Microtubles (MTs) are oriented with a fast growing plus-end and a slower growing minus-end. The MT plus-end is a crucial site for the regulation of MT dynamics and MT association with different cellular organelles by several groups of plus-end tracking proteins (+TIPs). The End-Binding (EB) family of +TIPs includes EB1 (MAPRE1), EB2 (MAPRE2, RP1), and EB3 (MAPRE3, EBF3). EB proteins are ubiquitiously expressed +TIPs that can dimerize through a coiled-coil C-terminal region, and bind MTs through an N-terminal calponin homology domain. EB proteins can stabilize MTs, increase MT dynamics, and suppress MT pauses. Site specific phosphorylation may regulate EB activity. EB3 Ser-162 phosphorylation destabilizes EB3 dimer and reduces MT growth, while aurora-kinase induced Ser-176 phosphorylation regulates EB3 stability during mitosis.
Human recombinant EB3 is a full length protein with an N-terminal His-tag (34 kDa). The protein is detected by rabbit polyclonal anti-EB3 (a.a. 171-182) (Cat.#EP5121) and rat monoclonal EB3 (Cat.#EM5101).
References
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*All molecular weights (MW) are confirmed by comparison to Bio-Rad Rainbow Markers and to western blotmobilities of known proteins with similar MW.
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KIT SUMMARY
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各位业内前辈，我们正在考虑引进符合GMP认证标准的CHO细胞系，用于表达可做疫苗生产的重组蛋白类。目前已有符合标准信息的是Thermofisher的CHO-S悬浮培养细胞资料，希望能再多了解一些和这株细胞类似的其他公司符合GMP标准的生产株细胞做个比较。谢谢指教！
2.准备旋转培养瓶，用于按比例扩增Sf9细胞，将合适大小的两孔盖连接在转瓶的一个 侧臂，另用一平盖接在另一侧臂。将一段短管（约6英寸或15 cm）装在通气孔中，末端连接一滤器，借助张力器用管索将管子与通气孔和滤器固牢。
3.将一段长管（30~60 cm）连接至进气孔，并在末端连接一滤器，用管索加固，另一段管子连接于滤器的另一端，用管索固牢。管子末端用铝箔封好。
4.将与两孔装置相对的侧壁上的盖子旋转90度以松开，高压灭菌培养瓶1 h。
5.将适应了无血清培养液的细胞接种于经高压灭菌的培养瓶中。将培养瓶装至半
基因敲除除可中止某一基因的表达外，还包括引入新基因及引入定点突变。既可以是用突变基因或其它基因敲除相应的正常基因，也可以用正常基因敲除相应的突变基因。 基因敲除是80年代后半期应用DNA同源重组原理发展起来的一门新技术。80年代初，胚胎干细胞（ES细胞）分离和体外培养的成功奠定了基因敲除的技术基础。1985年，首次证实的哺乳动物细胞中同源重组的存在奠定了基因敲除的理论基础。到1987年，Thompsson首次建立了完整的ES细胞基因敲除的小鼠模型。此后的几年中，基因敲除技术得到了进一步的发展和完善。
基因敲除的技术路线如下：
（1）构建重组基因载体﹔
（2）用电穿孔、显微注射等方法把重组DNA转入受体细胞核内﹔
（3）用选择培养基筛选已击中的细胞﹔
（4）将击中细胞转入胚胎使其生长成为转基因动物，对转基因动物进行形态观察及分子生物学检测。
基因敲除的靶细胞目前最常用的是小鼠ES细胞。基因敲除的技术路线虽不复杂，但由于高等真核细胞内外源DNA与靶细胞DNA序列自然发生同源重组的机率非常低，约为百万分之一，要把基因敲除成功的细胞筛选出来是一件非常困难的工作。因此，同源重组的筛选和检测就成了基因敲除技术所要解决的关键问题。目前已有多种筛
生物合成人胰岛素注射液，比如诺和灵R笔芯。是单一品种、不是混合的胰岛素。是不含鱼精蛋白的短效胰岛素。
最近留意了几个消息，发现生产线一家比一家大，结合最近国家在搞药品上市许可持有人制度试点，五年以后这行业竞争会有多激烈，产能会不会过剩的。
百迈博生产线6000升（3000*2）
东耀生产线10000升（2000*5）
三生制药生产线30000升（5000*6）
信达生物生产线>15000升
百泰生物生产线4000升
药明康德生产线2000升（不知现在规模有没有扩大）
还有很多低调的公司可能规模更大……
将来在国内，按照现有的产量结合所有生产线的总和生产出来的重组蛋白会不会以白菜价进入市场的，
