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dianova/PurKine Endotoxin Removal Kit (polymyxin B) (alle), RUO (5 x 1 ml)/1 Kit/KTP21400-1
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dianova/PurKine Endotoxin Removal Kit (polymyxin B) (alle), RUO (5 x 1 ml)/1 Kit/KTP21400-1
品牌 / 
dianova
货号 / 
KTP21400-1
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  • Übersicht
    ArtikelnummerKTP21400-1
    Artikelgruppe

    Protein- und Antikörper-Aufreinigungskits

    Artikelbezeichnung

    PurKine Endotoxin Removal Kit (polymyxin B)

    Spezies-Reaktivität

    alle

    Beschreibung

    wirksam zur Reduktion von Endotoxinspiegeln in Proben von Antikörpern und anderen Proteinen

    Inhalt

    Äquilibrierungspuffer (10X), Polymyxin-B-Säule mit PurKine Endotoxinentfernung, Regenerierungspuffer (10X)

    Zweckbestimmung

    nur für Forschungszwecke

    Temperatur - Lagerung

    2-8°C, nicht einfrieren

    Temperatur - Transport

    gekühlt

    Packungsgröße

    5 x 1 ml

    Hersteller / Marke

    Abbkine Scientific

  • Datenblätter
    • KTP21400-1 – Datenblatt
  • Weitere Produktinformationen
    PurKine™ Endotoxin Removal Resin is effective for reducing endotoxin levels in protein samples. Endotoxins, also known as lipopolysaccharides or LPS, are cell membrane components of Gram-negative bacteria (e.g. E. coli). Endotoxins strongly influence transfection of DNA into primary cells and sensitive cultured cells, and increased endotoxin levels lead to sharply reduced transfection efficiencies. The Resin consists of 90?m beads of cross-linked 4% agarose, to which modified polymyxin B has been coupled. The portfolio allow optimization of process for maximum protein yield, stability and solubility. Tests also confirm that no decrease in performance occurs after at least five repeated uses. The PurKine™ Endotoxin Removal Resin is also available as prepacked spin column and kit formats.

    PurKine™ Endotoxin Removal Resin has been designed to reduce endotoxin levels in protein samples by ?99% while maximizing protein recovery. The Resin consists of 90?m beads of cross-linked 4% agarose, to which modified polymyxin B (PMB) has been coupled. Tests confirm that performance equals or exceeds popular polymyxin B (PMB) resins from other suppliers, and no decrease in performance occurs after at least five repeated uses.

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    货号:EH0024 查看更多>
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    一、试剂准备1、新鲜配制冷的 RIPA 裂解缓冲液: 150 mM NaCL 1% NP-40 (去垢剂) 0.1% SDS (去垢剂) 2ug/ml Aprotinin (蛋白酶抑制剂) (使用前加入) 2ug/ml Leupeptin (蛋白酶抑制剂) (使用前加入)1 mM PMSF (蛋白酶抑制 查看更多>
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    Home-made Taq Polymerase PurificationI also have the bacteria containing the clone. It appears to produce lots of Taq and is quite stable.The proceedure takes 查看更多>
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    细胞总蛋白提取方法123
    coollanlan2021-08-04
    最近将长满的100毫升的细胞培养瓶的细胞进行总蛋白的提取,每次只加了100微升的三去污溶液,最后测的溶度还是比较低,5微升里最多只有十几微克的总蛋白。不知道大家的经验是什么?如何提高细胞总蛋白的浓度?
    我是提细胞总蛋白的,6cmdish,我现在是用250ul裂解液的量,可是测出来的蛋白浓度比较低(1ug/ul),提细胞前在显微镜下看了细胞长满了,是不是我的裂解液量加的太多了,应该加多少量比较适合?请教。
    我想问一下我提出大鼠脑线粒体后提线粒体蛋白的方法:用常规细胞裂解液【7mmol/L尿素(urea)、2mmol/L硫脲(thiourea)、4%CHAPS、10mmol/L硫苏糖醇(DTT)、pharmalyte(载体两性电介质就是IPG的buffer)pH3-10(1:50稀释)】60-100ul,吹打并振荡使蛋白尽量溶解。12000g离心10min。收集上清即为蛋白质提取物。

    这样可不可以?

    另还有几个问题:1、这样的裂解液裂解线粒体提蛋白可不可以
    2、裂解液加多少剂量
    3、12000g离心10min和30分钟有没有区别
    用SDS裂解,RNA酶降解,在过柱,后洗脱
    一、细胞裂解的准备
    (1)1×107细胞重悬,其来源可为新鲜样品或贮存于-80℃1mol冰冻清洗缓冲液
    的无DMSO的样品,冰冻缓冲液包括10mMHEPES(pH7.5),1.5mMMgCl2,10mMKCl,
    1mM二硫苏糖醇(DTT),然后离心(16000rpm、4℃、1min)。
    (2)重悬细胞团于100ul冰冻裂解缓冲液,其包含10mMTris-HCl(pH7.5),1mMMgCl2,1mMEGTA,0.1mM苯甲基磺酰氟(DMSF),5mMB2巯基乙醇,0.5%CHAPs(Pierce)和10%甘油。
    (3)冰育30分,然后在超速离心机中离心30分钟。
    (4)去上清,液氮速冻沉淀,裂解细胞于-80℃保存。
    二、扩增
    (1)在微量管中冻干0.1ug荧光标记的cx反转引物,蜡封(5′CCCTTACCCTTACCC
    TTACCCTTA3′)。
    (2)于蜡界之上加50ulTRAP反应物,包括Tris-Cl(pH8.3)20mM,1.5mMMgCl2,
    63mMKCl,0.005%,TWeen20,1mMEGTA,50mM三磷酸脱氧核苷,0.1ug荧光标记
    TS前导引物(5′AATCCGTCGAGCAGAGTT3′),1ugT4基因32蛋白,牛血清白蛋白0.1mg/ml,2UTaqNDA聚合酶(Takara,shyzou)和5ugCHAPs细胞提取液。荧光标记TS引物可由市场购得。扩增前5ug提取物与1ugRNA酶37℃水浴20分钟,为了端粒酶活性的标准化,运用体内端粒酶活性标准(TTAS):TS重叠引物和CX重叠引物(TS:5′AATCCGTCGAGCAGAGTTGTGAATGAGGCCTTC3′及CX:5′CCCTTACCCTTACCCTTACCCTTATAGGCGCTCAATGTA3′)TS(18bp)和CX(24bp)序列为普通型,下划线标出的为成肌素序列(每个15bp)。成肌素CDNA通过这些引物扩
    增产生了150bp的产物,它可用与ITAS扩增端粒酶梯度相同的TS引物和CX引物进行
    再扩增。每一项测定用25attogram以显现I-TAS,它并不干扰TRAP测量。
    (3)置于22℃10分钟,作为TS引物由端粒酶介导的延伸。90℃热灭活反应物90秒。
    (4)PCR扩增,条件94℃30S,50℃30S,72℃1.5min;共27循环。
    三、分析
    (1)制备8%的变性胶(longRanger,ATBiochem)含6M尿素。
    (2)加电泳缓冲液(1×TBE)于电泳槽。
    (3)上样缓冲液与产物各1ul混合后上样,上样缓冲液含90%甲酰胺和10%蓝葡聚
    糖(Bluedertian)。
    (4)95℃预发性4分钟,速冷,上样,运用100bp,150bp,200bp大小荧光标记物。
    (5)测序
    (6)测序结果由FiagmuntManager程序自动分析,每一荧光峰根据大小、高度、面积定
    量。因为过量扩增的产物会产生不可信的面积值,一部分PCR产物应在蒸馏水稀释后再分析
    ripa裂解液对核蛋白的提取好点。加到细胞培养皿里面,摇15分钟,然后刮下来吸出来,是做western的话加Loading buffer 再95°煮10分钟。
      裂解液裂解是一种比较温和的红细胞去除方法,主要用于经酶消化分散的组织细胞的分离纯化,淋巴细胞的分离纯化以及组织细胞蛋白与核酸提取等实验中红细胞的去除。经红细胞裂解液裂解得到的组织细胞中不含红细胞,可进一步用于原代培养、细胞融合、流式细胞分析、核酸与蛋白的分离和提取等。
    请教各位高手一下,我收集细胞后,因为不能马上做实验,就把细胞加了Trizol保存在-80度,我想请教一下,是先在室温放5分钟后再冻存还是直接放置于-80度,用时再取出,放置室温5分钟(说明书上说加了Trizol后一定要置于室温5分钟).很菜的问题,请各位不要见笑.谢谢!
    如果要培养,用淋巴细胞分离液。如果只是用于检测,用红细胞裂解液
    提取DNA时裂解液的配制方法应该是怎样的
    用SDS裂解,RNA酶降解,
    在过柱,后洗脱
    各位大虾,我想请教下,本人试验作香烟烟雾提取物(CSE)对细胞色素C氧化酶(COX)活性的影响,采用ECV304,拟将细胞破碎后用碧云天的BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度,用GENMED细胞/组织悬液细胞色素C氧化酶活性测定试剂盒测定COX活性,但是我不知该选用和种方法裂解细胞,请各位多多指导,小妹万分感谢,
    不知单纯使用冰浴中超声裂解够了吗?还是说要选用裂解液呢?最主要的就是我不知道该怎么赔这个裂解液,使其COX活性不产生影响
    一、细胞凋亡检测系统和试剂
    Caspase-GloTM3/7检测
    Apo-ONETM均质Caspase-3/7检测
    CaspACETMFITC-VAD-FMK原位标准物
    CaspACETM检测系统,比色法
    CaspACETM检测系统,荧光法
    末端脱氧核苷酸转移酶
    DeadEndTM比色法TUNEL系统
    DeadEndTM荧光法TUNEL系统
    DeathCheckTM检测系统
    Caspase抑制物Z-VAD-FMK
    Caspase抑制物Ac-DEVD-CHO

    二、与细胞凋亡有关的抗体
    抗pS473Akt抗体
    抗ACTIVE®Caspase-3抗体
    抗细胞色素C单克隆抗体
    抗PARPp85片段抗体
    品牌分类