改善RNA 分离效果的十佳方法 | Thermo Fisher Scientific CN
| 试剂、试剂盒 | 考马斯亮蓝（CBB)染色液脱色液 仪器、耗材 | SDS-PAGE电泳装置凝胶扫描装置 实验步骤 | 设备 SDS-PAGE电泳装置 凝胶扫描装置 试剂 考马斯亮蓝（CBB)染色液 脱色液 (配方，见“试剂的配制”，PP.184~189) 操作程序 1)小心地在SDS凝胶泳道上加一组按量递增为序的蛋白质样品，再按同样顺序加一组纯蛋白质样品作为定量的标准。按常规进行电泳（见附录5)。 2)从电泳装置取下凝胶，置于脱色液中漂洗1min以脱去部分SDS，再将它浸泡在CBB染色液中，于20°C缓慢摇动（如在脱色摇床上）。0.75-mm厚的凝胶需浸泡lh,1.5-mm厚的凝胶约需4h。 3)倾出CBB染色液，将凝胶浸泡在脱色液中，缓慢摇动1~4h,视凝胶厚度而定(用海绵或Kimwipe纸巾吸收游离的染料)。当大部分染料由凝胶扩散出来后,从容器中取出吸收物，于脱色液中加入CBB染色液，使其A650nm值达0.1(浅蓝色)。当时，CBB的浓度大于它与蛋白质的平均结合系数。凝胶置于此稀染色液中平衡过夜，并保存于其中直至扫描测定。 4)在650nm波长下，扫描经染色和脱色的凝胶，测定各蛋白带中结合染料的量。 5)对每条带，以结合染料量对其加样量作图，比较所得直线与标准曲线的斜率,计算各样品中目的蛋白的浓度。 6)对原材料或纯化各步祥品的凝胶扫描全程进行积分，计算σ32带中的蛋白质占总蛋白量的比例。 注：此值是纯度的最大估计值。通常，在检测极限下还有许多条带，如将它们加在一起时就不能忽略了。多数研究者常高估他们的蛋白质制备物的纯度。 |
|---|
免责声明 本文仅代表作者个人观点，与本网无关。其创作性以及文中陈述文字和内容未经本站证实，对本文以及其中全部或者部分内容、文字的真实性、完整性、及时性本站不做任何保证或承诺，请读者仅作参考，并请自行核实相关内容。
版权声明 未经蚂蚁淘授权不得转载、摘编或利用其他方式使用上述作品。已经经本网授权使用作品的，应该授权范围内使用，并注明“来源：蚂蚁淘”。违反上述声明者，本网将追究其相关法律责任。
发布于 ： 2018-08-10
阅读（309）
▍
相关分类
▍
相关文章
适于局部涂敷的预成型薄片器件的制作方法
2018年军民融合金属材料失效分析与预防专题培训的通
ChemDiv, Inc. 产品目录_第1页_Chemicalbook
进口血清哪家的比较好,价格如何 生物科学 细胞科学 ...
美国最高法院裁定人类基因不能申请专利_共产党员网
高级生物化学问答题（11页）原创力文档
Spectrumlab公司,仕必纯代理商,Spectrum经销商 ...
污水在线pH计 pH分析仪
RNA蛋白质的相互作用2 实验方法
LIGO_ZHANG的主页 站酷 (ZCOOL)
Alarmarblue：MTT终结者_Alarmarblue实验试剂 ...
中药药剂丨液体药剂(液体药剂的质量要求与检查)
▍
相关问答
