Rabbit polyclonal antibody
Pooled Serum- Size:
- 100 µl
- Formulation:
- Affinity Purified from Pooled Serum
- Specificity:
- Rat, Mouse, Human, Xenopus, Bovine, Chicken, Zebra fish
- Applications:
- WB 1:1,000
- Species:
- Rabbit
- Molecular Reference:
- ~46 kDa
- Cite This Antibody:
- PhosphoSolutions Cat# p1110-331, RRID:AB_2492088
Antigen/Purification: Collapse
The antigen is a phosphopeptide corresponding to amino acid residues surrounding the phospho-Tyr331 of chicken EphrinB. Note: Chicken Tyr331 is the homolog of mouse and rat Tyr343, human Tyr344 and also Xenopus Tyr324.
The antibody is prepared from pooled rabbit serum by affinity purification via sequential chromatography on phospho- and dephospho-peptide affinity columns.
Biological Significance: Collapse
EphrinB proteins are thought to play key roles in cellular functions as diverse as neuronal migration and blood vessel development (Flanagan and Vanderhaeghen, 1998; Dufour et al., 2003; Oike et al., 2002). EphrinB molecules expressed at the membrane surface bind to the EphB family receptors on target cells during cell-to cell contact. This interaction leads to cell signaling in the target cell but also generates a reverse signal in the cell expressing EphrinB on its surface. This reverse signaling event is thought to be critical for vessel maturation and neuronal development. Importantly, tyrosine phosphorylation of EphrinB is thought to be a critical component of this reverse signaling event (Palmer et al., 2002). Recent work demonstrated that Tyr331 of EphrinB was phosphorylated in HEK293 cells after stimulation by the soluble EphB2 receptor tyrosine kinase (Kalo et al., 2001).
Storage
100 µl in 10 mM HEPES (pH 7.5), 150 mM NaCl, 100 µg BSA per ml and 50% glycerol. Adequate amount of material to conduct 10-mini Western Blots.
For long term storage –20° C is recommended. Stable at –20° C for at least 1 year.
General References
Bong, Y.S., Park, Y.H., Lee, H.S., Mood, K., Ishimura, A. and Daar, I.O. Tyr-298 in ephrinB1 is critical for an interaction with the Grb4 adaptor protein, Biochem. J. 377:499-507 (2004).
Dufour, A., Seibt, J., Passante, L., Depaepe, V., Ciossek, T., Frisen, J., Kullander, K., Flanagan, J.G., Polleux, F. and Vanderhaeghen, P. Area specificity and topography of thalamocortical projections are controlled by ephrin/Eph genes, Neuron 39:453-465 (2003).
Flanagan, J.G. and Vanderhaeghen, P. The ephrins and Eph receptors in neural development, Annu. Rev. Neurosci. 21:309-345 (1998).
Oike, Y., Ito, Y., Hamada, K., Zhang, X.Q., Miyata, K., Arai, F., Inada, T., Araki, K., Nakagata, N., Takeya, M., Kisanuki, Y.Y., Yanagisawa, M., Gale, N.W. and Suda, T, Regulation of vasculogenesis and angiogenesis by EphB/ephrin-B2 signaling between endothelial cells and surrounding mesenchymal cells, Blood 100:1326-1333 (2002).
Palmer, A., Zimmer, M., Erdmann, K.S., Eulenburg, V., Porthin, A., Heumann, R., Deutsch, U. and Klein, R Ephrin B phosphorylation and reverse signaling: regulation by Src kinases and PTP-BL Phosphatase, Mol Cell 9:725-737 (2002).
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作者：陈丹来源：中国科技网
今日视点
美国约翰·霍普金斯儿童中心、密西西比大学医学中心和麻省大学医学院的研究人员3月3日在第20届逆转录病毒和机会性感染大会上报告说，他们首次实现了对一名感染艾滋病病毒（HIV）婴儿的“功能性治愈”。这项成果将有助于为根治儿童艾滋病病毒感染铺平道路。
“功能性治愈”艾滋病婴儿
据物理学家组织网报道，这名婴儿的母亲是位艾滋病病毒感染者，在他出生30小时后，医生便对其实施了抗逆转录病毒联合治疗。一系列测试表明，婴儿血液中的病毒在逐步减少，在他出生29天之后，病毒降低到了无法检测的水平。治疗一直持续到该婴儿18个月大时停止。10个月后，多次对其进行标准的血液检测，均没有发现血液中存在艾滋病病毒。HIV特异性抗体这一标准的HIV感染临床指标的测试结果也始终为负。
研究人员说，这名婴儿现在被视为“功能性治愈”，也就是说，无需终身用药，其体内的HIV感染已被完全控制，且标准的临床测试无法检测到血液中的HIV复制。但“功能性治愈”患者体内仍有少量病毒，可通过超灵敏方法识别出来，而与之相对而言的“根本性治愈”，则是指患者体内病毒已完全清除。
研究人员认为，可能是由于及时采用了抗病毒治疗，制止了病毒宿主的形成，该婴儿才得以治愈。病毒宿主指的是一种休眠细胞，其在大多数艾滋病患者停止治疗后短短数周内会再度引发感染，极难对付。
及早治疗是关键目前，为防止高风险新生儿感染HIV病毒，通常会对其施以为时6周的预防性剂量的多种抗病毒药物联合治疗；而一旦确诊感染，则改用治疗性剂量。但研究人员说，此次的特殊病例可能会改变目前的做法，因为它凸显了在极早期采用抗逆转录病毒疗法的治疗潜力。
“立即对新生儿采取抗病毒疗法，防止病毒的藏身之地在第一时间形成，由此可以帮助婴儿清除病毒，实现（对感染的）长期控制，而无需终身接受治疗。”该报告的主要作者、约翰·霍普金斯儿童中心的病毒学家德博拉·佩尔绍德说。
专家表示，不需要治疗、具有天然抑制艾滋病病毒的能力是极为罕见的，只在不到0.5%的成人艾滋病毒感染者身上观察到，他们被称为“精英控制者”，其免疫系统能抑制病毒的复制，使病毒数量保持在临床检测不到的水平。HIV专家一直在寻求一种方法，希望将所有的艾滋病患者转化为“精英控制者”，而这项最新成果有望改变局面。
“大规模地完全根除病毒是我们的长期目标，但就目前而言，这仍是遥不可及的，而对高风险新生儿实施积极、及时、准确、有针对性的抗病毒疗法，可能是我们实现功能性治愈的最佳机会。”麻省大学医学院免疫学家凯瑟琳·卢苏里亚加说。
研究人员同时提醒，他们还缺乏足够的数据，尚不能建议改变目前的做法，用治疗性剂量取代预防性剂量对高风险新生儿实施治疗，不过，这名“功能性治愈”婴儿的例子为开展原理验证研究提供了理论基础。
佩尔绍德说：“下一步是要证实，这究竟是对极早期抗逆转录病毒治疗的一个极不寻常的反应，还是一种同样可适用于其他高风险新生儿的方法。”
抗体都是免疫球蛋白而免疫球蛋白不一定都是抗体。原因是抗体是由浆细胞产生，且能与相应抗原特异性结合发挥免疫功能的球蛋白。而免疫球蛋白是具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白，如骨髓瘤患者血清中异常增高的骨髓瘤蛋白，是由浆细胞瘤产生，其结构与抗体相似，但无免疫功能。因此，免疫球蛋白可看做是化学结构上的概念，抗体则是生物学功能上的概念。
按作用对象，可将其分为抗毒素、抗菌抗体、抗病毒抗体和亲细胞抗体（能与细胞结合的免疫球蛋白，如1型变态反应中的lgE反应素抗体，能吸附在靶细胞膜上）。
按理化性质和生物学功能
按理化性质和生物学功能，可将其分为IgM、IgG、IgA、IgE、IgD五类。
IgM抗体是免疫应答中首先分泌的抗体。它们在与抗原结合后启动补体的级联反应。它们还把入侵者相互连接起来，聚成一堆便于巨噬细胞的吞噬；
IgG抗体激活补体，中和多种毒素。IgG持续的时间长，是唯一能在母亲妊娠期穿过胎盘保护胎儿的抗体。他们还从乳腺分泌进入初乳，使新生儿得到保护；
IgA抗体进入身体的黏膜表面，包括呼吸、消化、生殖等管道的黏膜，中和感染因子。还可以通过母乳的初乳把这种抗体输送到新生儿的消化道黏膜中，是在母乳中含量最多，最为重要的一类抗体；
IgE抗体的尾部与嗜碱细胞、肥大细胞的细胞膜结合。当抗体与抗原结合后，嗜碱细胞与肥大细胞释放组织胺一类物质促进炎症的发展。这也是引发速发型过敏反应的抗体；
IgD抗体的作用还不太清楚。它们主要出现在成熟的B淋巴细胞表面上，可能与B细胞的分化有关。（IgD于1995年从人骨髓瘤蛋白中发现，分子量为175kD，主要由扁桃体、脾等处浆细胞产生，人血清中IgD浓度为3～40μg/ml,不到血清总Ig的1%，在个体发育中合成较晚。IgD铰链区很长，且对蛋白酶水解敏感，因此IgD半衰期很短，仅2.8天。血清中IgD确切的免疫功能尚不清楚。在B细胞分化到成熟B细胞阶段，除了表达SmIgD，抗原刺激后表现为免疫耐受。成熟B细胞活化后或者活化后或者变成记忆B细胞时，SmIgD逐渐消失。）
按可见反应
按与抗原结合后是否出现可见反应，可将其分为：在介质参与下出现可见结合反应的完全抗体，即通常所说的抗体，以及不出现可见反应，但能阻抑抗原与其相应的完全抗体结合的不完全抗体。
按抗体来源
按抗体的来源，可将其分为天然抗体和免疫抗体。
抗体就是免疫球蛋白，是改变了的球蛋白分子。由特异性抗原刺激产生，抗体的产生是由于抗原侵入人体后引起各种免疫细胞相互作用，使淋巴细胞中的B细胞分化增殖而形成浆细胞，浆细胞可产生分泌抗体。
按抗体发展
单克隆抗体的发展经历了四个阶段，分别为：鼠源性单克隆抗体、嵌合性单克隆抗体、人源化单克隆抗体和全人源单克隆抗体。
鼠源性单克隆抗体：鼠杂交瘤单克隆抗体主要是将来源于免疫接种过的小鼠的B 细胞与骨髓瘤细胞融合，继而筛选出既能无限增殖又能分泌抗体的鼠杂交融合细胞，进而进行筛选、抗体制备和抗体纯化。
嵌合性单克隆抗体：指用人的恒定区取代小鼠的恒定区，保留鼠单抗的可变区序列，形成一个人-鼠杂合的抗体。其研制程序快，可大幅度降低异源抗体的免疫原性，却几乎保持亲本鼠单抗全部的特异性和亲和力。另外，它还具有人抗体的效应功能，如补体固定、抗体依赖细胞介导的细胞毒作用（ADCC）等。
人源化单克隆抗体：利用现有的无数已详细分析过的小鼠抗体，取其与抗原直接接触的那段抗体片段（互补决定区，CDR）与人的抗体框架嫁接，经亲和力重塑，可维持其特异性和大部分的亲和力，同时几乎去除免疫原性和毒副作用。
全人源单克隆抗体：其抗体的可变区和恒定区都是人源的，去除免疫原性和毒副作用。全人源抗体制备的相关技术主要有：人杂交瘤技术、EBV 转化 B 淋巴细胞技术、噬菌体显示技术（phage display）、转基因小鼠抗体制备技术（transgenic mouse）和单个B细胞抗体制备技术等。
由人源化和全人源抗体制备的人源化和全人源抗体药物因其具有高亲和力、高特异性、毒副作用小的特点，克服了动物源抗体及嵌合抗体的各种缺点，已经成为了治疗性抗体药物发展的必然趋势。展开
在免疫检测中：由于缺少Fc段，Fab不能沉淀抗原，也不能被活体的免疫细胞所识别；但拥有小分子量和交叉反应小的优点，因此常用于放免中的功能研究，也用于阻断细胞、组织内源性的免疫球蛋白及在多重免疫标记中，一抗来源于同一种属时，阻断已经暴露的IgG抗原决定簇；在实际临床应用中：目前临床应用的全抗大多数是所谓人源化抗体，也就是使用的是人IgG的骨架，但是可变区插入的是小鼠的和抗原结合的片段。虽然人源化抗体避免了种属之间的反应，但是同种属之间反复或者长期使用，由于Fc片段的存在还是可能产生自身抗体，所以人们就使用木瓜酶消化IgG，得到Fab片段，理论上Fab片段保证了抗体和抗原结合的特性，但是避免了自身抗体的可能，因为没有Fc段，片段较小，免疫原性较小。但是由于分子量较小，因此在体内代谢很快，也就是作用时间短。如果是长期使用，也就增加了用药的次数。
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