Details
Chickens were immunized with a synthetic peptide containing the human c-myc epitope tag – EQKLISEEDL – conjugated to keyhole limpet hemocyanin (KLH).The sequence of this peptide corresponds to residues #425-434 of the human c-myc proto-oncogene protein (NCBI NP_002458.2).After repeated injections, immune eggs were collected from the hens, and the IgY fractions were purified from the yolks.These IgY fractions were then affinity-purified using an agarose matrix to which the cognate peptide was attached.Eluates of this column were dialyzed against PBS, and then conjugated to fluorescein using its isothiocyanate form (FITC).Fluorescein-labeled antibody was separated from free FITC using gel exclusion chromatography (Sephadex G-50), and the protein concentration was adjusted to 0.1 mg/mL in PBS with 0.02% sodium azide.Finally, the preparation was filter-sterilized.
Volume: 1 mL
Clonality: Polyclonal
Host Species: Chicken
Storage
Store at 4°C in the dark. Under these conditions, the antibodies should have a shelf life of at least 12 months (provided they remain sterile). For longer storage periods, dilute the antibodies with sterile glycerol and store at -20°C. Do not freeze these antibodies unless you want to store them for longer periods of time.
NOTE
Aves Labs products are intended for use as research laboratory reagents. They are not intended for use as diagnostic or therapeutic reagents in humans.
↑ back to top
AvesLabs是一家成立于上世纪九十年代,专注于高亲和性鸡源抗体的研发和准备,生物医药和生命科学行业全球*的鸡多克隆抗体(IgY)及定制抗体/多肽/免疫试剂的专业公司。AvesLabs在鸡源神经系统标志蛋白/抗体研究领域拥有独特优势,不仅品种多样,质量优良,而且适用于人/大小鼠等多个物种的神经系统研究,包括神经元/胶质细胞/雪旺细胞的各亚细胞结构免疫双标/免疫共沉淀研究。公司独有的技术及优质抗体产品有助于全球科研人员更为便捷的解决学术研究及应用研发课题。除了丰富的产品线外,AvesLabs还为客户提供优质的抗体定制服务,您只需要提供需要研究的重组蛋白或合成多肽,我们即可为您生产优质的鸡源多克隆抗体。
神经元标志蛋白抗体该系列产品主要用于神经元细胞的各亚细胞结构研究,可与现有的小鼠/兔抗体进行免疫双标,反应性包括人、小鼠等多个哺乳类动物。在保证抗体特异性的前提下,部分产品可分为抗不同的氨基酸片段。该系列产品包括抗APP3/APP345/APP4/APP5/ABN/TUJ/CAT/DCX/ER1/ER2/ER3/ER5/GAD/GAP43/MAP/NET/NUN/NSE/NFH/NFL/NFM/PER/PRN/PAP/STG/TAU/TYH的抗体。除单独的抗体提供,我们还可同时提供1/3种任意抗体组合及相应二抗的试剂盒,以更优惠的价格及便捷性以满足研究人员的不同需要。
胶质细胞及雪旺细胞标志蛋白抗体该系列产品主要用于胶质细胞及雪旺细胞的各亚细胞结构的研究,可与可与现有的小鼠/兔抗体进行免疫双标,反应性包括人、大鼠等多个哺乳类动物。在保证抗体特异性的前提下,部分产品可分为抗不同的氨基酸片段。该系列产品包括抗COR/GFAP/MAC/MBP/NES/PZO/PLP/VIM抗体。同样,除单独的抗体提供,我们还可同时提供1/3种任意抗体组合及相应二抗的试剂盒,以更优惠的价格及便捷性以满足研究人员的不同需要。
二抗该系列产品特点在于鸡IgY分子与哺乳动物IgG分子截然不同,因此由之制备的二抗不与来源于兔、小鼠或其他哺乳动物的一抗产生交叉反应,特别适用于组织学的免疫双标检测。该系列源于羊的二抗可交联荧光基团/HRP/生物素/琼脂糖,可广泛用于WB,免疫组化/免疫细胞化学及免疫共沉淀研究。
mmunoprecipitationReagents(IP)该系列产品中 HA-PrecipHen® 由鸡anti-HAepitopetag抗体共价结合到琼脂糖粒而成,适用于利用HAepitope-tagged蛋白的immunoprecipitation(IP),chromatinimmunoprecipitation(ChIP)以及蛋白纯化研究。而IgY-PrecipHen®由羊抗鸡的IgY抗体共价结合到琼脂糖粒上而成,适用于鸡源抗体与目标蛋白之间的immunoprecipitation(IP),chromatinimmunoprecipitation(ChIP)以及蛋白纯化研究。
对高度保守的哺乳动物基因产物有更高的描述由于鸡与哺乳动物的距离至少有1亿年之久,它们倾向于将哺乳动物的任何基因产物视为外来物,并产生强烈的免疫反应。简单双疣状鸡IgYs可以与小鼠和兔抗体一起使用,没有交叉反应的危险。针对鸡igy的二级抗体不会与哺乳动物igg发生交叉反应。友好型我们从鸡蛋中纯化抗体,而不是血清。与此相反,在兔实验中,通过抑制动物,进行耳出血或心脏穿刺来获得血清。这只是一种更人道的产生抗体的方法。成本效益和更持久的我们的鸡用抗体是>90%IgY,在4度完美呈现5年以上保质期。相比之下,多数公司提供的rabbitserum(兔乳)在4˚C (完美呈现)(以周至月为单位)的货架期非常有限,而且一旦冷冻,一些生物活性会丧失。将兔抗体纯化至相应纯度的成本。蛋白质a纯化)是非常昂贵的。几乎无限量我们从每只母鸡那里收集了大约18个“免疫鸡蛋”,但是只使用了6个“免疫鸡蛋”来准备你的IgY准备。然后我们把剩下的12个“免疫鸡蛋”储存在冰箱里,以备将来你需要更多的抗体。此外,我们可以继续为母鸡提供住宿(另收费),以备您需要我们进行额外的注射。鸡IgY的茎部没有“Fc结构域”这提供了几个优势比兔igg:它减少了在诊断应用中出现假阳性的可能性,因为是哺乳动物的Fc域结合“类风湿因子”或其他自然产生的抗Fc抗体。不激活哺乳动物补体系统,允许鸡IgYs在体内应用。不与哺乳动物Fc受体结合,避免与表达此类受体的细胞(如巨噬细胞和树突状细胞)发生非特异性结合。
ebiomall.com
>
>
>
>
>
>
>
>
>
>
>
>
(一)特异性结合抗原
Ig最显著的生物学特点是能够特异性地与相应的抗原结合,如细菌、病毒、寄生虫、某些药物或侵入机体的其他异物。Ig的这种特异性结合抗原特性是由其V区(尤其是V区中的高变区)的空间构成所决定的。Ig的抗原结合点由L链和H链超变区组成,与相应抗原上的表位互补,借助静电力、氢键以及范德华力等次级键相结合,这种结合是可逆的,并受到pH、温度和电解浓度的影响。在某些情况下,由于不同抗原分子上有相同的抗原决定簇,或有相似的抗原决定簇,一种抗体可与两种以上的抗原发生反应,此称为交叉反应(cross reaction)。
抗体分子可有单体、双体和五聚体,因此结合抗原决定簇的数目(结合价)也不相同。Fab段为单价,不能产生凝集反应和沉淀反应。F(ab')2和单体Ig(如IgG、IgD、IgE)为双价。双体分泌型IgA有4价。五聚体IgM理论上应为10价,但实际上由于立体构型的空间位阻,一般只有5个结合点可结合抗原。 B细胞表面Ig(SmIg)是特异性识别抗原的受体,成熟B细胞主要表达SmIgM和SmIgD,同一B细胞克隆表达不同类SmIg其识别抗原的特异性是相同的。
(二)活化补体
1.IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通过经典途径活化补体。当抗体与相应抗原结合后,IgG的CH2和IgM的CH3暴露出结合C lq的补体结合点,开始活化补体。由于Clq6个亚单位中一般需要2个C端的球与补体结合点结合后才能依次活化Clr和Cls,因此IgG活化补体需要一定的浓度,以保证两个相邻的IgG单体同时与1个Clq分子的两个亚单位结合。当Clq一个C端球部结合IgG时亲和力则很低,Kd为10-4M,当Clq两个或两个以上球部结合两个或多个IgG分时,亲合力增高Kd为10-8M。IgG与Clq结合点位于CH2功能区中最后一个β折叠股318~322位氨基酸残基(Glu-x-Lys-x-Lys)。IgM倍以上。人类天然的抗A和抗B血型抗体为IgM,血型不符合引韦的输血反应发生快而且严重。
2.凝聚的IgA、IgG4和IgE等可通过替代途径活化补体。
(三)结合Fc受体
不同细胞表面具有不同Ig的Fc受体,分别用FcγR、FcεR、FcαR等来表示。当Ig与相应抗原结合后,由于构型的改变,其Fc段可与具有相应受体的细胞结合。IgE抗体由于其Fc段结构特点,可在游离情况下与有相应受体的细胞(如嗜碱性粒细胞、肥大细胞)结合,称为亲细胞抗体(cytophilic antibody)。抗体与Fc受体结合可发挥不同的生物学作用。1.介导I型变态反应变应原刺激机体产生的IgE可与嗜碱性粒细胞、肥大细胞表面IgE高亲力受体细胞脱颗粒,释放组胺,合成由细胞FcεRI结合。当相同的变应原再次进入机体时,可与已固定在细胞膜上的IgE结合,刺激细胞脱颗粒,释放组受,合成由细胞脂质来源的介质如白三烯、前列腺素、血小板活化因子等,引起Ⅰ型变态反应。
2.调理吞噬作用 调理作用(opsonization)是指抗体、补体C3b、C4b等调理素(opsonin)促进吞噬细菌等颗粒性抗原。由于补体对热不稳定,因此又称为热不稳定调理素(heat-labile opsonin)。抗体又称热稳定调理素(heat-stable opsonin)。补体与抗体同时发挥调理吞噬作用,称为联合调理作用。中性粒细胞、单核细胞和巨噬细胞具有高亲和力或低亲和力的FcγRI(CD64)和FcγRⅡ(CD32),IgG尤其是人IgG1和IgG3亚类对于调理吞噬起主要作用。嗜酸性粒细胞具有亲和力FcγRⅡ,IgE与相应抗原结合后可促进嗜酸性粒细胞的吞噬作用。抗体的调理机制一般认为是:①抗体在抗原颗粒和吞噬细胞之间“搭桥”,从而加强了吞噬细胞的吞噬作用;②抗体与相应颗粒性抗原结合后,改变抗原表面电荷,降低吞噬细胞与抗原之间的静电斥力;③抗体可中和某些细菌表面的抗吞噬物质如肺炎双球菌的荚膜,使吞噬细胞易于吞噬;④吞噬细胞FcR结合抗原抗体复合物,吞噬细胞可被活化。 抗体的调理吞噬作用。
3.发挥抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用 当IgG抗体与带有相应抗原的靶细胞结合后,可与有FcγR的中性粒细胞、单核细胞、巨噬细胞、NK细胞等效应细胞结合,发挥抗体依赖的细胞介导的细胞毒作(antibodydependent cellmediated cytotoxicity,ADCC)。目前已知。NK细胞发挥ADCC效应主要是通过其膜表面低亲和力FcγRⅢ(CD16)所介导的,IgG不仅起到连接靶细胞和效应细胞的作用,同时还刺激NK细胞合成和分泌肿瘤坏死因子和γ干扰素等细胞因子,并释放颗粒,溶解靶细胞。嗜酸性粒细胞发挥ADCC作用是通过其FcεRⅡ和FcαR介导的,嗜酸性粒细胞可脱颗粒释放碱性蛋白等,在杀伤寄生虫如蠕虫中发挥重要作用。 抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用(ADCC)。
此外,人IgGFc段能非特异地与葡萄菌A蛋白(staphylococcus proteinA,SPA)结合,应用SPA可纯化IgG等抗体,或代替第二抗体用。展开
各种不同类别的免疫球蛋白分子都含有四条多肽链组成的基本结构单位,即由两条重链(heavy chain, H链)和两条轻链(light chain, L链)通过不同数目的二硫键结成Y形。在抗体分子的N端,不同抗体分子的氨基酸组成和顺序都是不同的,此区为“多变区“(variable region, V区),它是抗体分子与抗原决定簇的结合部位。由于抗体多变区这一结构特点,决定了它对抗原分子“识别功能”的多样性;不同抗体分子的C端结构基本恒定,称为“稳定区”(constant region, C区)。当抗原与抗体结合时,抗体分子发生变构效应和集聚作用,使稳定区的某些部位暴露出来,并立即发生一系列免疫生理效应,如固定补体,促进对抗原分子的吞噬、溶解和清除作用。
其主要作用就是人体的防御军队,抵抗外来的病毒、细菌的侵袭。
主要作用:
(1)特异性结合抗原:抗体本身不能直接溶解或杀伤带有特异抗原的靶细胞,通常需要补体或吞噬细胞等共同发挥效应以清除病原微生物或导致病理损伤.然而,抗体可通过与病毒或毒素的特异性结合,直接发挥中和病毒的作用.
(2)激活补体:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通过经典途径激活补体,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通过替代途径激活补体.
(3)结合细胞:不同类别的免疫球蛋白,可结合不同种的细胞,产生不同的疚,参与免疫应答.
(4)可通过胎盘及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通过胎盘进入胎儿血流中,使胎儿形成自然被动免疫.免疫球蛋白A(IgA)可通过消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素.
(5)具有抗原性:抗体分子是一种蛋白质,也具有刺激机体产生免疫应答的性能.不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性.
(6)抗体对理化因子的抵抗力与一般球蛋白相同:不耐热,60~70℃即被破坏.各种酶及能使蛋白质凝固变性的物质,均能破坏抗体的作用.抗体可被中性盐类沉淀.在生产上常可用硫酸铵或硫酸钠从免疫血清中沉淀出含有抗体的球蛋白,再经透析法将其纯化.
(7)通过与细胞Fc受体结合发挥多种生物效应
①调理作用 IgG、IgM的Fc段与吞噬细胞表面的FcγR、FcμR结合,增强其吞噬能力,通常将抗体促进吞噬细胞吞噬功能的作用称为抗体的调理作用 (opsonization).
②发挥抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用。

