Quicklypurifyhighyieldsofhigh-molecular-weightgenomicDNA,totalcellularRNAorTotalNucleicAcid(TNA)withonekit
Fast:PurifyTotalNucleicAcid(TNA),DNAorRNAin30–60minutes- Safe:Doesnotusehazardousphenol,chloroformorguanidine
- HighPurity:A260/A280ratiosconsistentlybetween1.8and2.0
- HighYields:Improvesyieldsbyavoidingtheuseofcolumnswhichoftenreducenucleicacidyields
- Versatile:PurifyTNA,genomicDNA,totalRNA,FFPERNA,orbothgenomicDNAandtotalRNAfromasample
- TotalRNARecovery:Purifybothlargeandsmall(e.g.,miRNA)RNAforRNA-SeqorqRT-PCR
- Proven:HundredsofcitationsforpurificationofDNAandRNAfromdozensofsampletypesforuseinmanyapplications
TheMasterPure™CompleteDNAandRNAPurificationKitenablesrapid,highyieldpurificationofhigh-molecular-weightgenomicDNA,totalcellularRNAandTotalNucleicAcid(TNA)frommanydifferentsampletypes.
Thekitprocedureusesasafe,gentle,andscalablesalt-precipitationprotocol(Figure1)thateliminatestheneedforhazardouschemicalsandyield-reducingcolumns.Purificationreactionscanbescaleduporscaleddowndependingontheamountofnucleicacidneededandthesizeofthesample.MasterPureKitsforNucleicAcidpurificationsGram-positivebacteria,yeastDNAandbloodsamplesarealsoavailable.
Applications
PurificationofgenomicDNAortotalRNAformanyapplications,including:
- Librarypreparationfornextgenerationsequencing(NGS)ofgenomicDNAandRNA
- DNAmethylationstudiesusingIllumina®Infinium®HumanMethylationBeadChips
- GenomicDNAandCDNAcloning
- qPCRandqRT-PCR
- Micrarrayanalyses(CGH,geneexpressionprofiling,etc)
Figure1.OverviewoftheMasterPure™CompleteKitprotocol. |
Figure2.ComparisonofPCRsensitivityusingtemplatesobtainedusingtheMasterPure™CompleteDNAandRNAPurificationKitversusaspin-columnkit.PCRamplificationwasperformedafterextractionfromserialdilutionsofE.colicellsrangingfrom2×107(lanes1)to200(lanes6).LaneM,DNAMarker;lane7,negativecontrol. |
Figure3.DNA,RNA,andtotalnucleicacid(TNA)purifiedfromdiversecellsourcesusingtheMasterPure™CompleteKit.M=kbladder. |
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不懂得请别粘贴那些有的没的,浪费资源
采用的给全部分
哪个正规生物公司DNA提取试剂好用,纯,效果好
这个与琼脂糖电泳有关。提取的DNA分子量很大,可能在40K到100K左右。也有可能在这个范围。但普通的琼脂糖电泳。在大分子的时候根本分别不出来。如果你有DL15000的MARKER你就知道,象那个一万与一万五和条带差别很近。
能有效的处理土壤样品中一些很难处理的组分如: 真细菌孢子(eubacterial spores)、内芽孢(endospores)、格兰仕阳性菌(gram positive bacteria)、酵母(yeast)、线虫(nematodes)、海藻(algea)、真菌(fungi)等。2. 样品处理过程中使用的 MT Buffer和Sodium Phosphate Buffer可在整个提取过程中有效的保护核酸,并最大限度的降低RNA污染。3. 基于硅珠的纯化方法,可有效地去除腐植酸、多元酚等PCR抑制物4. 纯化所得的DNA可直接用于PCR、酶切都后续实验之中。5. 对腐植酸含量特别高的样品,附加额外的处理方法。注:对于去除腐植酸的方法在使用以下任何一种方法之前,请预先准备5.5M的异硫氰酸胍(Guanidine Thiocyanate)溶液方法A:1.当操作到土壤DNA提取试剂盒的第九步时,使用14,000 x g (~约5秒)的短时离心替代硅珠的自然沉降,移除上清。2.用1ml事先准备好的异硫氰酸胍溶液洗涤、重悬硅珠。3.14,000 x g (~约5秒)短时离心该离心管,除去上清。4.重复上述的洗涤步骤,直到硅珠恢复到原先的颜色。5.最后一次洗涤之后,用1ml的异硫氰酸胍溶液重悬硅珠,将600μl重悬液转移到SPIN filter里,14,000 x g离心1分钟。6.移除接液管中的废液,将剩余的重悬液转移至SPIN filter里,14,000 x g离心1分钟,弃去废液。7.从提取试剂盒操作说明的第十二步开始继续操作。方法B:1.将下列成分混合于1.5ml的离心管中,组成腐植酸洗涤液:978 μl Sodium Phosphate Buffer122 μl MT Buffer250 μl PPS2.充分混匀后,全速离心1分钟,将上清转移到一个新的离心管中(容量大于或等于2ml)3.加入等体积的5.5M的异硫氰酸胍溶液、混匀。4.完成了土壤试剂盒操作说明中的第九步后,将500μl的腐植酸洗涤液加入SPIN filter5.14,000 x g离心1分钟,弃去废液。6.重复上述的洗涤步骤,直到硅珠恢复到原先的颜色。7.从提取试剂盒操作说明的第十二步开始继续操作。




