
Product Name | SensoLyte ® AFC Caspase Substrate Sampler Kit *Fluorimetric* |
Size | 1 kit |
Catalog # | AS-71117 |
US$ | $563 |
Caspases play important roles in apoptosis and cell signaling. They are also identified as drug-screening targets. AFC-based substrates yield blue fluorescence upon protease cleavage (Ex/Em=380 nm/500 nm). They are widely used to monitor caspase activity. The SensoLyte® Caspase Substrate Kit contains a series of AFC-based peptide substrates as fluorogenic indicators for assaying caspase protease activities. It provides the best solution for identifying a suitable substrate for designing AFC-based caspase assays. All the components in the kit are available in bulk package. The kit contains: 8 AFC caspase substrates Assay buffer AMC (fluorescence reference standard for calibration) A detailed protocol Kit Size: 8 x 100 assays | |
Detailed Information | ![]() ![]() |
Storage | -20°C |
Product Citations | Twiner, MJ. et al. (2012). Induction of apoptosis pathways in several cell lines following exposure to the marine algal toxin Azaspiracid. Chem Res Toxicol 25, 1493.Gugliesi, F. et al. (2010). The proapoptotic activity of the Interferon-inducible gene IFI16 provides new insights into its etiopathogenetic role in autoimmunity. J Autoimmun doi:10.1016/j.jaut.2010.04.001. |
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我要做的两个目的蛋白,分子量一个是140的,另一个是36,内参用的GAPDH。这几天刚刚要做小鼠组织的蛋白,就把新提取的组织蛋白和之前做过的细胞蛋白一起上了,细胞和组织的各上了3个孔。
电泳转膜孵育等条件都是以前做成熟的
之后显影,细胞蛋白的,两个目的和内参都出得挺好;但是小鼠的组织蛋白只有分子量140的那个显出条带了,36的那个显出来的像一片水渍一样,斑片状的黑,内参有时也这样、有时干脆什么都不显。不知道这是什么原因...按说细胞同样的蛋白做出来,WB的各个步骤应该不会有太大问题的。
有点怀疑蛋白提取的不好,我提组织蛋白的的操作是在冰上进行的,裂解液也加有PMSF,用BCA法测得的蛋白浓度大概也有3~5mg/ml。
在这里求助各位高手~望给我指点一下~不胜感激啊!
去垢剂作为添加剂生长蛋白质晶体是一项很有用的技术。非离子和两性离子结晶剂在膜蛋白结晶中已经得到很好应用,目前已经变成常规的实验手段。去垢剂在一些可溶蛋白中也起到了一定的作用,提高了晶体的质量和结果的可重复性 ,促进了单晶的生长, 但具体的影响机制尚不明确。其可能原因是去垢剂的引入使结晶液滴中的蛋白分子更具有亲水性,使溶液中同质蛋白质分子增加。向左转|向右转
如要膜蛋白保持原来的结构应采用:非离子型去垢剂.
表面活性剂:通常由一个极性头和一个非极性尾组成,用于去除难溶于水的污渍
漂白剂:通常含次氯酸盐成分,原理为其氧化性
稀盐酸:用于去除碱性的污渍,如马桶中的结块
碳酸钠溶液:用于去除油渍,其原理为酯在碱溶液中水解,参见皂化反应

