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covalab/Keratinocyte Transglutaminase (TG1) (hu)/150 ug/pro0001
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covalab/Keratinocyte Transglutaminase (TG1) (hu)/150 ug/pro0001
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covalab
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pro0001
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Product Codepro0001
Uniprot IDP22735
NameTransglutaminase-1 (TGase-1)
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AppearanceWhite lyophilized solid
ConstituentsThe Transglutaminase is lyophilized from 50 mM Tris-HCl pH 8.0, 10 mM Glutathion.
Conc. / Activity8201 U/mg
StorageStore working aliquots at a minimum of -20°CAvoid repeated freezing and thawingDelivery at ambient temperature is possible
DescriptionHis6-rhTG1 is based on the TGM1-allele from I.M.A.G.E.-clone IRAKp961M1628 isolated from human skin squamous cell carcinoma. It is N-terminally fused to a hexahistidine-tag resulting in the encoded N-terminal amino acid sequence MHHHHHHMDGPR. His6-rhTG1 is purified by IMAC to more than 90 % purity.
Produced inInsect cells
SpeciesHuman
FormRecombinant
Gene ID7051
LabellingHis-Tag
Preparation methodAdd 10 mM Ca2+ to activate His6-rhTG1.
Molecular weight90 kDa
PrincipleHis6-rhTG1 catalyzes acyl transfer reactions from glutamin residues in proteins or peptides to primary amines, e. g. the formation of ε-(γ-glutamyl) lysine bonds between proteins by transferring the acyl group of a peptide-bound glutamine residue to the primary amino group of a peptide-bound lysine residue. His6-rhTG1 may also be used for immunoprecipitation.
Purity> 90 % (visually by SDS-PAGE)
RecommendationsAdd 340 µl of distilled water to the vial of lyophilized powder. Rotate vial gently until solid dissolves. After reconstitution the solution should be cooled on ice for short term storage. Protein concentration (determined on reconstituted rhTG1): 0.46 mg/ml
Product typeProteins
ApplicationsImmunoprecipitation, Functional Assay
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Keratinocyte Transglutaminase (TG1) (hu)

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细胞膜是一层膜、两层磷脂分子层,或者细胞膜是磷脂双分子层,他基本结构是磷脂双分子层
NP40和TritonX100的区别123
beta1iˋ2017-10-02
Triton X-100是一种非离子型去垢剂
分子式:C14H22O(C2H4O)n
用途:Triton X-100是一种比较温和的去垢剂(表面活性剂或称界面活性剂),常作为添加剂使蛋白保持稳定,尤其是膜蛋白.
性质:
1.Triton X-100对细菌等微生物没有杀伤作用.
2.Triton X-100在紫外波段下有光吸收(lambda max = 275 nm and 283 nm in methanol),因此,当缓冲液中存在Triton X-100时不能通过测定280nm光吸收来进行蛋白定量.
3.Triton X-100常与CHAPS等zwitterionic 去垢剂一起使用来纯化膜蛋白,使膜蛋白保持其天然构象.
4.Triton X-100可以提高真核细胞细胞膜的通透性,因此在Immunostaining时常使用含 0.1%-0.5%Triton X-100的PBS或TBS.
5.Triton X-100非常稳定,密封避光 +2 to +8℃条件下可以长期保存.
6.Triton X-100是透明,略显粘稠,稍微发黄的液体.
7.Triton X-100的密度为1.07 g/ml,pH6.0-8.0(5%的溶液).
8.Triton X-100可以高压灭菌.
9.用Triton X-100来裂解细胞时,0.1% Triton X-100就足够了,不过,达到0.5%时也没问题.
10.蛋白酶K在含1% Triton X-100的溶液中依然保持活性.
11.可以使用Amberlite hydrophobic XAD resins and Rezorian A161 cartridges 来去除Triton X-100 .
去垢剂(又称表面活性剂)是一类即具有亲水基又具有疏水基的物质,一般具有乳化、分散、和增溶作用,可分阴离子、阳离子和中性去垢剂等多种类型,中性去垢剂在蛋白提取中应用的较多.
中性去垢剂又称非离子表面活性剂,对蛋白质的变性作用影响较少,宜于蛋白质或酶提取之用.一般市售中性去垢剂有聚乙二醇类,如PEG200;多元醇类表面活性剂,如山梨醇、司盘类和吐温类;聚氧乙烯脂肪醇醚,如苄泽类、平平加类;聚氧乙烯烷基苯酚醚,如Igepal CO、乳化剂OP、Triton、Pluronic(用作消泡剂、润湿剂、增溶剂)、泡敌.中性去垢剂作用后可通过Sephadex LH-50柱除去;也可直接上DEAE-Sephadex柱层析分离目的蛋白,不必先除去去垢剂.
Triton X-100是一种非离子型去垢剂分子式:C14H22O(C2H4O)n用途:Triton X-100是一种比较温和的去垢剂(表面活性剂或称界面活性剂),常作为添加剂使蛋白保持稳定,尤其是膜蛋白.性质:Triton X-100对细菌等微生物没有杀伤作用.2.Triton X-100在紫外波段下有光吸收(lambda max = 275 nm and 283 nm in methanol),因此,当缓冲液中存在Triton X-100时不能通过测定280nm光吸收来进行蛋白定量.3.Triton X-100常与CHAPS等zwitterionic 去垢剂一起使用来纯化膜蛋白,使膜蛋白保持其天然构象.4.Triton X-100可以提高真核细胞细胞膜的通透性,因此在Immunostaining时常使用含 0.1%-0.5%Triton X-100的PBS或TBS.5.Triton X-100非常稳定,密封避光 +2 to +8℃条件下可以长期保存.6.Triton X-100是透明,略显粘稠,稍微发黄的液体.7.Triton X-100的密度为1.07 g/ml,pH6.0-8.0(5%的溶液).8.Triton X-100可以高压灭菌.9.用Triton X-100来裂解细胞时,0.1% Triton X-100就足够了,不过,达到0.5%时也没问题.10.蛋白酶K在含1% Triton X-100的溶液中依然保持活性.11.可以使用Amberlite hydrophobic XAD resins and Rezorian A161 cartridges 来去除Triton X-100 .去垢剂(又称表面活性剂)是一类即具有亲水基又具有疏水基的物质,一般具有乳化、分散、和增溶作用,可分阴离子、阳离子和中性去垢剂等多种类型,中性去垢剂在蛋白提取中应用的较多.中性去垢剂又称非离子表面活性剂,对蛋白质的变性作用影响较少,宜于蛋白质或酶提取之用.一般市售中性去垢剂有聚乙二醇类,如PEG200;多元醇类表面活性剂,如山梨醇、司盘类和吐温类;聚氧乙烯醇醚,如苄泽类、平平加类;聚氧乙烯烷基苯酚醚,如Igepal CO、乳化剂OP、Triton、Pluronic(用作消泡剂、润湿剂、增溶剂)、泡敌.中性去垢剂作用后可通过Sephadex LH-50柱除去;也可直接上DEAE-Sephadex柱层析分离目的蛋白,不必先除去去垢剂.
常用的去垢剂有: 离子型去垢剂 非离子型去垢剂 两类.
如要膜蛋白保持原来的结构应采用:非离子型去垢剂.
几种常用离子去垢剂的使用 123
血刺沫沫丶f硢2017-10-02
铬酸洗液:由重铬酸钾和浓硫酸配置,具有氧化性和酸性,用于清洗化学仪器上的污点
表面活性剂:通常由一个极性头和一个非极性尾组成,用于去除难溶于水的污渍
漂白剂:通常含次氯酸盐成分,原理为其氧化性
稀盐酸:用于去除碱性的污渍,如马桶中的结块
碳酸钠溶液:用于去除油渍,其原理为酯在碱溶液中水解,参见皂化反应
这煮蛋器里的加热胆(银色)上是垢还是什么?去垢剂去除不了,怎办?
蛋白质变性剂的作用是破坏蛋白质的次级键,如氢键、盐键和疏水力,引起天然构象的解体;它们并不破坏共价键,如肽键和二硫键,故不涉及一级结构的改变。变性剂有溶解型和沉淀型两类,SDS、尿素和胍盐是有效的溶解型变性剂,而三氯乙酸、甲醇、和氯仿/异戊醇是有效的沉淀变性剂。一般而言,变性剂应用时常大大过量,破坏氢键的变性剂用量至少两倍于氨基酸的克分子数,如1克蛋白质可可结合1.4g。 SDS溶于水可达25%,对温度敏感,W/V贮存液最为方便。需要注意的是SDS的钾盐是不溶性的,所以SDS溶液中要避免混入钾盐。 尿素极易溶于水,可达10mol/L,在8mol/L以上要注意温度以防止沉淀。尿素在水中缓慢分解形成氨及高度活性的氰酸离子,故要防止高温。 三氯乙酸与过氯酸(TCA,PCA)都是极好的沉淀剂,能沉淀蛋白质和核酸,前者应用更为广泛。
去垢剂作为添加剂生长蛋白质晶体是一项很有用的技术。非离子和两性离子结晶剂在膜蛋白结晶中已经得到很好应用,目前已经变成常规的实验手段。去垢剂在一些可溶蛋白中也起到了一定的作用,提高了晶体的质量和结果的可重复性 ,促进了单晶的生长, 但具体的影响机制尚不明确。其可能原因是去垢剂的引入使结晶液滴中的蛋白分子更具有亲水性,使溶液中同质蛋白质分子增加。向左转|向右转
去垢剂分离膜蛋白,最后是如何释放蛋白质而得到蛋白质的呢?
离子型去垢剂 非离子型去垢剂 两类. 如要膜蛋白保持原来的结构应采用:非离子型去垢剂.
文献上都强调要选用强的去垢剂,不知道各位在这方面有什么心得吗?是不是需要同时使用多种去垢剂。关于SB3-10,ASB14等,大家有建议吗?我准备根据文献同时使用CHAPS和ASB14。大家看如何
因2DE实验需要,急需上述去垢剂,北京地区。