ORDERINGINFORMATION
CatalogNo.:43022
Format:100ulat1.0mg/mlinPBS(withoutMg2+andCa2+),pH7.4,150mMNaCl,0.02%sodiumazideand50%glycerol.Affinity-purifiedonphosphopeptide;non-phosphopeptide-reactiveantibodieswereremovedbychromatographyonnon-phosphorylatedpeptide.
BACKGROUND
c-Junincombinationwithc-Fos,formstheAP-1earlyresponsetranscriptionfactor.ItwasfirstidentifiedastheFos-bindingproteinp39andonlylaterrediscoveredastheproductofthec-jungene.ItisactivatedthroughdoublephosphorylationbytheJNKpathwaybuthasalsoaphosphorylation-independentfunction
SPECIFICATIONSUMMARY
Antigen:Peptidesequencethatincludesphosphorylationsiteofthreonine93(T-T-T(p)-P-T)derivedfromhumanc-JunandconjugatedtoKLH.
Accessionno.:P05412,NP_002219.1
HostSpecies:Rabbit
Specificity:Thisantibodydetectsendogenoushuman,mouse,andratc-Junonlywhenphosphorylatedatthreonine93.
APPLICATION
Immunoblotting:useatdilutionof1:500-1:1,000.Abandof~43kDaisdetected.
Immunohistochemistry:useatdilutionof1:50-1:100.
Detectionofc-Jun(phospho-Thr93)inextractsofHeLacellsuntreatedortreatedwithPMA.
Detectionofc-Jun(phospho-Thr93)inparaffin-embeddedhumanbreastcarcinomatissue.
Thesearerecommendedworkingdilutions.Endusershoulddetermineoptimaldilutionsfortheirapplications.
DILUTIONINSTRUCTIONS
DiluteinPBSormediumthatisidenticaltothatusedintheassaysystem.
STORAGEANDSTABILITY
Thisantibodyisstableforatleastone(1)yearat-20oC.Canbestoredat4oCforshort-termuse.
Forinvitroinvestigationaluseonly.Notintendedfortherapeuticordiagnosticapplications.
ebiomall.com
>
>
>
>
>
>
>
>
>
>
>
>
英 ['aisəutaip]
美 ['aisəutaip]
n. 同形像；
同形像统计图
选用和特异性抗体同种亚型的，同样荧光素标记的抗体，采用同样的染色步骤染同样浓度的细胞。然后上机检测。如果细胞有非特异性的结合，那同型对照的荧光强度可能会比未染色的阴性对照要高一些。
同型对照只用于那种阳性和阴性之间没有明确分解的情况。如果阳性细胞群非常清楚，是不需要同型对照的。另外，在多色同染的情况下，也不采用同型对照，而是采用FMO（fluorensence minus one）对照。
另外，对于同型对照的使用，也有很多反对意见。就算是同型抗体，也可能会有不同的亲和力，并不一定就能真实反应非特异性的结合。
同型对照（阴性对照）管：A同型+B同型+C同型
单阳性对照
A检测管：A+B同型+C同型
B检测管：B+A同型+C同型
C检测管：C+A同型+B同型
不存在荧光重叠的两个抗体不需要调节补偿。
样本为PBMC，想用三色标记Treg细胞，分别为CD4-PECY，CD25-Fitc，Foxp3-PE，想知道如何设置荧光补偿，用的是BD的流式仪，1、是设置阴性管一个，单阳性管每种一个，样品管一个么？
荧光素强度依次为PE， PECY5 APC FITC, PE最强，FITC最弱。 所以，建议抗体组合为：
Foxp3-PE，CD4-FITC，CD25-PECy5.5或者CD25-APC。
同时购买三个相应的同型对照抗体。
样品管设置如下：
1. cell + FITC-isotype + Pecy5.5（ or APC）-isotype + PE-isotype
2. Cell + FITC-isotype + CD25-mAb + PE-isotype
3. Cell + PE-mAb + FITC-isotype + Pecy5.5（ or APC）-isotype
4. Cell + CD4-FITC + Foxp3-PE + CD25 -PECy5.5( or APC)。 [这一管的数据可以拿来分析用]。
在充分了解调整电压和补偿原理的基础上，也可以做一些简化。如果不太懂，就按照这个来。其中Foxp3的抗体和同型对照抗体都是在固定破膜以后再加，不是与CD4或者CD25同时加。
英 ['aɪsətaɪp]美 ['aɪsəˌtaɪp]
n. 同型动物（或植物），图形文字，象征性图像;同位型;同模;同号模式
其同型为;percp-cy5.5(25ug包装）浓度：0.2mg/ml,
那么如果CD45RA抗体如果加入20ul，那同型抗体应该加入多少ml:
我自己的初步计算是：1ul的3分之1.不知道我算对了吗？应该怎么加才好呢？
