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Promega/GoTaq® MDx Hot Start Polymerase/1kit/D6008
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河南佰柯生物科技有限公司在发布的Pfu DNA polymerase(高保真Pfu DNA聚合酶)供应信息,浏览与Pfu DNA polymerase(高保真Pfu DNA聚合酶)相关的产品或在搜索更多与Pfu DNA polymerase(高保真Pfu DNA聚合酶)相关的内容。 查看更多>
The DNA Facility houses the “real-time” or kinetic PCR instrument, the Applied Biosystems Model 7700 sequence detection system (the TaqMan instrument). The pol 查看更多>
碱裂解法从大肠杆菌制备质粒,是从事分子生物学研究的实验室每天都要用的常规技术。为了方便理解,这里罗列一下碱法质粒抽提用到三种溶液:溶液I,50 mM葡萄糖 / 25 mM Tris-Cl / 10 mM EDTA,pH 8.0;溶液II,0.2 N NaOH / 1% SDS;溶液III,3 M 醋酸钾 / 2 M 查看更多>
大规模基因组测序计划的实施已改变生命科学的重心,在相当短的时期内,一些原核生物和某些低等真核生物的基因组序列已被测定. 1995年,流感嗜血杆菌基因组序列首次被破译,在此后不到两年的时间,近50个细菌的基因组序列已被完成. 然而,这仅仅是理解有机物功能的一个起点. 在基因组时代,许多D 查看更多>
广州东盛生物科技有限公司在发布的Optimus Hotstart Taq DNA聚合酶供应信息,浏览与Optimus Hotstart Taq DNA聚合酶相关的产品或在搜索更多与Optimus Hotstart Taq DNA聚合酶相关的内容。 查看更多>
北京金石百优科技有限公司在发布的Long Taq DNA聚合酶供应信息,浏览与Long Taq DNA聚合酶相关的产品或在搜索更多与Long Taq DNA聚合酶相关的内容。 查看更多>
Exposure to divalent cadmium ions (Cd2+) is a known cancer risk factor, but the molecular mechanisms responsible for the inappropriate induction of cellular pr 查看更多>
1.溶液I—溶菌液:溶菌酶:它是糖苷水解酶,能水解菌体细胞壁的主要化学成分肽聚糖中的β-1,4糖苷键,因而具有溶菌的作用。当溶液中pH小于8时,溶菌酶作用受到抑制。葡萄糖:增加溶液的粘度,维持渗透压,防止DNA受机械剪切力作用而降解。EDTA:(1)螯合Mg2+、Ca2+等金属离子,抑制脱氧核糖核酸 查看更多>
E.特异性酯酶法 进入在线模考 有关尿干化学检测原理,葡萄糖测定用 A.偶氮偶联法 B.马来酐试剂 C.葡萄糖氧化酶法 D.多聚电解质离子解离法 E.特异性酯酶... 查看更多>
From early post-implantation stages to approximately 18 weeks" gestation, cytotrophoblast at the tips of anchoring villi at the placental periphery proliferate 查看更多>
第一节 概 述把一个有用的目的DNA片段通过重组DNA技术,送进受体细胞中去进行繁殖和表达的工具叫载体(Vector)。细菌质粒是重组DNA技术中常用的载体。质粒(Plasmid)是一种染色体外的稳定遗传因子,大小从1-200kb不等,为双链、闭环的DNA分子,并以超螺旋状态存在于宿主细胞中。质粒主要发现于细菌、放线 查看更多>
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问一个弱弱的问题,本人现在打算用直接测序方法来检测SNP,那么PCR体系中DNA聚合酶有特殊要求吗?比如要精确的pfu酶,如果需要那么哪个厂家的酶比较可靠,成功率高呢?谢谢
最近忽然对我们平常用的DNA聚合酶发生研究兴趣,想问下园子里面有没有谁实验室有那些个hot-start、Pfu之类的DNA聚合酶的重组质粒载体?这些酶的活性或是保真性应该强于我们平时使用的Taq酶,谁要是很幸运的找老外讨到了这些重组的质粒载体,PM我,谈谈交换的条件,呵呵!
RT说得概括一点考试简答用~!
一般来说,以DNA为模板的DNA聚合酶和RNA聚合酶都的结合位点都在DNA上。
但是也有以RNA为模板的DNA聚合酶和RNA聚合酶 (也就是反转录酶和RNA依赖的RNA聚合酶),它们的结合位点在RNA上.
也就是说,模版是谁,结合位点就在谁上。
2.结合位点就是启动合成DNA或者RNA的碱基序列,如RNA聚合酶结合位点是转录起始位点,是一段特殊的位于编码基因上游的DNA序列.这段DNA序列可以结合RNA聚合酶,从而起始转录过程.经典的RNA聚合酶结合位点是TATA box.
TATA box是编码序列前的4个碱基.在大多数生物的基因前面都有TATA着4个碱基序列的存在,它就是一个RNA聚合酶结合位点.
合理选择耐热DNA聚合酶是PCR成败与否的一个关键因素。选择最合适的耐热聚合酶,是进行PCR实验首先要考虑的问题。许多耐热DNA聚合酶的主要区别在于特异性、保真性、耐热性、扩增速率、扩增片段长度等几个指标。
下面是六种不同耐热聚合酶的比较:
Taq:扩增效率最高的耐热DNA聚合酶,能很好的扩增6kb以下的DNA片段。扩增碱基出错率为10-5左右。
Pfu:目前保真度最高的耐热DNA聚合酶,碱基出错率为10-6,但扩增效率低于Taq酶,一般能很好的扩增2kb以下的片段。
TaqPlus:集扩增效率高和保真度好于一身。扩增效率比Pfu高,保真度比Taq好。能有效的扩增10kb以下的片段。
HotstartTaq:经过化学修饰的耐热DNA聚合酶。此酶在常温下,活性被化学基团封闭,要在94℃-95℃加热数分钟才能回复正常活力开始反应,避免了起始循环较低温度下的非特异性扩增,提高了反应的灵敏度和特异性。
LongTaq:具有3’-5’外切酶活性的耐热DNA聚合酶,它不但扩增效率高而且错配率低,对于简单模板可扩增长达40kb的模板,对复杂模板也可扩增长达15kb的片段。
TaqPlatinum:热启动高保真耐热DNA聚合酶。如果对保真度要求很高,而用Pfu扩增有难度,可选用TaqPlatinum,一般扩增长度可达4kb。
根据不同的实验目的选择最合适的酶,

克隆普通长度的目的DNA片段:Taq、TaqPlus
保真度要求较高,片段比较短,如点突变、基因筛选等:Pfu、TaqPlatinum
高保真长片段扩增,如构建基因图谱及分子遗传学研究等:LongTaq、TaqPlus
扩增基因组模板,需要降低背景:HotstartTaq、TaqPlatinum
扩增GC含量较高或二级结构较复杂的模板:TaqPlus、LongTaq、TaqPlatinum
实时荧光定量PCR反应:Taq、HotstartTaq、TaqPlatinum
从菌株或质粒模板,筛选鉴定目的克隆,扩增6kb以下的片段:Taq、TaqPlus、2×TaqPCRMasterMix
模板比较复杂或目的片段丰度低,用普通Taq酶扩增不出条带:2×TaqPCRMasterMix、2×PfuPCRMasterMix
我要P一个3kb左右的目的基因,需要一个保真性高的酶,因为后面要测序,而且我的两个引物的GC含量相差也很大,还需要一个载体连接去进行筛选,这个载体要4kb以上的,因为要和我的目的基因大小相差大一点的,而且这个载体上还要有多个切割位点,好让我切割下来,与最终的质粒相连。
最近,我看了很多这方面的资料,但是我对这个方面不是很了解,所以现在搞得头昏眼花的,不知道该选什么酶和载体,希望大家多多帮忙
在此十分感谢
DNA聚合酶作用于DNA复制时,用于连接两个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键以及碱基互补配对时的氢键。
DNA连接酶作用于基因工程,用于连接两个DNA片段间的磷酸二酯键。
各位,我需要做基因的序列测定检测突变,想请教一下各位用过哪个公司的哪种高保真酶比较好?(最好是保真性能高而且扩增效率也好)谢谢!
DNA连接酶DNA聚合酶作用的异同:DNA聚合酶只能将()加到己有的核苷酸片段末端,形成磷酸二酯键。DNA链接酶是链接()的末端,形成磷酸二酯键。
DNA聚合酶是DNA复制时起作用的酶。DNA复制酶这个说法很少见。
我以质粒为模板进行定点突变,质粒加目的片段一共6.5kb,不知道选用那种高保真聚合酶比较好,想选PfuDNA聚合酶,查了查比较好的公司Promega生产的了,现在又查到TaKaRa生产的PyrobestDNA聚合酶,不知道这两种酶哪个比较好一些。请哪位高手指点一下。
首先,原核生物DNA聚合酶分为Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ.Ⅰ主要是起修复的作用(比如光修复),还有就是把RNA引物切除后的空隙填补起来,Ⅱ是参与原核生物SOS修复的酶,Ⅲ是原核生物在DNA延长中起主要作用的酶.
再来说真核生物,真核生物的DNA聚合酶分为α,β,γ,δ,ε,.首先我来说三个和原核生物中的Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ功能相同的酶.ε类似于原核生物DNA聚合酶Ⅰ,β类似于原核生物DNA聚合酶Ⅱ,δ类似于原核生物DNA聚合酶Ⅲ.α具有引物酶活性,而γ则是作为复制真核生物线粒体内的DNA所需要的酶.
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