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Bangs/Protein A Coated Microspheres/1mL/CP02001
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Bangs/Protein A Coated Microspheres/1mL/CP02001
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bangslabs
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CPOrderCP02001CP02N145354.950.39Protein A Coated MicrospheresII Std11.1SDS CG152A

BangsLaboratories位于美国印地安那州,成立于1988年,专业生产生命科学研究用的各种微球达2000种以上,用于流式细胞分析,生物大分子的分离与检测,激光共聚焦,生物影像等。BangsLaboratories于2000年收购了成立于1984年的流式标准品公司,该公司掌握了许多标准品和校正品的专利。Bangs产品通过与流式细胞仪及试剂厂家的OEM合作,进入世界各地实验室。BangsLaboratories的流式分部前称为流式标准品公司,成立于1984年。目前为止,公司自己研发了许多标准品和校正品,并获得美国和其他国家的专利保护。公司的荧光标准品可帮助科研和临床工作人员在实验时更容易更准确地评估数据。公司提供下列领域的质控可定量标准品:流式、荧光显微镜、屏象分析(imageanalysis)以及其它荧光分析。


Bangslabs(BangsLaboratories,Inc.)是高品质特种微球供应商,其产品广泛用于诊断试剂、免疫分析、分子及细胞生物学、流式检测应用等,产品种类已达2000余种,并且逐年递增,完善的技术支持体系为客户提供全方位的项目服务。    热销产品有羧基荧光微球、铕螯合微球、分离磁珠、标准微球、CD抗原标记微球等,适用于时间分辨荧光检测、免疫层析或比浊、细胞及遗传物质分离纯化等科研及工业应用。


BangsLaboratories公司位于美国印地安那州,成立于1988年4月。专业提供生命科学研究用的各种微球。其种类齐全(2000种以上),可用于流式细胞仪检测,细胞与生物大分子的分离与检测,电镜、共聚焦成像仪、荧光显微镜与相差显微镜的观察等。微球除聚苯乙烯外,还有聚甲基丙烯酸酯,聚乙烯甲苯和硅等多种材料,部分提供羧基或氨基修饰,直径大小从20nm-200um不等,均一性高,有很好的热稳定性。公司可提供个性化服务,根据你需要的颜色染色。BangsLaboratories的流式分部前称为流式标准品公司,成立于1984年。目前为止,公司自己研发了许多标准品和校正品,并获得美国和其他国家的专利保护。Bangs作为流式定量领域的领导者,产品已进入世界各地。公司的荧光标准品可帮助科研和临床工作人员在实验时更容易更准确地评估数据。公司提供下列领域的质控可定量标准品:流式、荧光显微镜、屏象分析(imageanalysis)以及其它荧光分析。QuantumTMplex在流式细胞仪的基础上,实现多样品检测或多指标检测,用于细胞因子检测、病毒筛选、自免疫分析、抗体检测、药物、血型、分子诊断以及基因组分析等。使用本试剂盒可在流式细胞仪上对一个样品同时检测20个不同指标(如不同细胞因子或不同抗原)。QuantumPlex?SP微球同样是研究者理想的选择,由于它是以QuantumPlexmultiplex试剂盒内的StarfireRed染料染色,研究者可以在花费不多的情况下处理表面偶联物。QuantumTMMESFKits用于流式细胞仪的标准曲线制作与仪器校正,与QuantumTMplex配套。试剂盒中的每种微球均对应溶液中一定量的荧光分子,用于流式细胞仪的荧光强度校正。试剂盒内除了荧光标准品外,还有一个未染色的微球population以测定荧光阈值或设备的噪音水平。盒内提供QuickCal数据光盘。QuantumTMSimplyCellular®kit本试剂盒是BangsLabs最复杂产品之一,用于流式实验室可直接而简单地定量检测细胞的抗体结合能力和细胞表面的抗原表达。盒内有五种微球,一个为未标记的空白对照,其余四个与不同量人IgGI和IgGII抗体的Fc区特异性抗体偶联,分别具有不同的与小鼠IgG单抗结合的能力。QC3TMkit&QC3Windows®kitQC3kit用于监控与校正仪器的设置及性能,使不同实验室间流式细胞仪的检测结果具有可比性,避免因为污染或pH改变造成的偏差;QC3Windows?kit含有3种不同荧光的QC3微球与一种空白微球。QuickCalTMv.2.1用于BangsLabs公司所有Quantum产品的检测结果的分析。该软件适用于所有的流式细胞仪软件可根据MESF微球的荧光强度等建立标准曲线。该软件还可保存仪器设置,使仪器的性能得到长期有效保证。ProActiveTMProtein-activatedorProtein-CoatedMicrospheres采用独有的包被技术偶联生物素、DNA、HRP/AP以及抗体等,确保包被微球更稳定、包被效果更好。用于免疫学和分子生物学检测 Superparamagnetic磁珠Superparamagnetic磁珠表面可高效共价交联蛋白质或DNA等,被广泛应用于诊断与其它生命科学研究。COMPEL?磁珠适用于各种生物学检测与分离,有3、6和8um等几种直径,磁珠受强磁性吸引,使其与溶液的分离极为方便,同时残余磁性极低,是生命科学研究的理想选择。磁珠分离器MagneticSeparatorsBangsLaboratories公司1.5mL磁珠分离器用于各种不同的磁珠分离实验中,包括细胞分选、mRNA与DNA分离与其它生物大分子的纯化等。使用时,只要将装有磁珠的离心管放入分离器中,仪器就能产生高能磁场使磁珠得以与溶液分离开,从而实现磁珠的分离。此外,BangsLaboratories公司提供各种微球标准,如不同直径、不同荧光的荧光强度;硅微球UniformSilicaMicrospheres除各种分子生物学与免疫学检测用途外,还可用于毛细管电色谱分析(capillaryelectrochromatography,CEC)

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裂解方法包括化学裂解、酶裂解和机械裂解.化学裂解和酶裂解通常是比较温和的方法,通常会很少使DNA 断裂.这两种方法(包括SDS 和溶菌酶处理等)提取纯化DNA中常用的方法.机械裂解可以更均一的裂解细胞,同化学裂解相比,机械处理具有更高的裂解效率和更低的选择性.机械处理可以更剧烈和全面的裂解细胞,但也会造成DNA 的断裂.
一、机械裂解法主要有以下两中:
1.热休克(Thermal shock),既反复冻溶法,是一种常用的机械裂解方式比,通常由冷冻和解冻两部分组成(freezing and thawing),.原理:由于细胞内冰粒形成和剩余细胞液的盐浓度增高引起溶胀,使细胞结构破碎.冷冻通常在液氮或-20°C冰上进行,解冻可以在37、50、65 或100℃水浴中进热休克比化学裂解温和,但是很有效,有资料表明用热休克和溶菌酶与SDS的方法获得了90%的细胞裂解率.
2.超声波处理(Ultrasonication)既利用超声加热的方法,把细胞破碎.但这种处理会导致DNA 的断裂,所以加热不宜过剧烈,要设定好超声时间和间隙时间,一般超声时间不超过5秒,间隙时间最好大于超声时间,这些都有利于保护酶的活性.bead-beating 也是常用的机械处理方式,有报道指出bead-beating 比热休克和化学裂解的细胞裂解效果更好 虽然DNA产量较高,但通常得到的DNA片段较小.
二、 化学裂解和酶裂解法(在提核酸时联合使用)
主要是裂解液处理法,细胞裂解液的主要目的有以下几种:(1)利用去污剂破坏脂质双分子层,破裂细胞;(2)溶解蛋白;(3)蛋白变性使其稳定;(4)抑制蛋白酶活性.
主要根据不同的目的,裂解液的组成有所不同,主要有提取核酸和蛋白两中.在提取RNA或DNA时,我们主要是要充分裂解细胞,得到更多的核酸;如果我们的目的是蛋白,那要根据蛋白的位置、特性等因素考虑裂解液,在提取蛋白后,再根据实验需要复性蛋白等.以下是细胞裂解中常用试剂和其作用:
50 mM Tris-HCl pH 7.4(缓冲体系),150 mM NaCl(等渗体系),1 mM PMSF (强大的蛋白酶抑制剂),1 mM EDTA(变性剂和稳定剂),5 μg/ml Aprotinin(蛋白酶抑制剂),5 μg/ml Leupeptin(蛋白酶抑制剂),1% Triton x-100(破坏细胞),1% Sodium deoxycholate(中度变性剂和蛋白溶解剂),0.1% SDS(强变性剂和蛋白溶解剂).7M 尿素,2M硫脲(可以提高膜蛋白的融解),蛋白酶K等.
干细胞是重要细胞,其能够自我更新或者分化成多种类型的细胞,这种能力由细胞信号传导和转录调控所控制,因此转录调控在细胞识别和功能实现过程中起决定作用。干细胞逐步成熟成为终末分化细胞,需要由重要的转录因子适时的激活级联转录程序,多种转录因子和靶基因广泛报告与干细胞的自我更新和多能性有关,包括EGR1、OCT4、FOXD3、FOXO、Nanog、SOX2、SOX18、ETS、GLI、KLF4、MEF2、Myc、RNUX1、Pax6、TCF/LEF和GATA。分析这些TF的活性可以为干细胞的研究和应用提供有价值的线索。美国Signosis公司开发一种干细胞转录因子活性多重检测阵列试剂,以同时分析哺乳动物样本中16种干细胞特异的TF,该方法可以用1000—10000个细胞的全细胞裂解物进行。
A.优点:
多重分析——一次分析可以检测16种干细胞相关的TF
定量比较——二个样本的差异可以定量分析和比较
步骤简单——探针温育、柱分离、板杂交和HRP检测
无需贵重仪器——无需如Luminex那样的贵重仪器
B.原理:
干细胞转录因子活性多重检测阵列试剂用于同时检测多种TF活性。该技术中,基于TFDNA结合位点的一致性序列,制备一系列生物素标记的探针。当探针混合物与核提取物一起温育时,每个探针寻找相应的TF,形成TF/探针复合物,通过柱离心纯化可以很容易与游离探针分开。结合的探针从混合物中分离出来,通过板杂交分析。板孔中预包被上与探针互补的特异序列,捕获的DNA探针进一步用链酶亲和素-HRP检测,化学发光检测仪测定发光强度(RLUs)。
细胞总蛋白提取方法123
coollanlan2021-08-04
最近将长满的100毫升的细胞培养瓶的细胞进行总蛋白的提取,每次只加了100微升的三去污溶液,最后测的溶度还是比较低,5微升里最多只有十几微克的总蛋白。不知道大家的经验是什么?如何提高细胞总蛋白的浓度?
我想问一下我提出大鼠脑线粒体后提线粒体蛋白的方法:用常规细胞裂解液【7mmol/L尿素(urea)、2mmol/L硫脲(thiourea)、4%CHAPS、10mmol/L硫苏糖醇(DTT)、pharmalyte(载体两性电介质就是IPG的buffer)pH3-10(1:50稀释)】60-100ul,吹打并振荡使蛋白尽量溶解。12000g离心10min。收集上清即为蛋白质提取物。

这样可不可以?

另还有几个问题:1、这样的裂解液裂解线粒体提蛋白可不可以
2、裂解液加多少剂量
3、12000g离心10min和30分钟有没有区别
细胞癌变后,细胞膜表面的糖蛋白会减少。甲胎蛋白是一种,糖蛋白。这种长蛋白主要来自于胎儿的干细胞,常人体内极少,而且甲胎蛋白一般是用来检测肝癌的。 当肝细胞发生癌变时,恢复了产生这种蛋白质的功能,而且随着病情恶化它在血清中的含量会急剧增加,甲胎蛋白就成了诊断原发性肝癌的一个特异性临床指标,所以要如果说细胞癌变后,产生甲胎蛋白并不是非常的严谨。因为它只是作为肝癌的一个指标罢了。而抗原的表示范围比较大。所以这里是使用的抗原而不是甲胎蛋白。
磷酸酶活性测定123
greenfish19742021-08-02
我是新手,请问如何检测的活性。请各位大侠指导,谢了
我的邮箱:maoyuanqing@citiz.net
裂解细胞用的溶液;适合目的蛋白的溶液,例如PBS,tris盐溶液
各位大虾,我想请教下,本人试验作香烟烟雾提取物(CSE)对细胞色素C氧化酶(COX)活性的影响,采用ECV304,拟将细胞破碎后用碧云天的BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度,用GENMED细胞/组织悬液细胞色素C氧化酶活性测定试剂盒测定COX活性,但是我不知该选用和种方法裂解细胞,请各位多多指导,小妹万分感谢,
不知单纯使用冰浴中超声裂解够了吗?还是说要选用裂解液呢?最主要的就是我不知道该怎么赔这个裂解液,使其COX活性不产生影响
可以用温和的红细胞裂解液,和外周血一样,裂解液不会对单个核细胞有影响,HY StemCell是一家为干细胞研究服务的知名公司,有各种生化试剂供客户选择,可以查询各大品牌红细胞裂解液,供参考
从细胞中提取RNA的方法123
陌语哲俀2021-07-22
操作步骤:
样品处理:
a. 植物组织:取新鲜或-70℃冻存100mg组织在液氮中研磨,把粉末加入到1ml裂解液中混匀。
b. 动物组织:取新鲜或-70℃冻存100mg组织加1ml裂解液,用组织研磨杵或匀浆器匀浆处理。
c. 贴壁细胞:直接在培养板中加入裂解液裂解细胞,每106细胞加1ml 裂解液。用取样器吹打混匀。
d. 细胞悬液:离心收集细胞。每106动物、植物和酵母细胞或每107细菌细胞加1ml裂解液混匀。
e. 血液处理:取0.2-1ml新鲜血液加3倍体积红细胞裂解液,混匀后室温放置10分钟,10000rpm离心1分钟。弃上清,若沉淀含有红细胞,可加入2倍体积红细胞裂解液重复裂解步骤。离心后沉淀加入1 ml裂解液混匀。
将处理后的样品在室温放置5分钟,使得核酸蛋白复合物完全分离。
向匀浆样品中加0.2ml氯仿,盖好管盖,剧烈振荡15秒,室温放置3-5分钟。
2-8℃ 12000 rpm离心10分钟。RNA主要在上层无色的水相中,把水相转移到新管中,不要吸到沉淀。
吸附柱前处理:在吸附柱中加入500ul 洗柱液,室温放置2分钟,2-8℃ 12,000 rpm离心2min,弃废液。6. 第4步收集的上清中加入200ul无水乙醇混匀,加入吸附柱静置2分钟,2-8℃ 12000rpm离心2min,弃废液。7. 向吸附柱中加入600ul漂洗液(使用前请先检查是否已加入无水乙醇),2-8℃ 12,000 rpm离心2min,弃废液。8. 向吸附柱中加入600ul漂洗液,2-8℃ 12,000 rpm离心2min,弃废液。9. 12000rpm离心2min,弃掉收集管,将吸附柱置于室温放置数分钟将吸附柱中残余的漂洗液去除。10. 将吸附柱放入新管中,向膜中央滴加50-100ul RNase free ddH2O,室温放置5min,12000rpm室温离心2min即得到RNA。

注意事项:
所有相关器皿耗材都应为RNase-free产品,操作过程要小心,带口罩、手套避免环境中RNA酶污染样品。
RNA在水溶液中OD值可能在1.5-1.9之间,但这并不表示RNA不纯,需电泳检测。
蛋白在细胞内,需要把细胞裂解才能提出
聚腺苷酸二磷酸核糖转移酶-1[poly(ADP-ribose)polymerase-1,PARP-1]是存在于真核细胞中催化聚ADP核糖化的细胞核酶,其参与的聚ADP核糖化是真核细胞中蛋白质翻译后的重要修饰方式之一。PARP-1在DNA修复和细胞凋亡中发挥至关重要的作用。在凋亡过程中,PARP-1由116kDa被切割成85kDa,催化NAD-依赖的多聚(ADP-核糖)(PAR)往各自质膜以及核蛋白上的聚合。总而言之,PARP在DNA损伤修复与细胞凋亡中发挥着重要作用。
**捷向您推荐美国Trevigen的一款通用PARP分析试剂盒检测试剂盒。该试剂盒是检测凋亡前与凋亡中细胞提取液中PARP活性的理想方案,操作简单,重复性高。其通过检测96孔板上生物素标记的多聚ADP核糖聚合到邻近组蛋白的反应,从而确定已知的或可能的PARP抑制剂。试剂盒中的依托泊苷(Etoposide)是拓扑异构酶Ⅱ抑制剂,在拓扑异构酶Ⅱ切割完DNA后能够稳定该酶。在试剂盒中,依托泊苷作为凋亡诱导的对照参与检测。
通量PARP/凋亡分析试剂盒可广泛应用于1)检测原代、肿瘤等细胞的PARP活性;2)检测凋亡前后的PARP活性;3)利用细胞裂解液筛选PARP抑制剂。
试剂盒特色比色法/化学发光法,无放射性输出。96well,高通量检测。极大地节省了分析时间,提高了使用效率。高敏感性。能够检测到500个细胞中低至0.1mU的PARP。检测范围广。0.1-10mU。样本用量少。仅仅需要10-100ng的提取物。检测时间短。仅需要3h即可完成检测。

**捷向您提供一站式的PARP相关实验解决方案,除了高通量PARP/凋亡分析试剂盒,还有PARP体内药理动力学二代分析试剂盒(PDAII)和通用PAPR分析试剂盒外(含组蛋白包被可拆卸板),以及相关抗体重组蛋白
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