)
2、苏丹三 脂肪 橙红
3、苏丹四 脂肪 红
4、双缩脲 蛋白质 紫
5、龙胆紫 染色质 紫
6、碘 淀粉 蓝
7、健那绿 线粒体 绿
8、甲基绿 DNA 绿
9、吡罗红 RNA 红
10、溴麝香草酚蓝 CO2 由蓝变绿再变黄
11、重铬酸钾 酒精 酸性条件下由橙色变成灰绿
12、醋酸洋红(龙胆紫、改良苯酚品红) 染色质 红
13、台盼蓝 检验活死细胞 死细胞会被染成蓝色(不常用)
谁知道赛百盛出品的GoldView核酸染料的具体情况

前一阵子实验室开始使用一种新的核酸染料-goldview,取代原先用的溴化乙锭-EB.goldview现在是由赛百盛出售.以下摘自官方网站:

GoldViewTM核酸染料——使用说明
概述
GoldViewTM是一种可代替溴化乙锭(EB)的新型核酸染料,采用琼脂糖电泳检测DNA时,GoldViewTM与核酸结合后能产生很强的荧光信号,其灵敏度与EB相当,使用方法与之完全相同。在紫外透射光下双链DNA呈现绿色荧光,而单链DNA呈红色荧光。GoldView不仅能染DNA,也可用于染RNA。
通过Ames试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、小鼠睾丸精母细胞染色体畸变试验,致突变性结果均为阴性;而溴化乙锭(EB)是一种强致癌剂。因此用GoldviewTM代替EB不失为一种明智的选择。
使用方法
1.将100ml琼脂糖凝胶溶液(浓度一般为0.8%~2%)在微波炉中融化。
2.加入5µlGoldView,轻轻摇匀,避免产生气泡。
3.冷却至不烫手时倒胶,待琼脂糖凝胶完全凝固后上样电泳。
4.电泳完毕在紫外灯下观察。若使用数码相机照像记录,则关闭相机的闪光灯,放在自动档即可;若使用凝胶成像系统照相,通过调节光圈、曝光时间,选择合适的滤光片,可得到成像清晰、背景较低的照片。
注意事项
1.胶厚度不宜超过0.5cm,胶太厚会影响检测的灵敏度。
2.加入GoldView的琼脂糖凝胶反复融化可能会对核酸检测的灵敏度产生一定影响,但不明显。
3.通过凝胶电泳回收DNA片段时,建议使用GoldView染色,在自然光下切割DNA条带,避免紫外线与EB对目的DNA产生的损伤,可明显提高克隆、转化、转录等分子生物学下游操作的效率。
4.虽然未发现GoldView有致癌作用,但对皮肤、眼睛会有一定的刺激,操作时应戴上手套。
电泳结果显示GV灵敏度与EB相当
问题1.Goldview到底是不是丫啶橙?
  2.赛百盛不公布其成分的原因是害怕其为丫啶橙还是出于技术保密?
我在用酸性染料比色法测定生物碱含量时发现加入的无水硫酸钠变为蓝色了,这是为什么啊
而且样品中的无水硫酸钠未变色,而做标准曲线的五个和空白对照的变为蓝色了,请高手指教,多谢!
还有,是否变蓝对测定结果有影响吗?
谢了哈

欢迎你!请下次规范发贴:)
求助各位同僚:
体内诊断用的荧光染料类药物,注册报批该走药品注册流程,还是诊断试剂(医疗器械)流程?
咨询了一些专业人士,有说按照药品的,也有说按照生物制剂的(但本身只属于小分子荧光染料,有点不沾边啊)。查询了国家局的文件,大多都是关于体外诊断试剂的,体内的相当少。
在此请教各位,能否给一些意见。最好能附上国家局相应文件。
感激!
我想测定中药中总生物碱的含量,不知道用酸性染料法该注意哪些事项?
请各位大侠给予帮助!!
谢谢!!
一般的生物材料不能穿透细胞膜,只有当细胞被固定后,细胞膜被破坏,染料才能进入...
健那绿——高中唯一一个活体染色剂。染线粒体的,染成蓝绿色
今天看到一个试剂公司的快讯,想换种毒害小些,灵敏度不错的染料!
1、快讯上是Invotrogen公司的SYRBGOLD,不过500ul/1390元,实在有点贵,为了查用量;
2、结果又查出赛百盛的GoldViewTMDNA染料1ml/100元;
3、还有一种在日光下即可看出DNA条带的上海华舜生物工程有限公司的LightBluedye;

为了一个EB,居然不小心查出三种染料,而对这三种染料的评价也褒贬不一,我个人希望找个毒害小些,而且灵敏度还不能低于EB,价格方面也能让老板接受的来。
而对这三个染料,我有三个问题:
1、SYRBGOLD的用量问题,500ul能用到200次吗(我一般一次用30ml的胶,配在胶中)?
2、GoldViewTMDNA染料的成分是否如有些人所说的就是丫啶橙(能举出确切证据吗)?
3、LightBluedye灵敏度如何?能比得过EB吗?
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