
Magnetofection technology requires an appropriate magnetic field that magnetizes the nanoparticles in solution, forms a very strong gradient to attract the nanoparticles onto cells and covers all the surface of the culture dish. Therefore, optimized magnetic plates with tailored properties have been especially designed for Magnetofection.
OZ Biosciences’ magnetic plates main features:
Suitable for all Magnetofection reagents and all cell culture dishes (384-, 96-, 4, 24, 12, 6-well plates, 35, 60, 90 & 100 mm dishes, T-25, T-75 and any other flasks)
Can be easily cleaned and decontaminated with 70% ethanol
Can be used within incubators and with robots
Can be used at room temperature, 37°C, +4°C, etc.
Compatible with culture plates from most common suppliers
Solid, completely reusable, it is a one-time buy.
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跑到还有半小时的时候,跳出一个对话框:“analysiscannotproceed:notenoughsamplesdefined”,最后做出来的结果有扩增曲线但是没有熔解曲线,请各位大神帮忙解释一下。
在定量PCR时,我们常常纠结一个问题,究竟是相对定量还是绝对定量呢?如今,你无需纠结了,因为数字PCR(digital PCR)来了。尽管这两种技术有些类似,都是估计起始样品中的核酸量,但它们有一个重要的区别。定量PCR是依靠标准曲线或参照基因来测定核酸量,而数字PCR则让你能够直接数出DNA分子的个数,是对起始样品的绝对定量。因此特别适用于依靠Ct值不能很好分辨的应用领域:拷贝数变异、突变检测、基因相对表达研究(如等位基因不平衡表达)、二代测序结果验证、miRNA表达分析、单细胞基因表达分析等。
一般说来,应选用口碑较好的经过大量客户实验验证的荧光定量PCR试剂盒,因为只有选对了试剂盒才能够做成漂亮的实验结果来,特别是对于一些珍贵的样品更不能因为节约一些蝇头小利而糟蹋了样品本身。OneShineSybrGreenpreMix试剂盒在研发之初就考虑到了一般科研环境中方方面面的影响,例如我们就光照强度、光照时间对本产品的影响做了严苛的实验论证,得到1ml本产品盛装于1.5ml离心管中放置在2000Lux光照强度下可以保存12h,超过12h产品性能则会下降。
OneShineSybrGreenpreMix这款试剂盒除了价格适中外,还主要有以下优点:
1、适用于RealTimePCR反应,可以快速、准确地对目的基因进行定量检测。
2、在2×OneShineSybrGreenpreMix中,预先混有SybrGreen,PCR体系配制时只需入模板、引物、ddH2O即可,操作方便快捷。
3、含有更耐高温并持续稳定的DNAPolymerase,可以维持更多的循环数,提供了选择循环数更大的空间。更大的Ct值选择范围就意味着可以支持微量目的基因检测,检测范围fM-nM。
4、反应的Buffer更适合,使反应的基线更水平,无荧光污染信号。使线性期更陡峭,避免了Ct值的无效浮动。使平台期更平直。也确保了引物与模板能够更特异地结合。
5、SybrGreen更耐高温更足量,确保只要扩增反应在进行,目的DNA双链在增加,就有线性强度的荧光产生。
6、dNTPs更足量,确保反应有更高的平台期荧光信号。
7、Mg2+浓度更适合,确保线性期有爆发式的目的DNA片段合成,提高了线性期反应体系的扩增系数和线性期的长度。
8、更高的仪器适配性,SybrGreen染料可以被各大主流仪器的激发光所激发,产生明亮的荧光信号,有利于仪器对信号的捕捉和处理。
我们的产品与市面上目前常见的一种产品相比较有如下区别:
A公司的产品没有熔解温度,或者熔解温度太高。但是A公司的产品Ct值出现略早,这是因为A公司使用了一种小分子量的DNA聚合酶,这种酶与模板和引物的结合较快和较松散,但是扩增的效率和扩增的特异性就不能保证了,类似于温水煮青蛙不温不火的;这种酶还有一个弱点就是不耐冻融。我们使用的是Taq酶,是一种分子量较大的DNA聚合酶,这种酶与模板和引物结合比较慢,但是慢工出细活,这种酶的特异性较好,一旦激活便呈现爆发式的扩增,类似于不鸣则已一鸣惊人。我们产品熔解温度是A公司不可比拟的,线性范围和斜率也是A公司不可比拟的。详见下图:
这样设想的前提是因为,普通Taq酶也具有5‘-3’外切酶活性,如果可以的话,与普通PCR相比,反应体系需要做什么样的改动呢?
用的是ABI的机器。
有大神做过人外周血全血miRNA的提取及后续PCR实验的吗?目前课题实验遇到瓶颈,求助大神!!!是否miRNA的PCR验证在全血做不出?必须要用血浆或者血清?目前血浆、血清也有部分样本。。。。有大神指条明路吗?
数字PCR(Digital PCR)仪器 伯乐生命bio-rad QX200 微滴式数字PCR (ddPCR) 系统可对DNA或RNA分子进行绝对定量分析,适用于 EvaGreen 或基于探针的数字PCR应用领域。 QX200 Droplet数字PCR(Digital PCR) 系统的应用领域: 癌症生物标志物研究和拷贝数变异分析 以卓越的灵敏度和准确度测量癌症突变的变异程度、检测稀有的 DNA 靶拷贝以及解析拷贝数变异状态。 病原体检测 精确地对靶 DNA 或 RNA 分子中的细微变化进行定量分析,从而检测和监测病原体。 与新一代测序 无缝对接 无需使用标准曲线,直接对 NGS 库执行绝对定量分析。 基因表达分析 可对少量 mRNA 和 miRNA 的细微变化进行准确及重复性极佳的检测。 环境监测 使用 QX200 系统可测试多种环境样品,例如土壤和水。 食品检测 采用经过验证的 ddPCR 方法对转基因生物体 (GMO) 进行评估。向左转|向右转

