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Gemini/Bovine Serum Albumin (BSA), Fraction V—Solution 30%/100mL-700-110
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2021-08-23
二代测序（Next Generation Sequencing，NGS）技术如今大行其道，各科研单位和检测服务公司都相继引入二代测序系统。然而，二代测序过程烦琐精密，其中对样本核酸量的准确定量是成败关键之一。现今在 NGS 过领域中，荧光核酸定量检测为业界比较认可和普及的方法。在法方上，常见的是 Life Technologies 公司的 Qubit 仪器配上其荧光探针。可是此方案每次检测单个样本，未必可轻松应付高通量样本。再者，对于珍... 查看更多
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2019-04-02
NextSeq高通量桌上型二代测序系统是由北京安麦格贸易有限公司代理或销售的Illumina品牌的仪器，产品来源于美国。北京安麦格贸易有限公司是中国最权威的NextSeq高通量桌上型二代测序系统销售服务商之一，在北京等地方销售NextSeq高通量桌上型二代测序系统已经多年。同时，生物在线为您提供众多企业NextSeq高通量桌上型二代测序系统仪器产品及图片，以便挑选到性价比高，合适的NextSeq高通量桌上型二代测序系统产品 查看更多
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2021-08-22
是否还想进一步提高二代测序实验室的工作效率？是否还在为二代测序繁琐的流程烦恼？是否还在纠结二代测序实验是外包还是自己来操作？Eppendorf有幸邀请到郑州大学第一附属医院遗传与产前诊断中心孔祥东主任，与您分享二代测序实验室运营过程中的点滴心得。孔祥东 医学遗传学博士 教授 主任医师 硕士生导师郑州大学第一附属医院遗传与产前诊断中心主任，河南省人类遗传病基因修饰工程技术研究中心主任，河南省遗传病基因治疗医学重点实验室主任，毕业于四川... 查看更多
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2021-09-23
2019年7月24日-FormuMaxGelcompanyGeneMarkbioGenWayGloboZymesHeliosHMGBiotechHybrigenicsHycult BiotechIBA Life SciencesImmundiagnostikImmun... 查看更多
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2021-08-14
近年来，二代测序（NGS）以其快速、高准确率和低成本的优势逐渐替代了一代测序，不断蓬勃发展。市场中上主流的 NGS 平台包括 IlluminaSolexa、Roche 454、ABI SOLID 和 Life Ion Torrent。NGS 使基因检测产业化成为了可能，现已广泛应用于产前诊断、肿瘤及多种遗传病的预防与治疗。为了得到良好准确的测序结果，减少测序过程中不必要的尝试，降低测序成本，上机测序前要求必须了解测序文库样品的大小... 查看更多
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2021-07-22
NextSeq500台式二代测序系统是由北京安麦格贸易有限公司代理或销售的Illumina品牌的仪器，产品来源于美国。北京安麦格贸易有限公司是中国最权威的NextSeq500台式二代测序系统销售服务商之一，在北京等地方销售NextSeq500台式二代测序系统已经多年。同时，生物在线为您提供众多企业NextSeq500台式二代测序系统仪器产品及图片，以便挑选到性价比高，合适的NextSeq500台式二代测序系统产品 查看更多
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2021-07-23
SNaPshot技术是美国应用生物公司（ABI）开发，是一种基于荧光标记单碱基延伸原理的分型技术，也称小测序，主要针对中等通量的SNP分型项目。... 查看更多
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2021-08-06
2016年12月19日，美国食品和药物管理局（FDA）批准了Foundation Medicine公司的FoundationFocus CDxBRCA产品，成为市场上第一个基于二代测序的伴随诊断试剂盒。该产品被批准用于鉴定携带BRCA突变的晚期卵巢癌患者，这些患者更易对Clovis Oncology公司生产的PARP抑制剂Rubraca（rucaparib）有反应。与此同时，FDA加速批准了Rubraca这一新药，该药物适用于已经用两种... 查看更多
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2021-08-18
第二代测序技术的核心思想是边合成边测序（Sequencing by Synthesis)，即通过捕捉新合成的末端的标记来确定DNA的序列，现有的技术平台主要包括Roche/454 FLX、Illumina/Solexa Genome Analyzer和Appl 查看更多
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2019-01-29
高通量二代测序系统是由北京安麦格贸易有限公司代理或销售的Illumina品牌的仪器，产品来源于美国。北京安麦格贸易有限公司是中国最权威的高通量二代测序系统销售服务商之一，在北京等地方销售高通量二代测序系统已经多年。同时，生物在线为您提供众多企业高通量二代测序系统仪器产品及图片，以便挑选到性价比高，合适的高通量二代测序系统产品 查看更多
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2019-04-24
2016年度国家杰出青年科学基金建议资助项目申请人名单公布啦 来源： 查看手机网址扫一扫!扫一扫! ... 查看更多
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2019-04-24
前 言 近日，由复旦大学王建华教授领衔，上海交通大学医学院陆劲松教授、孟祥军教授、侯照远研究员作为共同通讯作者，上海交通大学医学院王莹莹为作者，在 The Journal of Clinical Investigation 期刊发表了有关乳腺癌进展新分子机制。 JCI 影响因子 13.251。下面就带大家一起看一下这篇肿瘤高分文章的详细内容。 研究背景 乳腺癌是威胁女性健康的普遍的一种恶性肿瘤。目前虽然有一些针对性治疗方案，但乳腺癌... 查看更多
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请问重组质粒PCR有目的条带双酶切没有目的条带是什么原因? 实验...123
momo6022018792021-08-01
利用NheI和HindIII双酶切插入目的片段，为什么双酶切有目的片段和切开的质粒，测序却没有？
并且测序后在NheI位点后的序列变成了-GGCTAGGTAC-Kpn位点（CGTTTAAACTTAAGCTTG消失。之前和之后的序列都相符），之间的怎么都没了？
【容量瓶能否贮存溶液】123
鳄鱼妹2021-07-27
构建重组质粒，在pSET4S质粒上插入一段基因的上下游同源臂，双酶切验证正确，同时以重组质粒为模板PCR扩增插入的片段，均与阳性对照一致，但测序结果进行NCBI比对，发现插入的一段序列不正确。而且这个重组质粒曾经构建出来过，因其中一个碱基突变所以重新构建，使用了primestar重新构建却总是测序不正确或者酶切不正确
为什么质粒和PCR产物需要拿去测序啊_问答详情_测序酶_二代测序...123
2017-09-29
刚进实验室，不懂
重组质粒酶切验证没有目的条带 生物科学 学术 科研...123
tdui2015-12-28
片段长度143bp，酶切位点kpn1和Hind3，连入pGL3b载体，测序引物公司用的pGL3-，第一次反向测序不成功，原因是质粒出现重叠峰，正向加测后成功，对比发现下游引物的酶切位点（Hind3）少了一个碱基（aagtcc变成aagct），重组质粒酶切切不出插入片段；之后将测序成功的质粒重新转化DH5α，再提质粒酶切还是切不出来。质粒小提试剂盒是Qiagen的，提取菌液1.5mL，浓度608.2ng/uL，酶切质粒2ug。
【之前构建的4个重组质粒里也有两个出现这样的问题（aagtcc变成agtcc），但是酶切能切出插入的片段】
目前问测序公司得到的答复是样品可能不是单克隆，测序结果是不准确的，建议重新挑取单克隆测序。
不知道还有没有别的方法？
【之前构建的4个重组质粒里也有两个出现这样的问题（aagtcc变成agtcc），但是酶切能切出插入的片段】
目前问测序公司得到的答复是样品可能不是单克隆，测序结果是不准确的，建议重新挑取单克隆测序。
不知道还有没有别的方法？
载体构建,菌落PCR酶切鉴定都正确,测序无目的片段 生物信息学讨论...123
xiaoyuer66882021-07-25
蛋白质的酶水解过程研究123
℡欠诚灬2017-10-03
●目前用于蛋白质肽链断裂的蛋白水解酶（proteolytic enzyme）或称蛋白酶（proteinase）已有十多种。
●应用酶水解多肽不会破坏氨基酸，也不会发生消旋化。水解的产物为较小的肽段。向左转|向右转
●应用酶水解多肽不会破坏氨基酸，也不会发生消旋化。水解的产物为较小的肽段。向左转|向右转
DNA测序的原理?基因组测序的原理?这两个有什么区别吗,具体查字典...123
小飞ur52017-10-03
高通量测序技术（High-throughput sequencing）又称“下一代”测序技术（Next-generation sequencing technology），以能一次并行对几十万到几百万条DNA分子进行序列测定和一般读长较短等为标志。
根据发展历史、影响力、测序原理和技术不同等，主要有以下几种：大规模平行签名测序（Massively Parallel Signature Sequencing, MPSS)、聚合酶克隆（Polony Sequencing）、454焦磷酸测序（454 pyrosequencing）、Illumina (Solexa) sequencing、ABI SOLiD sequencing、离子半导体测序（Ion semiconductor sequencing）、DNA 纳米球测序 （DNA nanoball sequencing）等。 基因分析仪(即DNA测序仪)，采用毛细管电泳技术取代传统的聚丙烯酰胺平板电泳，应用该公司专利的四色荧光染料标记的ddNTP(标记终止物法)，因此通过单引物PCR测序反应，生成的PCR产物则是相差1个碱基的3'末端为4种不同荧光染料的单链DNA混合物，使得四种荧光染料的测序PCR产物可在一根毛细管内电泳，从而避免了泳道间迁移率差异的影响，大大提高了测序的精确度。由于分子大小不同，在毛细管电泳中的迁移率也不同，当其通过毛细管读数窗口段时，激光检测器窗口中的CCD(charge-coupled device)摄影机检测器就可对荧光分子逐个进行检测，激发的荧光经光栅分光，以区分代表不同碱基信息的不同颜色的荧光，并在CCD摄影机上同步成像，分析软件可自动将不同荧光转变为DNA序列，从而达到DNA测序的目的。分析结果能以凝胶电泳图谱、荧光吸收峰图或碱基排列顺序等多种形式输出。
根据发展历史、影响力、测序原理和技术不同等，主要有以下几种：大规模平行签名测序（Massively Parallel Signature Sequencing, MPSS)、聚合酶克隆（Polony Sequencing）、454焦磷酸测序（454 pyrosequencing）、Illumina (Solexa) sequencing、ABI SOLiD sequencing、离子半导体测序（Ion semiconductor sequencing）、DNA 纳米球测序 （DNA nanoball sequencing）等。 基因分析仪(即DNA测序仪)，采用毛细管电泳技术取代传统的聚丙烯酰胺平板电泳，应用该公司专利的四色荧光染料标记的ddNTP(标记终止物法)，因此通过单引物PCR测序反应，生成的PCR产物则是相差1个碱基的3'末端为4种不同荧光染料的单链DNA混合物，使得四种荧光染料的测序PCR产物可在一根毛细管内电泳，从而避免了泳道间迁移率差异的影响，大大提高了测序的精确度。由于分子大小不同，在毛细管电泳中的迁移率也不同，当其通过毛细管读数窗口段时，激光检测器窗口中的CCD(charge-coupled device)摄影机检测器就可对荧光分子逐个进行检测，激发的荧光经光栅分光，以区分代表不同碱基信息的不同颜色的荧光，并在CCD摄影机上同步成像，分析软件可自动将不同荧光转变为DNA序列，从而达到DNA测序的目的。分析结果能以凝胶电泳图谱、荧光吸收峰图或碱基排列顺序等多种形式输出。
SNP数据构建系统进化树123
爆儿███2b揯2017-10-02
1.TaqMan探针法 针对染色体上的不同SNP位点分别设计PCR引物和TaqMan探针，进行实时荧光PCR扩增。探针的5’-端和3’-端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。当溶液中存在PCR产物时，该探针与模板退火，即产生了适合于核酸外切酶活性的底物，从而将探针5’-端连接的荧光分子从探针上切割下来，破坏两荧光分子间的PRET，发出荧光。通常用于少量SNP位点分析。
2.SNaPshot法 该技术由美国应用生物公司（ABI）开发，是基于荧光标记单碱基延伸原理的分型技术，也称小测序，主要针对中等通量的SNP分型项目。在一个含有测序酶、四种荧光标记ddNTP、紧临多态位点5’-端的不同长度延伸引物和PCR产物模板的反应体系中，引物延伸一个碱基即终止，经ABI测序仪检测后，根据峰的移动位置确定该延伸产物对应的SNP位点，根据峰的颜色可得知掺入的碱基种类，从而确定该样本的基因型。对于PCR产物模板可通过多重PCR反应体系来获得。通常用于10-30个SNP位点分析。
2.SNaPshot法 该技术由美国应用生物公司（ABI）开发，是基于荧光标记单碱基延伸原理的分型技术，也称小测序，主要针对中等通量的SNP分型项目。在一个含有测序酶、四种荧光标记ddNTP、紧临多态位点5’-端的不同长度延伸引物和PCR产物模板的反应体系中，引物延伸一个碱基即终止，经ABI测序仪检测后，根据峰的移动位置确定该延伸产物对应的SNP位点，根据峰的颜色可得知掺入的碱基种类，从而确定该样本的基因型。对于PCR产物模板可通过多重PCR反应体系来获得。通常用于10-30个SNP位点分析。
质粒分别酶切均有正确条带,但双酶切只有一条条带,这是怎么回事?123
sunshinewfu2021-08-05
两个基因大小分别230kb和450kb，酶切后，450kb的有目的条带，但很弱，230kb的质粒条带亮，其下方有一很微弱条带，用的酶分别是：Ncol和Spel体系是（Takara，两个酶切体系不同，用的官网推荐体系）：
NcoI1μl
Spel1μl
10×KBuffer2μl
0.1%BSA2μl
DNA3ul
灭菌水upto20μl37℃4h电泳1h
通过检测SNP位点确定等位基因的基因型的方法与流程123
地球军54612017-10-02
1.TaqMan探针法 针对染色体上的不同SNP位点分别设计PCR引物和TaqMan探针，进行实时荧光PCR扩增。探针的5’-端和3’-端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧光基团。当溶液中存在PCR产物时，该探针与模板退火，即产生了适合于核酸外切酶活性的底物，从而将探针5’-端连接的荧光分子从探针上切割下来，破坏两荧光分子间的PRET，发出荧光。通常用于少量SNP位点分析。
2.SNaPshot法 该技术由美国应用生物公司（ABI）开发，是基于荧光标记单碱基延伸原理的分型技术，也称小测序，主要针对中等通量的SNP分型项目。在一个含有测序酶、四种荧光标记ddNTP、紧临多态位点5’-端的不同长度延伸引物和PCR产物模板的反应体系中，引物延伸一个碱基即终止，经ABI测序仪检测后，根据峰的移动位置确定该延伸产物对应的SNP位点，根据峰的颜色可得知掺入的碱基种类，从而确定该样本的基因型。对于PCR产物模板可通过多重PCR反应体系来获得。通常用于10-30个SNP位点分析。
2.SNaPshot法 该技术由美国应用生物公司（ABI）开发，是基于荧光标记单碱基延伸原理的分型技术，也称小测序，主要针对中等通量的SNP分型项目。在一个含有测序酶、四种荧光标记ddNTP、紧临多态位点5’-端的不同长度延伸引物和PCR产物模板的反应体系中，引物延伸一个碱基即终止，经ABI测序仪检测后，根据峰的移动位置确定该延伸产物对应的SNP位点，根据峰的颜色可得知掺入的碱基种类，从而确定该样本的基因型。对于PCR产物模板可通过多重PCR反应体系来获得。通常用于10-30个SNP位点分析。
PCR技术要求使用耐高温的DNA聚合酶,这种酶要能忍受93℃左右的...123
末日审判丶济璬2017-10-03
PCR程延伸阶段温度升72摄氏度左右高温度所溶液四种脱氧核苷酸需要耐高温Taq DNA聚合酶作用据碱基互补配原则合新DNA链
【专题讨论】酶切、PCR结果正确,但是测序不对,Why? 核酸基因...123
一颗猪肉丸2016-02-28
用takara的in-fusion方法做了个重组质粒，如左图PCR验证，右起第二道是空载质粒为模板的对照。右图是酶切验证，两个图片结合起来觉得除了第四个单克隆外，其他几个应该都可能是阳性克隆。结果送了1，2两个样品后测序的结果都不对。为什么会这样。
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