| Description | |
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| Catalogue Number | MABE341-AF488 |
| Description | Anti-Puromycin, clone 17H1, Alexa Fluor® 488 Conjugate Antibody |
| Background Information | Puromycin is an aminonucleoside antibiotic, derived from the Streptomyces alboniger bacterium, that functions as a protein synthesis inhibitor that blocks translation through premature chain termination in the ribosome. Monoclonal antibodies to puromycin may be used with standard immunochemical methods to directly monitor translation, a method known as surface sensing of translation (SUnSET). Part of the molecule resembles the 3' end of the aminoacylated tRNA, making it useful for protein translation analysis. Puromycin induces DNA fragmentation in thymocytes and in human HL-60 leukemia cells. This product is a conjugated version of Cat. No. MABE341. |
| Product Information | |
|---|---|
| Format | AlexaFluor®488 |
| Presentation | Purified rat monoclonal conjugate in buffer containing PBS and 15 mg/ml BSA with 0.1% Sodium Azide. |
| Storage and Shipping Information | |
|---|---|
| Storage Conditions | Stable for 1 year at 2-8°C from date of receipt. |
| Applications | |
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| Application | This Anti-Puromycin, clone 17H1 is validated for use in Immunocytochemistry for the detection of Puromycin. |
| Key Applications |
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| Physicochemical Information |
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| Dimensions |
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| Materials Information |
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| Materials Information |
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2006年,在完成了对Chemicon、Upstate、Linco等著名品牌的收购之后,密理博生物科学部除了提供传统的除菌过滤、超滤、蛋白质转印、免疫诊断、环境监测等分离纯化产品和技术之外,更增加了实验室研究所需的各种检测试剂、细胞培养产品,主要覆盖干细胞、神经生物学、肿瘤、细胞信号转导、药物开发等领域,从而成为生命科学领域的策略性供应商,为您提供更广泛的研发工具,同步共享全球专业技术,提升您的科研平台,加速您的科研进程。该部门拥有的著名品牌有:Millex、Millicell、Amicon、Durapore、Multiscreen、Montage、Multiplex、Stericup、Chemicon、Upstate、4G10、Luminex、Catch、Release和Beadlyte等。
密理博(Millipore)公司成立于1954年,总部位于美国麻省,在全世界设有47个办事处,为100多个国家提供产品和技术服务。目前全球雇员超过5800人,在美国、法国和日本等国家拥有7家大型生产工厂,主要生产过滤膜及膜过滤产品。
20世纪80年代,密理博公司进入中国市场。先后在香港、北京、上海、广州及成都设立了办事机构,并于2000年4月在上海浦东外高桥保税区建立了密理博(上海)贸易有限公司。
为了更好地满足中国用户的需求,密理博中国主页(www.millipore.com/cn)于2006年11月向广大用户开放,介绍密理博中国有限公司的最新动态,力求为用户打造专业的产品与服务信息交流平台。
产品与服务
密理博公司产品按应用范围可划分为4大部分:实验室纯水、生命科学、膜技术和生物工程及制药。
目前,密理博实验室纯水设备在行业内占据绝对主导地位。从经典的MIlli-Q超纯水系列,Elix纯水系统,RiOs反渗透纯水系统,到新型的Simplicity、Direct-Q等小流量应用系统,密理博的纯水生产设备已成为实验室纯水行业的金标准。膜技术则为免疫诊断试纸条、免疫浓缩检测装置的生产提供全套膜材料,并提供各种材质、孔径的过滤膜及即用式过滤装置,还有专为医疗设备配套的批量供应的一次性过滤器。密理博生命科学的过滤、超滤产品及蛋白印迹系列产品也得到广泛应用,蛋白质组、基因组系列试剂盒以及用于新药开发的多孔滤膜板日益得到用户的认可。2006年,密理博在生命科学领域又迈出了重要一步,完成了对Serologicals公司的合并,这一举措使得产品涉及的广度明显增强,大大加强了Millipore全面服务各个领域的能力,从而进一步确立了密理博的行业领先地位。
除实验室产品外,密理博同样为生物工程和制药企业提供高品质的纯化设备与服务。密理博的滤器、超滤器、反渗透系统、层析系统、层析柱及层析填料,用于药品及生物制品的澄清、分离、纯化、浓缩,和最终产品的除菌、除热原、除病毒,可以满足从小试、中试到大规模生产的各种需求;并可以帮助用户进行过滤、超滤系统的设计、评估及GMP要求的设备验证。此外还提供制药行业、食品饮料行业,微电子行业全面的质量控制产品与服务。
密理博不仅拥有优秀的产品,更提供专业的技术支持服务。在将经销网络覆盖至全国的同时,密理博在全国各省、市、自治区都配备了专业维护工程师,建立了一支技术成熟、认真负责的销售、维修及后勤队伍,以确保中国各个地区的用户都可以方便快捷地得到服务。同时密理博还拥有完善的培训体制,除了每年对公司内部工程师的培训,2006年9月,密理博公司在上海办事处成立了Millipore培训中心,定期为经销商的维修专员进行培训。此外,密理博还在全国多个重点高校和研究机构建立了示范实验室。
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(一)特异性结合抗原
Ig最显著的生物学特点是能够特异性地与相应的抗原结合,如细菌、病毒、寄生虫、某些药物或侵入机体的其他异物。Ig的这种特异性结合抗原特性是由其V区(尤其是V区中的高变区)的空间构成所决定的。Ig的抗原结合点由L链和H链超变区组成,与相应抗原上的表位互补,借助静电力、氢键以及范德华力等次级键相结合,这种结合是可逆的,并受到pH、温度和电解浓度的影响。在某些情况下,由于不同抗原分子上有相同的抗原决定簇,或有相似的抗原决定簇,一种抗体可与两种以上的抗原发生反应,此称为交叉反应(cross reaction)。
抗体分子可有单体、双体和五聚体,因此结合抗原决定簇的数目(结合价)也不相同。Fab段为单价,不能产生凝集反应和沉淀反应。F(ab')2和单体Ig(如IgG、IgD、IgE)为双价。双体分泌型IgA有4价。五聚体IgM理论上应为10价,但实际上由于立体构型的空间位阻,一般只有5个结合点可结合抗原。 B细胞表面Ig(SmIg)是特异性识别抗原的受体,成熟B细胞主要表达SmIgM和SmIgD,同一B细胞克隆表达不同类SmIg其识别抗原的特异性是相同的。
(二)活化补体
1.IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通过经典途径活化补体。当抗体与相应抗原结合后,IgG的CH2和IgM的CH3暴露出结合C lq的补体结合点,开始活化补体。由于Clq6个亚单位中一般需要2个C端的球与补体结合点结合后才能依次活化Clr和Cls,因此IgG活化补体需要一定的浓度,以保证两个相邻的IgG单体同时与1个Clq分子的两个亚单位结合。当Clq一个C端球部结合IgG时亲和力则很低,Kd为10-4M,当Clq两个或两个以上球部结合两个或多个IgG分时,亲合力增高Kd为10-8M。IgG与Clq结合点位于CH2功能区中最后一个β折叠股318~322位氨基酸残基(Glu-x-Lys-x-Lys)。IgM倍以上。人类天然的抗A和抗B血型抗体为IgM,血型不符合引韦的输血反应发生快而且严重。
2.凝聚的IgA、IgG4和IgE等可通过替代途径活化补体。
(三)结合Fc受体
不同细胞表面具有不同Ig的Fc受体,分别用FcγR、FcεR、FcαR等来表示。当Ig与相应抗原结合后,由于构型的改变,其Fc段可与具有相应受体的细胞结合。IgE抗体由于其Fc段结构特点,可在游离情况下与有相应受体的细胞(如嗜碱性粒细胞、肥大细胞)结合,称为亲细胞抗体(cytophilic antibody)。抗体与Fc受体结合可发挥不同的生物学作用。1.介导I型变态反应变应原刺激机体产生的IgE可与嗜碱性粒细胞、肥大细胞表面IgE高亲力受体细胞脱颗粒,释放组胺,合成由细胞FcεRI结合。当相同的变应原再次进入机体时,可与已固定在细胞膜上的IgE结合,刺激细胞脱颗粒,释放组受,合成由细胞脂质来源的介质如白三烯、前列腺素、血小板活化因子等,引起Ⅰ型变态反应。
2.调理吞噬作用 调理作用(opsonization)是指抗体、补体C3b、C4b等调理素(opsonin)促进吞噬细菌等颗粒性抗原。由于补体对热不稳定,因此又称为热不稳定调理素(heat-labile opsonin)。抗体又称热稳定调理素(heat-stable opsonin)。补体与抗体同时发挥调理吞噬作用,称为联合调理作用。中性粒细胞、单核细胞和巨噬细胞具有高亲和力或低亲和力的FcγRI(CD64)和FcγRⅡ(CD32),IgG尤其是人IgG1和IgG3亚类对于调理吞噬起主要作用。嗜酸性粒细胞具有亲和力FcγRⅡ,IgE与相应抗原结合后可促进嗜酸性粒细胞的吞噬作用。抗体的调理机制一般认为是:①抗体在抗原颗粒和吞噬细胞之间“搭桥”,从而加强了吞噬细胞的吞噬作用;②抗体与相应颗粒性抗原结合后,改变抗原表面电荷,降低吞噬细胞与抗原之间的静电斥力;③抗体可中和某些细菌表面的抗吞噬物质如肺炎双球菌的荚膜,使吞噬细胞易于吞噬;④吞噬细胞FcR结合抗原抗体复合物,吞噬细胞可被活化。 抗体的调理吞噬作用。
3.发挥抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用 当IgG抗体与带有相应抗原的靶细胞结合后,可与有FcγR的中性粒细胞、单核细胞、巨噬细胞、NK细胞等效应细胞结合,发挥抗体依赖的细胞介导的细胞毒作(antibodydependent cellmediated cytotoxicity,ADCC)。目前已知。NK细胞发挥ADCC效应主要是通过其膜表面低亲和力FcγRⅢ(CD16)所介导的,IgG不仅起到连接靶细胞和效应细胞的作用,同时还刺激NK细胞合成和分泌肿瘤坏死因子和γ干扰素等细胞因子,并释放颗粒,溶解靶细胞。嗜酸性粒细胞发挥ADCC作用是通过其FcεRⅡ和FcαR介导的,嗜酸性粒细胞可脱颗粒释放碱性蛋白等,在杀伤寄生虫如蠕虫中发挥重要作用。 抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用(ADCC)。
此外,人IgGFc段能非特异地与葡萄菌A蛋白(staphylococcus proteinA,SPA)结合,应用SPA可纯化IgG等抗体,或代替第二抗体用。展开
各种不同类别的免疫球蛋白分子都含有四条多肽链组成的基本结构单位,即由两条重链(heavy chain, H链)和两条轻链(light chain, L链)通过不同数目的二硫键结成Y形。在抗体分子的N端,不同抗体分子的氨基酸组成和顺序都是不同的,此区为“多变区“(variable region, V区),它是抗体分子与抗原决定簇的结合部位。由于抗体多变区这一结构特点,决定了它对抗原分子“识别功能”的多样性;不同抗体分子的C端结构基本恒定,称为“稳定区”(constant region, C区)。当抗原与抗体结合时,抗体分子发生变构效应和集聚作用,使稳定区的某些部位暴露出来,并立即发生一系列免疫生理效应,如固定补体,促进对抗原分子的吞噬、溶解和清除作用。
其主要作用就是人体的防御军队,抵抗外来的病毒、细菌的侵袭。
主要作用:
(1)特异性结合抗原:抗体本身不能直接溶解或杀伤带有特异抗原的靶细胞,通常需要补体或吞噬细胞等共同发挥效应以清除病原微生物或导致病理损伤.然而,抗体可通过与病毒或毒素的特异性结合,直接发挥中和病毒的作用.
(2)激活补体:IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通过经典途径激活补体,凝聚的IgA、IgG4和IgE可通过替代途径激活补体.
(3)结合细胞:不同类别的免疫球蛋白,可结合不同种的细胞,产生不同的疚,参与免疫应答.
(4)可通过胎盘及粘膜:免疫球蛋白G(IgG)能通过胎盘进入胎儿血流中,使胎儿形成自然被动免疫.免疫球蛋白A(IgA)可通过消化道及呼吸道粘膜,是粘膜局部抗感染免疫的主要因素.
(5)具有抗原性:抗体分子是一种蛋白质,也具有刺激机体产生免疫应答的性能.不同的免疫球蛋白分子,各具有不同的抗原性.
(6)抗体对理化因子的抵抗力与一般球蛋白相同:不耐热,60~70℃即被破坏.各种酶及能使蛋白质凝固变性的物质,均能破坏抗体的作用.抗体可被中性盐类沉淀.在生产上常可用硫酸铵或硫酸钠从免疫血清中沉淀出含有抗体的球蛋白,再经透析法将其纯化.
(7)通过与细胞Fc受体结合发挥多种生物效应
①调理作用 IgG、IgM的Fc段与吞噬细胞表面的FcγR、FcμR结合,增强其吞噬能力,通常将抗体促进吞噬细胞吞噬功能的作用称为抗体的调理作用 (opsonization).
②发挥抗体依赖的细胞介导的细胞毒作用。

