Description
FGF-8 (FGF-8b) is a heparin binding growth factor belonging to the FGF family. Proteins of this family play a central role during prenatal development and postnatal growth and regeneration of a variety of tissues, by promoting cellular proliferation and differentiation. There are 4 known alternate spliced forms of FGF8; FGF8A, FGF-8B, FGF-8E and FGF-8F. The human and murine FGF8 A and B are identical unlike human and mouse FGF8 E and F are 98% identical. FGF-8 targets mammary carcinoma cells and other cells expressing the FGF receptors. Recombinant human FGF-8 (FGF-8b) is a 22.5 kDa protein consisting of 194 amino acid residues.Manufactured using all non-animal reagents.
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如常用于缓冲的Tris、HEPES、MPOS等等,去垢剂如NP40,Tween-20,TritonX100,CHAPS,脱氧胆酸钠,SDS等等,
大家能说说这些试剂的使用区别吗(最好讲讲某些情况下使用一些会优于另一些的例子)
有时候某些裂解液含10%左右甘油,又是为何?
平时我们用习惯了一些配方,可能有时候不太清楚为何有些是可替代的,有些是不可替代的,借此机会想听听大家的见解?
B.阴离子去垢剂 常见的有十二烷基硫酸钠和十二烷基璜酸钠。前者可促进核蛋白的溶解,将核酸释放出来,并对核酸酶有一定抑制作用,常用于核酸的提取。
C.阳离子去垢剂 如洁尔灭、新洁尔灭、CTAB、CPC、ZEPH、克菌定、消毒净(TMPB)、杜灭芬等,消毒灭菌类居多。
D.天然表面活性剂 又称为生物表面活性剂,包括种类较为广泛,如各种树胶(阿拉伯胶、杏胶、桃胶、果胶)、明胶、皂甙、卵磷脂、豆磷脂、琼脂、海藻酸钠、酪蛋白、胆甾醇、胆酸类、多糖类(如环糊精)等。
E.两性表面活性剂 在碱性水溶液中呈阴离子表面活性剂的性质,起泡性好,去污力也强;在酸性溶液中则呈现阳离子表面活性剂特征,其杀菌性很强。向左转|向右转
表面活性剂:通常由一个极性头和一个非极性尾组成,用于去除难溶于水的污渍
漂白剂:通常含次氯酸盐成分,原理为其氧化性
稀盐酸:用于去除碱性的污渍,如马桶中的结块
碳酸钠溶液:用于去除油渍,其原理为酯在碱溶液中水解,参见皂化反应
如要膜蛋白保持原来的结构应采用:非离子型去垢剂.
RAW细胞,6孔板,RIPA提取蛋白(提前加好PMAF),每孔100uLRIPA,冰上用tip倒过来刮细胞,放置15min,12000gX15min离心,取上清。做WB时,沸水煮5min,胶冻样物质还是存在。
操作过程中发现离心后还是有胶冻样物质,和上清混在一起无法分开,严重的时候基本上全是胶冻样物质。
这个胶冻样物质应该是DNA,园友提供的方法为用超声碎裂器,但是我们实验室没有。请问还有别的方法可以使用么?
我打算用HPLC分离已经初步纯化的蛋白,大小40kd到200kd,机器是安捷伦1200.
目前只有C18的柱子,用来分环肽。
如果分比较大的蛋白,有什么效果相对好的柱子,请推荐一下。
在网上见到有人说C18也可以试着分析大蛋白,不知道会不会堵,洗不下来?

