ProductDescription:
TRAIL/Apo2Lisacytotoxicprotein,whichactivatesrapidapoptosisintumorcells,butnotinnormalcells.TRAIL-inducedapoptosisisachievedthroughbindingtotwodeath-signalingreceptors,DR4andDR5.ThesereceptorsbelongtotheTNFRsuperfamilyoftransmembraneproteins,andcontainacytoplasmic“deathdomain”,whichactivatesthecell’sapoptoticmachinery.ThefulllengthhumanTRAIL/Apo2Lisa281aminoacidprotein,consistingofa17aminoacidcytoplasmicdomain,a21aminoacidtransmembranedomain,anda243aminoacidextracellulardomain.RecombinantHumansolubleTRAIL/Apo2Lisa168aminoacidpolypeptide(19.6kDa),consistingoftheTNF-homologousportionoftheextracellulardomainofthefulllengthTRAIL/Apo2Lprotein.
TechnicalSpecifications:
- Species:Human
- Expression:E.coliCellExpressed
- Activity:
- Assay1:Typically1-3ng/mLED50
- Typically0.8-2.0ng/mLED50
- Purity:≥98%
- Endotoxin:<1.0EU/μg
- MolecularMass:19.6kDa
- Formulation:1xPBS
- CountryofOrigin:USA
PurityConfirmation:
ThiswasdeterminedbySDS-PAGEgelandHPLCanalysis.
ActivityAssay:
Assay#1:DeterminedbyitsABIlitytoinduceapoptoticcelldeathinTRAIL-sensitiveU343MGcells.
Assay#2:MeasuredbyitsabilitytoinduceapoptosisinLN-18cells(humanglioblastomacells).
AASequence:
| MRERGPQRVA | AHITGTRGRS | NTLSSPNSKN |
| EKALGRKINS | WESSRSGHSF | LSNLHLRNGE |
| LVIHEKGFYY | IYSQTYFRFQ | EEIKENTKND |
| KQMVQYIYKY | TSYPDPILLM | KSARNSCWSK |
| DAEYGLYSIY | QGGIFELKEN | DRIFVSVTNE |
| HLIDMDHEAS | FFGAFLVG |
ReconstitutionBuffer:
Centrifugethevialpriortoopening.Reconstituteinwatertoaconcentrationof0.5-1.0mg/ml.Donotvortex.
Storage:
Forextendedstorage,itisrecommendedtofurtherdiluteinabuffercontainingacarrierprotein(example0.1%HSA)andstoreinworkingaliquotsat-20°Cto-80°C.
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你可以试着读一下看看。
提供亲和纯化相关资料：http://wenku.baidu.com/view/ef8f3831f8c75fbfc67db276
如有帮助，请采纳，谢谢~
▷ 重组蛋白生产平台
▪ HEK293细胞瞬转
▪ CHO细胞
▪ 昆虫细胞/杆状病毒
▪ 酵母细胞
▪ 大肠杆菌发酵
大家好，想请教大家一个关于HPLC方法学的问题。
目前我们做的一个蛋白药，没有标准品，液相建立一个方法只想用于纯度鉴定，不去定量，这个方法所得到的图谱就一个主蛋白峰，面积归一化法相当于100%，现在就这个方法的方法学验证提出下面几点疑问：
1.因为我只做纯度鉴定，这个方法的方法学应该做系统适用性、专属性、检测限、耐用性和精密度这些，还是按照定量的全套加上定量限、线性、范围、准确度这些？
2.纯度鉴定中，我觉得应该对杂质进行定量，但是我们的这个方法只有一个主蛋白峰，几乎没有杂质峰，这样的话这个方法学我应该以什么为标准证明纯度呢？需将样品进行适当的氧化、酸、碱破坏吗？然后证明破坏后主峰能和产生的杂质分开？
3.对应生物蛋白药的杂质，应该属于无法获得的，如果通过强破坏，这个杂质也是不好鉴定的，是不是我只需要知道主峰能和强破坏的降解物分开，就可以说方法建立成功？还是生物药没有必要做这个强破坏，简单的走一下系统适用性、专属性、检测限、耐用性和精密度这样的流程就行？
说的有点乱，主要是自己对这个生物药的HPLC纯度鉴定的方法学，实在是疑惑重重，希望有经验的大侠能帮忙解答下。非常感谢！
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