| MolecularWeight: | 267.26 |
| Formula: | C11H9NO5S |
| Purity: | ≥98% |
| CAS#: | 343351-67-7 |
| Solubility: | DMSOupto100mM |
| ChemicalName: | 2-nitro-5-tosylfuran |
| Storage: | Powder:4oC1year.DMSO:4oC3month;-20oC1year. |
BIOLOGicalActivity:
NSC697923isacellpermeable,potentandselectiveinhibitoroftheUb-conjugatingenzyme(E2)complexUbc13-Uev1A.ItselectivelyinhibitsPMA-inducedNF-κBactivation,andalsoinhibitsIκBαphosphorylationbybothRANKLandLPS.ItimpedestheformationoftheUbc13andubiquitinthioesterconjugateandsuppressesconstitutiveNF-κBactivityinABC-DLBCLcells.ItinhibitstheproliferationandsurvivalofABC-DLBCLcellsandGCB-DLBCLcells,suggestingtheUbc13-Uev1AmaybecrucialforDLBCLgrowth.Inneuroblastoma(NB)celllines,NSC697923showscytotoxiceffect,andinhibitsbothanchorage-dependentand-independentcolonyformation.ItalsoshowsinvivoantitumorefficacyinNBorthotopicxenografts.
HowtoUse:
- Invitro:NSC697923wasusedat1-5µMfinalconcentrationinvariousinvitroassays.
- Invivo:NSC697923wasadmiNISTeredbyIPinjectionat10mg/kgonceperdayinSH-SY5YandNGPxenografts.
Reference:
- 1.PulvinoM,etal.InhibitionofproliferationandsurvivalofdiffuselargeB-celllymphomacellsbyasmall-moleculeinhibitoroftheubiquitin-conjugatingenzymeUbc13-Uev1A.(2012)Blood.120(8):1668-77.
- 2.ChengJ,etal.Asmall-moleculeinhibitorofUBE2Ninducesneuroblastomacelldeathviaactivationofp53andJNKpathways.(2014)CellDeathDis.5:e1079.
NSC697923_spec.pdf
NSC697923_MSDS.pdf
Productsareforresearchuseonly.Notforhumanuse.
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同一管dna有的酶可以切开,比如dra1,ecoR1,Hind111
有的酶又完全不能切动,如BamH1,sac1,xba1,xho1,pst1
请问高手这是什么原因??
求问酶切体系为10ul,内切酶1ul,37℃水浴45min,不知道DNA产物是否完全被切开了?
所用内切酶信息如下
我做的双酶切反应,酶分别是宝生物的BamHI和XhoI,双酶切体系是:载体及目的片段分别是30ul,通用buffer4ul,XhoI、BamHI各2ul,无核酶水2ul,总体积40ul。载体和目的片段都是经37度酶切6h。载体上面这两个酶切位点的距离是6个碱基,目的片段是由pcr反应获得的,从puc19中p出来的,两端带有这两种酶的酶切位点,酶切完成后,做连接反应,体系如下:目的片段(全长1441bp)4ul,无核酶水3ul,10*T4DNA连接酶缓冲液1ul,载体1ul,T4DNA连接酶1ul,总体积10ul。16度过夜。之后摇菌送沉菌测序结果回来,送了5管一个都不对。重复实验两次还是不对!
之后改为先用BanHI单切载体,体系如下:载体17ul,酶1ul,buffer2ul,总体积20ul,30度切6小时后,Promega纯化试剂盒直接纯化,完了之后再用XhoI,37度酶切6小时,体系如上,再次用promega纯化试剂盒纯化,目的片段用双酶切体系酶切,之后做连接反应,之后铺板,挑取菌落共10个,摇菌13小时,取菌液做pcr鉴定,结果10个菌落全是引物2聚体,跑出来的条带都是100bp左右。
各位老师这是怎么回事呢?为什么连接不上呢?小弟先谢过各位大哥了!
配后是否应该分装,因为不能反复冻融?
多谢!
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感谢赐教~!

