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Xpressbio/nexttec Genomic DNA Isolation Kit from Fish Tissue/10N.902-Fish Tissue/2 nexttec clean-plates96
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基因(遗传因子)是产生一条多肽链或功能RNA所需的全部核苷酸序列。基因支持着生命的基本构造和性能。储存着生命的种族、血型、孕育、生长、凋亡等过程的全部信息。环境和遗传的互相依赖,演绎着生命的繁衍、细胞分裂和蛋白质合成等重要生理过程。生物体的生、长、衰、病、老、死等一切生... 查看更多>
稀释平板测数是根据微生物在高度稀释条件下固体培养基上所形成的单个菌落是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法,即一个菌落代表一个单细胞。 计数时,首先将待测样品制成均匀的繁殖稀释液,尽量使样品中的微生物细胞分散开,使其成单个细胞存在,否则一个菌落就不只是代表一个细胞,再取一定稀释 度、一定量的稀释液接种到平板中,使其均匀分布于平板中的培养基内。经培养后,由单个细胞生长繁殖形成菌落,统计菌落数目,即可计算出样品中的含菌数。此 记数方法所计算的菌数是培养基上长出来的菌落数,故又称活菌计数。一般用于某些 查看更多>
许多生物学过程,如重组、复制及转录都涉及序列特异性DNA结合蛋白的作用, 这些蛋白质的量通常小于细胞总蛋白质量的0.01%。基于这些蛋白质的序列特异性 DNA结合特性,亲和层析是一种十分有效的纯化蛋白质的方法。来源:《精编分子生物学》第五版 查看更多>
一步法提取质粒DNA主要用于鉴定阳性克隆。主要步骤如下:收集1.5mL菌体,彻底除去培养基;加入50ulSTE缓冲液重悬菌体;加入50ul酚:氯仿;异戊醇(25:24:1),混匀;12000rpm离心5分钟,取上清到另一离心管中;加入NH4Ac至终浓度2M,并加入2倍体积的乙醇,混匀,室温或冰上放置几分钟;12000 查看更多>
Rapid Method for Preparation of Genomic DNA from P. aeruginosa Inoculate 1 ml of L-broth or other rich media with cells of the strain from which genomic DNA is 查看更多>
Tail Preps: DNA Isolation From Mouse Tails Without PhenolNOTE: THIS IS FINE FOR SOUTHERNS, BUT NOT FOR SCREENING BY PCR. (from Ruixia, 7/99, from protocol by S 查看更多>
SGI-DNA, Inc.已成为IGSC成员之一 查看更多>
PlasmidpreparationwithoutovernightculutreContributedbyDr.A.GratchevPrepare13mltubewith5mlLB,containingappropriateantibiotic(ampicillinconcentrationcanbeupto400µg/ml).Pickupthecolonywithsterileyellowpipetttip,dropthetipinthetubeShakeyourtubersatthero 查看更多>
Procedure 1. Grind 2 to 5 g of frozen leaves to a very fine powder with a liquid nitrogen-cooled mortar and pestle. 2. Add 25 ml of CTAB Buffer and transfer to 查看更多>
ES CELL DNA EXTRACTION: TUBE METHOD Protocol for extracting DNA from ES Cells, starting from the 96-well plate but processing in an eppendorf tube to recover m 查看更多>
Ⅰ、样品准备 准备以下一种或几种样品A、组织单细胞悬浮液(如淋巴腺、脾、骨髓、胎盘细胞)B、组织培养细胞C、Ficoll-hypaque分离的单核细胞Ⅱ、反应体系-DNA低渗缓冲液柠檬酸三钠     0.25gTriton-X 100 0.75mlPropidium iodide 0.025g核糖核酸酶      0 查看更多>
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DNA提取与纯化123
山中树2021-07-20
我想从植物中提取总DNA做酶切来扩增启动子,但是不论怎么纯化,用平末端的酶老是切不动,请问各位大虾有没有什么高见啊?!对了,我用的是CTAB法,在用无水乙醇沉淀之后不离心直接用枪头把DNA挑出来了洗了,但是还是切不动.好烦啊,请教各位大虾了!
dna提取试剂盒说明书123
ewen71172021-07-23
**推荐性价比高的DNA提取试剂盒,提取分选后的细胞,细胞量不大。
DNA提取试剂盒哪种好 123
沙拉曼德2016-03-14
如题,用过天根的但效果不太好,想换一种,但Qiagen的太贵,能不能推荐一个性价比高的牌子?
这两个方法有什么区别?那个比较好?有什么要主意的吗?

提取试剂盒的详细步骤是什么?
dna产物纯化试剂盒可以纯化甲基化之后的dna
1、DNA提取问题:现在核算提取试剂盒大部分都是吸附柱法,相信你应该不会操作错误,如果提取之后进行核酸定量结果很低的话,试着再最后一步溶解核算的时候把水稍微加温(37℃就可以了),溶解时间稍微长一些,然后再离心的时候采用分次离心,比如开始你用200ul溶解的话,你可以分两次用100ul水溶解离心,这样可以提高DNA的产率.
2、电泳问题:如果你核酸定量浓度不低的话就考虑电泳问题,电泳的时候加上1kb的marker,如果marker跑不出来说明你凝胶有问题,一般只要marker跑出来了,DNA浓度又比较高,而没有条带这样的现象很少见,DNA提取比较简单而且相当稳定,本人当时做甲基化提取的DNA有一次拿出来电泳忘了放回冰箱了,结果大夏天的在外面放了一天,心怀忐忑的进行了一次电泳,结果条带依然给力,一点都没有降解.
请问各位大神,我实验室有这些试剂盒,QIAprepSpinMiniprepKit(250)、AllPrepDNA/RNAMiniKit(50)、QIAampDNAMiniKit、WizardGenomicDNAPurificationKit,请问这几个提DNA的试剂盒有什么不同吗?
有哪些可以提取细胞中病毒DNA的?或者用其他试剂盒提过呢
坐等回复!
试剂准备:使用前先在SEWS-M Wash Solution中加入100 ml 100%的乙醇,混匀。在瓶子上做好标记,密闭储存于室温条件。提取步骤:1. 在样品处理管E中加入至多500 mg的土壤样品2. 将978 μl的Sodium Phosphate Buffer加入到样品处理管E中3. 再加入122 μl的 MT Buffer(为了得到良好的样品处理效果,请在加入土壤样品及两个缓冲液后,在样品处理管中仍能保留有250 – 500μl 空间)4. 将样品置于FastPrep? 仪器上,样品处理条件一般为,时间:40秒,速度:6.0(如果样品需要额外的处理时间,请在间隔期将样品处理管在冰上孵育至少2分钟,以免样品过热)5. 14,000 x g离心5~10分钟(如果把离心时间延长到15分钟,可以更好地使样品量较大的;或者细胞壁结构较复杂的细胞的碎片沉降到管底)6. 将上清转移到一个干净的2.0 ml离心管中。加入250μL的PPS溶液(蛋白质沉淀溶液),用手摇晃10次,使之充分的混合。7. 14,000 x g离心5分钟,将上清转移到一个干净的15ml管中(此处也可使用2Ml管,但使用大管子能获得更好的混合和DNA绑定效果)8. 重悬硅珠(Binding Matrix)溶液,将1.0 ml重悬液加入该15ml管中。9. 使用振荡器或者手动震荡2分钟,将DNA绑定在硅珠上。将管子置于管架上,静置3分钟,使硅珠沉淀下来。10. 小心地移除500μl的上清液,避免吸取到沉淀下来的硅珠。11. 将硅珠在剩余的上清液中重悬。转移约600μl的重悬液至SPIN? Filter中,14,000 x g离心1分钟。弃去接液管中的废液,将15ml管中剩余的重悬液转移到SPIN? Filter再次离心弃去废液。12. 加入500 μl事先准备好的SEWS-M溶液,用枪头轻轻吹打,小心地重悬沉淀。13. 14,000 x g离心1分钟,弃去废液。14. 不加其他溶液,将SPIN? Filter 14,000 x g离心2分钟,除去残留的SEWS-M溶液。弃去接液管,更换一个新的、干净的离心管。15. 将SPIN? Filter置于室温下晾干5分钟16.轻轻地用50-100 μl 的DES溶液(或者无菌/无DNA酶的水)重悬SPIN filter上的硅珠(为了避免过度稀释纯化出的DNA,请尽量减少DES溶液的量,55?C孵育5分钟能帮助提高纯化产物的得率)17. 14,000 x g离心1分钟使溶解的DNA转移到接液管中。弃去SPIN? Filter(得到的纯化产物可直接用于PCR等其他下游的操作,4°C使用前保存或者-20°C长期保存。)技术优势
能有效的处理土壤样品中一些很难处理的组分如: 真细菌孢子(eubacterial spores)、内芽孢(endospores)、格兰仕阳性菌(gram positive bacteria)、酵母(yeast)、线虫(nematodes)、海藻(algea)、真菌(fungi)等。2. 样品处理过程中使用的 MT Buffer和Sodium Phosphate Buffer可在整个提取过程中有效的保护核酸,并最大限度的降低RNA污染。3. 基于硅珠的纯化方法,可有效地去除腐植酸、多元酚等PCR抑制物4. 纯化所得的DNA可直接用于PCR、酶切都后续实验之中。5. 对腐植酸含量特别高的样品,附加额外的处理方法。注:对于去除腐植酸的方法在使用以下任何一种方法之前,请预先准备5.5M的异硫氰酸胍(Guanidine Thiocyanate)溶液方法A:1.当操作到土壤DNA提取试剂盒的第九步时,使用14,000 x g (~约5秒)的短时离心替代硅珠的自然沉降,移除上清。2.用1ml事先准备好的异硫氰酸胍溶液洗涤、重悬硅珠。3.14,000 x g (~约5秒)短时离心该离心管,除去上清。4.重复上述的洗涤步骤,直到硅珠恢复到原先的颜色。5.最后一次洗涤之后,用1ml的异硫氰酸胍溶液重悬硅珠,将600μl重悬液转移到SPIN filter里,14,000 x g离心1分钟。6.移除接液管中的废液,将剩余的重悬液转移至SPIN filter里,14,000 x g离心1分钟,弃去废液。7.从提取试剂盒操作说明的第十二步开始继续操作。方法B:1.将下列成分混合于1.5ml的离心管中,组成腐植酸洗涤液:978 μl Sodium Phosphate Buffer122 μl MT Buffer250 μl PPS2.充分混匀后,全速离心1分钟,将上清转移到一个新的离心管中(容量大于或等于2ml)3.加入等体积的5.5M的异硫氰酸胍溶液、混匀。4.完成了土壤试剂盒操作说明中的第九步后,将500μl的腐植酸洗涤液加入SPIN filter5.14,000 x g离心1分钟,弃去废液。6.重复上述的洗涤步骤,直到硅珠恢复到原先的颜色。7.从提取试剂盒操作说明的第十二步开始继续操作。
转基因大豆油DNA提取方法,主要步骤包括:首先将转基因大豆油与TE溶液混合,磁力搅拌器搅拌2h充分乳化,12000r/min离心20min,小心取出下层水相;加入等体积的异丙醇,混匀,常温静置30min,12000r/min离心15min,去上清保留沉淀;加入TE溶解沉淀,加入2/3体积的氯仿:异戊醇进行抽提,12000r离心15min,取出上清,加入等体积异丙醇沉淀10min,离心10min,倒掉上清,用无水乙醇洗涤沉淀,沉淀常温干燥后,用50ulTE溶液溶解,即得到转基因大豆油的DNA溶液。转基因大豆油DNA提取方法的有益效果是:可以从转基因大豆油中提取到高质量的适宜于PCR检测的DNA,操作简单、耗时短、利于快速检测。
我的天哪,这个东西在专业网站上去查,一抓一大把。或者借本《分子克隆》看看,特别详细!
真菌的细胞成分和植物是有差别的,这种专一性的植物DNA提取试剂盒不一定能提好真菌的DNA.如果有条件你最好是买专一性的真菌DNA提取试剂盒.不过植物DNA提取的CTAB法确实可以适用于真菌的DNA提取,但因为真菌菌丝体含有很多多糖,你需要参考下植物DNA。
DNA提取原理和方法 123
找答案提问题2017-10-03
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