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WPI/Electrode Holder for KWIK-Tips/normal/KWIK-2
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WPI/Electrode Holder for KWIK-Tips/normal/KWIK-2
品牌 / 
wpiinc
货号 / 
KWIK-2
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Overview
  • Use with KWIK-TIP Ion Selective Electrodes
  • TIPA-Calcium
  • TIPH-Hydrogen
  • TIPK-Potassium
  • TIPTPP-TPP+
Specifications
 Electrode Color Code Filling Solution Nim. Slope/Decade Concentration Range Selectivity Coeffiecients (-log)
TIPCACalciumGreen0.1M CaCl228mV0.1 - 10-6.75MNa+ 5.5, K+ 5.4, Mg++ 4.9
TIPHHydrogenOrange1M Citric acid, 0.01M NaCl, pH 5.654mVpH 5.0-12Na+ 10.4, K+ 9.8, Ca++ 11.1
TIPKPotassiumYellow0.1M KCl54mV0.1 - 10-4.5MNa+ 4.0, Ca++ 3.9, Mg++3.0
TIPTPPTPP+Purple10mM TPP+54mV0.001 - 10-4MK+ 6.0
Accessories
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  1. Dri-Ref Reference Electrode, Short
    Dri-Ref Reference Electrode, Short
    DRIREF-2SH
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  2. Micro Dri-Ref Reference Electrode
    Micro Dri-Ref Reference Electrode
    DRIREF-450
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  3. Dri-Ref Reference Electrode, 4.7 mm
    Dri-Ref Reference Electrode, 4.7 mm
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  4. Dri-Ref Reference Electrode, 4.7 mm (short)
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  6. Flexible Dri-Ref Reference Electrode
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  7. Super Dri-Ref Reference Electrode
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  8. Calcium Electrode Tips, Replacement
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  9. Hydrogen Electrode Tip, Replacement
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  10. Dri-Ref Reference Electrode, 2 mm
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  11. TPP Electrode Tips, Replacement
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“2017(第五届)分子诊断产业高峰论坛”将于2017年6月19日-20日在杭州三立开元大酒店召开。2016年,国家精准医疗计划和个体化医学的发展要求持续推动了国内分子诊断技术的进步,进一步开拓新兴技术在临床的应用。液态活检作为精准医疗新技术,既有极高的科研价值,又具备助力推进精准医疗临床实践的巨大潜能,可用于癌症早期筛查、诊断、监控、治疗方案指导和疗效评估及产前诊断、器官移植诊断等领域。伴随诊断应用的发展,液态... 查看更多>
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各位大侠好!我最近在做滚环扩增的时候遇到问题了,来和大家讨论一下,希望各路高手不吝赐教!
我做的是用锁式探针来检测dna模板的ram,探针80base,其中杂交区40base,引物分别为16、18base,连接酶选取的T4 ligase和Taq DNA ligase两种,分别对应恒温和变温情况下的扩增。水解体系为EXO I和Exo Ⅲ的混合体系,参考的外文文献,应该没什么问题。聚合酶用的是Bst DNA大片段聚合酶。
一开始选择的探针浓度为200pmol/L,扩增效果挺好,当时用的DNA模板是质粒阳性标准品,但是后来在做敏感性的时候发现条带梯度差异几乎没有,而且阴性也出带,后来就没法做敏感性和特异性验证了,实验停滞了2个月一直也没进展。
按理说RAM借助锁式探针扩增的独特方式以及水解体系的存在可以有效防止污染才对,希望大家给点建议该如何解决。
万分感谢!!!!!!!!!!
附一张以前做敏感性的图(marker为2000的DNA ladder)以做参考

PCR(Polymerase Chain Reaction)技术,即聚合酶连反应,是一种扩大和复制目的片段DNA的技术,其发现对于生命科学的发展具有重要的意义。而3D数字PCR到底是什么鬼?它其实是最新出现的一款PCR仪,其具有对目的DNA分子做出绝对定量的优点,进而提供无与伦比的准确性、灵敏度。原理3D数字PCR是基于纳米流体芯片进行检测,通过一次检测,将样品分到数千个单独的PCR,检测结果部分为阳性,部分为阴性,之后进行绝对分子数统计,不需做标曲。目前可检测到2万个0.8nL的液滴(样品),能够精确的进行靶位点进行绝对定量研究。应用前景基因表达的绝对定量应用该技术,实现对DNA进行精确绝对定量,精确度可通过复制次数实现。通过准确性的进行定量检测基因,有助于临床上在治疗癌症、病毒感染等疾病作参考。同时,其具有高通量,检测速度快,成本相对低等优点,为后期精准治疗奠定基础。罕见基因的检测对于临床上的罕见的基因进行检测,不依靠参考标准,节约样本与试剂,并具有一定的精确度。3D数字PCR为液体活检提供技术支持液体活检是一种非侵入性的检测肿瘤基因及临床治疗效果的一种方法,目前可能正在开展有关3D数字PCR在在液体活检中的疗效,为后期临床提供更多可靠的指导作用。最新报道称“无创伤性肺癌检测技术即将登陆中国”。随着基因检测技术,如类似3D数字PCR技术的发展,推动我们将进入了“DNA的应用商城”这样的新时代,如23 and me、华大基因等专业的检测服务机构,提供更加专业的基因检测结果,经基因报告解读师或遗传咨询师进行通俗的解读,让我们每一个人都能够了解自己的基因,拥有自己的“生命之书”,让我们更加健康的生活。精准医疗其实本质是应用生物学信息与大数据科学的交叉发展的新型医学概念与医疗模式。对于精准医疗,重点在于“精准”,不仅仅是简单的基因测序如此简单,更需要精准的诊断与精准的治疗。
第一次做这方面的实验,这张图的右半个不会选,希望大家帮帮忙

求助各位大侠,最近做的荧光定量PCR,标准曲线稀释一直不好,请教各位,

采用的标准品是自己提的细胞基因组,浓度最高从125ng/uL,5倍稀释,到最低0.2ng/uL,问题如下:

1.最后一个浓度做出来的扩增曲线重复性非常差,而且与前一个浓度梯度CT值差值约为5左右,稀释过程与前几个浓度时操作一致。

2.待测样品中目标基因若含量高,则重复性尚可,若含量略低,Ct值在30及以上,重复性也很差。


说明,

1、每个标准曲线浓度的稀释操作均一致,涡旋混匀时间>15s

2、所用移液枪无问题,枪头为低吸附枪头

3、操作移液枪无问题

实验不顺,甚是不爽,各位大侠出手解救


数字PCR的简介 123
三秒微笑_刹侥82021-08-08
数字PCR即Digital PCR(dPCR),它是是一种核酸分子绝对定量技术。相较于qPCR,数字PCR可让你能够直接数出DNA分子的个数,是对起始样品的绝对定量。向左转|向右转
恒温PCR一种新式恒温核酸扩增方法,其原理是采用能特异识别靶序列上6个位点的4条引物及一种具有链置换活性的DNA聚合酶,反应全过程恒定63℃,不到1h的时间里进行核酸的指数级扩增,其扩增效率可达到109个~ 1010个拷贝数量级。在扩增反应中产生茎-环结构,保证引物与其杂交启动新一轮核酸合成。配合恒温荧光检测设备可实时监测扩增情况。该扩增法具有简单、快速、准确、易检测、适用面广等优点。迪澳转基因快速检测箱,配置了高通量恒温荧光检测仪DEAOU-308C、转基因快速检测试剂、植物基因组核酸提取试剂及必备的实验耗材。为客户提供了精确高效、功能全面、经济实用的转基因检测手段。

组织用Trizol法提取总RNA浓度、纯度都很好,但逆转录后跑PCR,CT值偏高,内参的在22-27之间,目的基因在30-36之间,不知道是怎么回事,如何来解决,求高手赐教。我用的Takara的试剂盒

定量检测包括总RNA提取和纯化、(可能还需要做mRNA提取和纯化)、RT、定量PCR
还需要反转录用的引物、定量PCR用的一对引物、荧光信号源(荧光染料或荧光标记的探针,看你用什么策略来做定量PCR)
报价要看你需要服务商提供什么服务,如果你只提供实验材料,要求服务商做以上全部工作,只检测一个指标(一个基因的表达水平变化),价格大约每个样品350-500元,多一个指标大约多90元。
一般至少做一组数据两个样品嘛,所以你按1000块一组样品预算吧。
请问大家谁有数字PCR相关的资料,可不可提供一下啊,谢谢
数字PCR介绍_核酸123
猫猫7m_3852021-07-27
在定量PCR时,我们常常纠结一个问题,究竟是相对定量还是绝对定量呢?如今,你无需纠结了,因为数字PCR(digital PCR)来了。尽管这两种技术有些类似,都是估计起始样品中的核酸量,但它们有一个重要的区别。定量PCR是依靠标准曲线或参照基因来测定核酸量,而数字PCR则让你能够直接数出DNA分子的个数,是对起始样品的绝对定量。因此特别适用于依靠Ct值不能很好分辨的应用领域:拷贝数变异、突变检测、基因相对表达研究(如等位基因不平衡表达)、二代测序结果验证、miRNA表达分析、单细胞基因表达分析等。向左转|向右转
在定量PCR时,我们常常纠结一个问题,究竟是相对定量还是绝对定量呢?如今,你无需纠结了,因为数字PCR(digital PCR)来了。尽管这两种技术有些类似,都是估计起始样品中的核酸量,但它们有一个重要的区别。定量PCR是依靠标准曲线或参照基因来测定核酸量,而数字PCR则让你能够直接数出DNA分子的个数,是对起始样品的绝对定量。因此特别适用于依靠Ct值不能很好分辨的应用领域:拷贝数变异、突变检测、基因相对表达研究(如等位基因不平衡表达)、二代测序结果验证、miRNA表达分析、单细胞基因表达分析等。
定量PCR方法及数据分析123
有木有3803722021-08-06
你所说的PCR应该就是最常规的PCR,以DNA为模板,通过上下游引物,实现DNA的扩增RT-PCR一般情况下是指反转录PCR(reversetranscription),尽管有些资料上说实时荧光定量PCR也(realtimefluores-cencequantitativePCR)也简称RT-PCR,但是我觉得这是不对的,不推荐。基本操作过程是将所提取的RNA进行反转录,然后将所获得的cDNA作为模板,设计引物进行扩增,是一种检测基因表达的常用方法。实时荧光定量PCR也就是Real-TimePCR,原理有点多,请自行百度百科,其最大的作用是检测样品中的初始DNA浓度。至于三者的关系,RT-PCR和实时定量PCR应该都属于PCR,在RNA实验中,这二者都会应用到。例如你要比较2个组织中的某基因的表达差异,首先你要提取2个组织的总RNA,然后通过RT-PCR检测该基因是否在2个组织中有表达,然后通过实时定量PCR测定该基因在2个组织中的表达量是否具有显著性差异。
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