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| Description | YeastPoly(A)PolymeraseusesATPasasubstratefortemplate-independentadditionofAMPfromATPtothe3´hydroxylterminiofRNAmolecules.Itcanbeusedtoaddpoly(A)tailstoRNAinthefirststepofcloning.ThereactionrequiresMn2+orMg2+,ATPassubstrate,andanyRNAcontaining3'hydroxylterminiasprimer.Substitutionofcordycepin-5'-triphosphate(3'-dATP)forATPresultsinadditionofasingle3'-dAresiduetotheendsoftheRNA,ausefultechniqueforlabelingRNAatthe3'end. Incomparativestudies,YeastPoly(A)PolymeraseworksmoreefficientlythanE.colipoly(A)polymeraseforRNAoligonucleotide-labelingandpoly(A)tailing.Shorterincubationtimesarerequiredfortheyeastenzymeanditisfoundtolabelbothlongandshortsubstratesequallywell.YeastPoly(A)PolymeraseisrecommendedoverT4RNALigasefor3'-endlabelingoflongRNAmolecules. |
| Applications | |
| Source | ArecombinantE.colistraincarryingyeast(Saccharomycescerevisiae)Poly(A)Polymerasegene |
| UnitDefinition | 1unitisdefinedastheamountofenzymethatwillincorporate1nmolofATPintoacid-insolublematerialin10minutesat37°C. |
| Components |
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| QualityControl | Theabsenceofendonuclease,nickingactivity,exonucleaseandRNAseactivityisconfirmedbyappropriatequalitytests. |
| StorageCondition | -20°C |
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2021-07-16
酶的酶活性为了进一步验证检测方法的可行性,选择两种商品化T4DNA聚合酶进行检测,商品化T4DNA聚合酶1为NEB-T4DNAPolymerase,商品化T4DNA聚合酶2为Enzymatics-T4DNA... 查看更多
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弘业新创抗体技术股份有限公司在发布的Taq DNA聚合酶供应信息，浏览与Taq DNA聚合酶相关的产品或在搜索更多与Taq DNA聚合酶相关的内容。 查看更多
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2021-06-03
最近十年，口服核苷（酸）类似物的应用使乙型肝炎治疗取得重大进展。拉米夫定、阿德福韦酯、恩替卡韦、替比夫定和替诺福韦 5 种药物已被批准用于治疗慢性乙型肝炎，其中前 4 种已在我国上市，替诺福韦也将在我国开展临床试验。 虽然药物获批程序非常严格，但某些发生率很低或在长期用药期间发生的不良反应仍可能被临床前试验和临床试验疏漏或忽视。上述可能的 查看更多
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2019-09-20
北京金石百优科技有限公司在发布的Long Taq DNA聚合酶供应信息，浏览与Long Taq DNA聚合酶相关的产品或在搜索更多与Long Taq DNA聚合酶相关的内容。 查看更多
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2021-08-21
北京盛科博源生物科技有限公司在发布的高效、高保真DNA聚合酶供应信息，浏览与高效、高保真DNA聚合酶相关的产品或在搜索更多与高效、高保真DNA聚合酶相关的内容。 查看更多
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2021-09-13
第一链cDNA合成的起始可以使用三种不同的方法，各种方法的相对特异性影响了所合成cDNA的量和种类。随机引物法是三种方法中特异性最低的。引物在整个 查看更多
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B、DNA连接酶 C、拓扑异构酶 D、解链酶 E、限制性核酸内切酶查看答案您可能感兴趣的试题 左心衰竭最早出现的症状是( )。 A.劳力性呼吸困难 B.心源性哮... 查看更多
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2020-05-07
B.反转录酶具有DNA指导的DNA聚合酶活性 C.反转录酶能水解杂化链中的RNA D.反转录酶具有RNA指导的RNA聚合酶活性 E.反转录所需的引物可为tRNA 点击查看... 查看更多
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2020-01-09
【正品直销，售后保障】（含有染料长片断扩增DNA聚合酶）2 × Vazyme LAmp Master Mix (Dye Plu是由南京诺唯赞生物科技有限公司代理或销售的Vazyme品牌的试剂，产品来源于江苏南京。南京诺唯赞生物科技有限公司是中国最权威的【正品直销，售后保障】（含有染料长片断扩增DNA聚合酶）2 × Vazyme LAmp Master Mix (Dye Plu试剂销售服务商之一，在南京等地方销售【正品直销，售后保障】（含有染料长片断扩增DNA聚合酶）2 × Vazyme LAmp Mast 查看更多
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2021-08-06
分子酶专栏之耐热型DNA聚合酶（中篇） 一．来自Thermus耐热菌的A型DNA聚合酶Thermus属的细菌属于Deinococci纲，它们的最佳培养温度是65~70℃，可在80℃的极端温度条件下生存。这些细菌中的耐热A型DNA聚合酶与真核生物中的聚合酶I是同源的，早在1976年就被发现，而且已经有越来越多的Thermus DNA聚合酶被发现和表征。这一类酶有几点共性，包括94~95 kDa左右的蛋白分子量、内生的5’-3’方向核酸外切... 查看更多
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Klenow酶是大肠杆菌八聚合酶I的羧基端片段，它具有DNA聚合酶和3’到5’方向的外切酶活性，不含5’到3”方向的外切酶活性。 查看更多
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2021-08-16
本实验介绍激活的热稳定 DNA 聚合酶进行反转录和 DNA 扩增。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。 查看更多
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Bst DNA 聚合酶,全长批发_价格厂家供应商_北京百奥莱博科技有限...123
wujie82118912006-04-10
哪里能买到BstDNA聚合酶！哪里的更好用一点？请大家帮忙！
DNA聚合酶与DNA连接酶等作用如何区别 实验方法123
zy19239951412017-11-27
DNA聚合酶作用于DNA复制时，用于连接两个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键以及碱基互补配对时的氢键。
DNA连接酶作用于基因工程，用于连接两个DNA片段间的磷酸二酯键。
DNA连接酶作用于基因工程，用于连接两个DNA片段间的磷酸二酯键。
rna聚合酶作用底物_DNA聚合酶催化底物?作用部位_完美作业网_...123
2017-11-27
A、DNA转录形成RNA时需要RNA聚合酶的催化，底物是核糖核苷酸，A错误；
B、酶大部分是蛋白质、少量是RNA，故某种酶的基本组成单位是氨基酸或核糖核苷酸，B错误；
C、内分泌细胞能产生激素，活的细胞能产生酶，故能产生激素的细胞就能产生酶，C正确；
D、酶通常是蛋白质，蛋白质在低温条件下更加稳定，利于保存，而且低温不会使酶失活，因此在最适温度保存没有意义，D错误．
相同点：都能以DNA为模板，从5'向3'进行核苷酸或脱氧核苷酸的聚合反应。
不同点
1、作用底物不同。RNA聚合酶底物是NTP；DNA聚合酶底物是dNTP。
2、RNA聚合酶作用不需要引物，而DNA聚合酶作用需要引物。
3、RNA聚合酶本身具有一定的解旋功能，而DNA聚合酶没有，当需要解开双链的时候要解旋酶和拓扑异构酶的帮助。
4、RNA聚合酶只具有5‘到3’端的聚合酶活性，而DNA聚合酶不仅有5‘到3’端的聚合酶活性，还具有3‘到5’端的外切酶活性。保证DNA复制时候校对，所以复制的忠实性高于转录的。
5、RNA聚合酶通常作用于转录过程；DNA聚合酶通常作用于DNA复制过程
B、酶大部分是蛋白质、少量是RNA，故某种酶的基本组成单位是氨基酸或核糖核苷酸，B错误；
C、内分泌细胞能产生激素，活的细胞能产生酶，故能产生激素的细胞就能产生酶，C正确；
D、酶通常是蛋白质，蛋白质在低温条件下更加稳定，利于保存，而且低温不会使酶失活，因此在最适温度保存没有意义，D错误．
相同点：都能以DNA为模板，从5'向3'进行核苷酸或脱氧核苷酸的聚合反应。
不同点
1、作用底物不同。RNA聚合酶底物是NTP；DNA聚合酶底物是dNTP。
2、RNA聚合酶作用不需要引物，而DNA聚合酶作用需要引物。
3、RNA聚合酶本身具有一定的解旋功能，而DNA聚合酶没有，当需要解开双链的时候要解旋酶和拓扑异构酶的帮助。
4、RNA聚合酶只具有5‘到3’端的聚合酶活性，而DNA聚合酶不仅有5‘到3’端的聚合酶活性，还具有3‘到5’端的外切酶活性。保证DNA复制时候校对，所以复制的忠实性高于转录的。
5、RNA聚合酶通常作用于转录过程；DNA聚合酶通常作用于DNA复制过程
需要镁离子催化的酶_真核生物的dna聚合酶需要镁离子,这和它的...123
陡变吧AWJ2017-11-27
TaqDNA聚合酶是Mg2+依赖性酶，该酶的催化活性对Mg2+浓度非常敏感。以活性程度很低的鲑鱼精子DNA为模板，dNTP的浓度为0.7～0.8mmol/L时，用不同浓度Mg2+进行PCR反应10min，测定结果为Mgcl2浓度在2.0mmol/L时该酶催化活性最高，此浓度能最大限度地激活TaqDNA聚合酶的活性，Mg2+过高就抑制酶活性，当Mgcl2浓度在10mmol/L时可抑制40～50%的酶活性。由于Mg2+能与dNTP结合而影响PCR反应液中游离的Mg2+浓度，因而Mgcl2的浓度在不同的反应体系中应适当调整，优化浓度。一般反应中Mg2+浓度至少应比dNTP总浓度高0.5～1.0mmol/L。适当浓度的KCl能使Taq DNA聚合酶的催化活性提高50～60%，其最适浓度为50mmol/L，高于75mmol/L时明显抑制该酶的活性。
【分享】Taq DNA聚合酶、Pfu DNA聚合酶等酶的特点及应用123
qingdaomdbio2021-07-25
合理选择耐热DNA聚合酶是PCR成败与否的一个关键因素。选择最合适的耐热聚合酶，是进行PCR实验首先要考虑的问题。许多耐热DNA聚合酶的主要区别在于特异性、保真性、耐热性、扩增速率、扩增片段长度等几个指标。
下面是六种不同耐热聚合酶的比较：
Taq：扩增效率最高的耐热DNA聚合酶，能很好的扩增6kb以下的DNA片段。扩增碱基出错率为10-5左右。
Pfu：目前保真度最高的耐热DNA聚合酶，碱基出错率为10-6，但扩增效率低于Taq酶，一般能很好的扩增2kb以下的片段。
TaqPlus：集扩增效率高和保真度好于一身。扩增效率比Pfu高，保真度比Taq好。能有效的扩增10kb以下的片段。
HotstartTaq：经过化学修饰的耐热DNA聚合酶。此酶在常温下，活性被化学基团封闭，要在94℃-95℃加热数分钟才能回复正常活力开始反应，避免了起始循环较低温度下的非特异性扩增，提高了反应的灵敏度和特异性。
LongTaq：具有3’-5’外切酶活性的耐热DNA聚合酶，它不但扩增效率高而且错配率低，对于简单模板可扩增长达40kb的模板，对复杂模板也可扩增长达15kb的片段。
TaqPlatinum：热启动高保真耐热DNA聚合酶。如果对保真度要求很高，而用Pfu扩增有难度，可选用TaqPlatinum，一般扩增长度可达4kb。
根据不同的实验目的选择最合适的酶，
克隆普通长度的目的DNA片段：Taq、TaqPlus
保真度要求较高，片段比较短，如点突变、基因筛选等：Pfu、TaqPlatinum
高保真长片段扩增，如构建基因图谱及分子遗传学研究等：LongTaq、TaqPlus
扩增基因组模板，需要降低背景：HotstartTaq、TaqPlatinum
扩增GC含量较高或二级结构较复杂的模板：TaqPlus、LongTaq、TaqPlatinum
实时荧光定量PCR反应：Taq、HotstartTaq、TaqPlatinum
从菌株或质粒模板，筛选鉴定目的克隆，扩增6kb以下的片段：Taq、TaqPlus、2×TaqPCRMasterMix
模板比较复杂或目的片段丰度低，用普通Taq酶扩增不出条带：2×TaqPCRMasterMix、2×PfuPCRMasterMix
下面是六种不同耐热聚合酶的比较：
Taq：扩增效率最高的耐热DNA聚合酶，能很好的扩增6kb以下的DNA片段。扩增碱基出错率为10-5左右。
Pfu：目前保真度最高的耐热DNA聚合酶，碱基出错率为10-6，但扩增效率低于Taq酶，一般能很好的扩增2kb以下的片段。
TaqPlus：集扩增效率高和保真度好于一身。扩增效率比Pfu高，保真度比Taq好。能有效的扩增10kb以下的片段。
HotstartTaq：经过化学修饰的耐热DNA聚合酶。此酶在常温下，活性被化学基团封闭，要在94℃-95℃加热数分钟才能回复正常活力开始反应，避免了起始循环较低温度下的非特异性扩增，提高了反应的灵敏度和特异性。
LongTaq：具有3’-5’外切酶活性的耐热DNA聚合酶，它不但扩增效率高而且错配率低，对于简单模板可扩增长达40kb的模板，对复杂模板也可扩增长达15kb的片段。
TaqPlatinum：热启动高保真耐热DNA聚合酶。如果对保真度要求很高，而用Pfu扩增有难度，可选用TaqPlatinum，一般扩增长度可达4kb。
根据不同的实验目的选择最合适的酶，
克隆普通长度的目的DNA片段：Taq、TaqPlus
保真度要求较高，片段比较短，如点突变、基因筛选等：Pfu、TaqPlatinum
高保真长片段扩增，如构建基因图谱及分子遗传学研究等：LongTaq、TaqPlus
扩增基因组模板，需要降低背景：HotstartTaq、TaqPlatinum
扩增GC含量较高或二级结构较复杂的模板：TaqPlus、LongTaq、TaqPlatinum
实时荧光定量PCR反应：Taq、HotstartTaq、TaqPlatinum
从菌株或质粒模板，筛选鉴定目的克隆，扩增6kb以下的片段：Taq、TaqPlus、2×TaqPCRMasterMix
模板比较复杂或目的片段丰度低，用普通Taq酶扩增不出条带：2×TaqPCRMasterMix、2×PfuPCRMasterMix
PCR实验中DNA聚合酶的选择及实验方法 实验方法123
无双蛛蛛2009-03-16
我要P一个3kb左右的目的基因，需要一个保真性高的酶，因为后面要测序，而且我的两个引物的GC含量相差也很大，还需要一个载体连接去进行筛选，这个载体要4kb以上的，因为要和我的目的基因大小相差大一点的，而且这个载体上还要有多个切割位点，好让我切割下来，与最终的质粒相连。
最近，我看了很多这方面的资料，但是我对这个方面不是很了解，所以现在搞得头昏眼花的，不知道该选什么酶和载体，希望大家多多帮忙
在此十分感谢
最近，我看了很多这方面的资料，但是我对这个方面不是很了解，所以现在搞得头昏眼花的，不知道该选什么酶和载体，希望大家多多帮忙
在此十分感谢
端粒酶 123
shineck62014-07-18
DNA连接酶和DNA聚合酶的异同_123
凌乱美4612017-11-05
连结酶是最后把dna粘起来
聚合酶就是多功能的dna的制作机器
聚合酶就是多功能的dna的制作机器
高保真DNA聚合酶在SNP检测中的应用123
小布袋2021-07-26
DNA聚合酶只能将___加到已有的核苷酸片段的末端,形成___。DNA连接...123
2021-07-22
高保真DNA聚合酶在SNP检测中的应用123
luzhikunjxnk2021-07-27
各位，我需要做基因的序列测定检测突变，想请教一下各位用过哪个公司的哪种高保真酶比较好？（最好是保真性能高而且扩增效率也好）谢谢！
原核生物和真核生物的DNA聚合酶有何不同?_已解决 生意经123
死耗子57232017-10-02
首先,原核生物DNA聚合酶分为Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ.Ⅰ主要是起修复的作用（比如光修复）,还有就是把RNA引物切除后的空隙填补起来,Ⅱ是参与原核生物SOS修复的酶,Ⅲ是原核生物在DNA延长中起主要作用的酶.
再来说真核生物,真核生物的DNA聚合酶分为α,β,γ,δ,ε,.首先我来说三个和原核生物中的Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ功能相同的酶.ε类似于原核生物DNA聚合酶Ⅰ,β类似于原核生物DNA聚合酶Ⅱ,δ类似于原核生物DNA聚合酶Ⅲ.α具有引物酶活性,而γ则是作为复制真核生物线粒体内的DNA所需要的酶.
再来说真核生物,真核生物的DNA聚合酶分为α,β,γ,δ,ε,.首先我来说三个和原核生物中的Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ功能相同的酶.ε类似于原核生物DNA聚合酶Ⅰ,β类似于原核生物DNA聚合酶Ⅱ,δ类似于原核生物DNA聚合酶Ⅲ.α具有引物酶活性,而γ则是作为复制真核生物线粒体内的DNA所需要的酶.
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