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| 实验方法原理 | |||||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| 实验材料 | 见基本方案 试剂、试剂盒 | 见基本方案 仪器、耗材 | 见基本方案 实验步骤 | 1.按照基本方案6步骤1～6操作。 要得到真实浓度的近似值，DNA的浓度由A260值计算得到，组蛋白的浓度通过BCA分析系统来确定。 2.按如下所述进行5个装配反应： 2.1在56.6ulNH中（见基本方案6步骤3）加入1ulACF（2～10U）。 2.2从冰上取下管子，平衡到室温。 2.3加入10.5ulAM主混合液（见基本方案步骤4），及2.5、2.22、2.0、1.82、1.67ulDNA模板（使用过量的拓扑异构酶Ⅰ变松弛或超螺旋的；见基本方案步骤5）。马上轻轻地涡旋混匀2～3S。 2.427℃装配1.5～2.5h。 3.按照基本方案步骤8～12操作。 4.从凝胶上分析确定组蛋白与DNA最高量的比值，这时仍然能观察到未弥散的梯度。使用下一个最低的比值作为进行进一步装配反应的最理想的比值。重新计算核心组蛋白的有效浓度以使新的最佳比值为1.0：1。 注意事项 | 其他 | |
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发布于 ： 2018-08-06
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