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abfrontier/Exonuclease III/Exonuclease III, 5,000 U/2170B
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제품특징
□ 농도 100~300 U/㎕
□ 형상
| 25 mM | Tris-HCl (pH8.0) |
| 50 mM | KCl |
| 0.5 mM | DTT |
| 50% | Glycerol |
□ 보존 -20℃
(6개월 이상의 장기보존의 경우는 -80℃에서 동결보존)
□ 첨부 Buffer 조성 (10×)
| 500 mM | Tris-HCl (pH8.0) |
| 50 mM | MgCl2 |
| 100 mM | 2-Mercaptoethanol |
□ 기원
Escherichia coli BE 257/pSGR 3 (B. Weiss박사로부터 공여)
□ 제품설명
본 효소는 DNA의 phosphodiester 결합의 가수분해를 촉매함으로써 이중가닥 DNA의 3’- OH 말단으로 부터 5’-mononucleotide를 유리시키는 3’→5’exonuclease이다. DNA의 3’말단이 OH가 아닌 경우는 3’-phosphatase로서, apurinic acid, apyrimidic acid 부위에 대해서는 phosphodiester 결합을 절단하는 AP endonuclease로서 작용하고, RNase H의 활성도 갖는다.본 효소는 dsDNA에 대한 특이성이 극히 높고, 평활말단, 3’-recessed end, 그리고 nicking site로부터 분해가 가능하지만, 3’-돌출말단은 분해하지 않는다(사용상의 주의 참조). 따라서, 다른 말단을 형성하는 제한효소로 2중 절단(double digestion)하므로써 한쪽 방향으로 부터의 분해가 가능하다.최종 생성물은 이중가닥DNA의 상보 DNA와 5’- P mononucleotide 이다.본 효소의 염기서열 특이성은 BAL31 nuclease에 비하여 낮지만, GC rich site에서 반응이 정지하는 빈도가 적기 때문에 DNA의 deletion 제작에 편리하다.
□ 활성의 정의
제한효소 처리 송아지 흉선 DNA를 기질로 하여, 37℃, pH8.0에서 30분 동안 1 nmol의 산가용성 분해물을 생성하는 효소활성을
1 U으로 한다.
□ 활성 측정용 반응액 조성
| 50 mM | Tris-HCl (pH8.0) |
| 5 mM | MgCl2 |
| 10 mM | 2-Mercaptoethanol |
| 300 μM | 기질 DNA |
□ 순도
- 5 U의 본 효소와 1 ㎍의 closed circular (RF I) фX174 DNA를 37℃, 1시간반응하여도 DNA의 전기영동 패턴에 변화가 없다.- 50 U의 본 효소와 1 ㎍의 pHSG298-Pst I 분해물을 37℃, 30분간 반응하여도 DNA의 전기영동 패턴에 변화가 없다.
□ 사용상의 주의
- 효소의 성질상 DNA 말단이 3’돌출형이라도 그 말단의 형상과 서열에 따라서 기질로써 분해되는 경우가 있다. 분해되는 것이 확인된 제한효소 절단 말단의 예
1. 염기 돌출형 (Eam1105 I 등)2. 염기 돌출형 (Pvu I, Sac II 등)3. 염기 돌출형 (Sfi I 등)4. 염기 돌출형 (Apa I 절단 말단은 분해되는 것이 확인되어 있다.또 Ban II, BstX I도 서열에 따라서는 분해될 가능성이 있다)
□ 용도
- 이중가닥 DNA 단편 부분분해에 의한 DNA polymerase의 기질이 되는 일부단일가닥 DNA의 생성 (생성된 DNA는 dideoxy법에 의한 DNA의 염기서열 결정에 사용이 가능하다)- 단일가닥 DNA 특이적 nuclease (S1 또는 Mung Bean Nuclease)와의 병용에 의한 DNA단편 결실 제작본 효소는 이중가닥 DNA에 고도의 특이성을 갖고 있으므로, 이중가닥 DNA 절단단편 (예를 들면 EcoR I-Pst I 단편)에 대해서는,
한쪽 (EcoR I 쪽)방향에서만의 결실을 제작할 수 있다.- DNA - 단백질의 상호 작용의 해석
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蚂蚁淘（www.ebiomall.cn）是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台，
该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁
淘搜索全球供应信息，找到合适的产品后在蚂蚁淘下单，然后蚂蚁淘的海外买手进行跨境采购、
运输到中国口岸，最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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2018-12-26
For Protein Concentration Determination of Cell CultureDecant medium from 10cm dish of adherent cells and rinse plate rapidly with phosphate-buffered saline (P 查看更多
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2021-07-28
SABC(Strept Avidin-Biotin Complex)法是一种显示组织和细胞中抗原分布的简便而敏感的免疫组化染色方法，是众多免疫组织化学方法的一种。... 查看更多
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2021-07-23
该软件可用于常规的影像分析，免疫荧光和免疫组化中组织细胞和染色的组织切片中的生物形态分析，组织培养和具有与流式细胞相似的工作台的细胞培养。该软件可以显示单个细胞，多细胞结构和宏观生物形态的特点的多种测量参数通过散点图上的蜂窝数据。以阴性对照为基础的不同分析背景上的 cut－off 值可以被设定以确定阴阳细胞比例，结构等。圈选功能可以确定感兴 查看更多
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2018-12-26
一、设备和试剂1．设备① 电泳电源Mini-PROTEAN 3 Elecreophoresis Cell,Mini Teans-Blot Module,and PowerPac Basic Power Supply (BIO-RAD,Catalog#165-3323)② 电泳仪及附件Mini-PROTEAN 3 El 查看更多
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2018-12-26
Troubleshooting Tips for Western ImmunoblottingThe following tips can be used to overcome the most common problems encountered during Western blotting. Smeared 查看更多
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2021-09-13
Lysis buffer.The choice of lysis buffer depends on what the cells were labeled with and whether you want to obtain an active kinase. The lowest background is o 查看更多
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2021-07-21
2014 年全球癌症报告显示，近年来我国胃癌新增病例和死亡人数均居世界首位，全球接近 50% 的新发胃癌病例来自中国。 然而，我国对于胃癌的诊断、治疗以及患者预后预测方面的规范还亟需完善。 对于病理医师而言，除了给患者提供规范化和信息详尽的病理报告之外，还需要对胃癌组织进行相关标志物的免疫组化检测，从而对胃癌患者的个体化治疗和预后预测提供依据。胃 查看更多
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2021-09-10
Author: Nanci DonackiSource: Contributed by Nanci DonackiReagents and MaterialsPBSPBS: 0.05M EDTAPBS: 0.01% thimerosalConjugate Storage BufferSATADMFHydroxylam 查看更多
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2018-12-26
Western免疫印迹（Western Blot）是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白，可用相应抗体作为一抗进行检测，对新基因的表达产物，可通过融合部分的抗体检测。原理与Sou 查看更多
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2018-12-26
Grow a 2 ml culture, 24 hr. at 30oC in selective media When culture is ready, use it to inoculate about 55 ml (50 ml plus 5 for O.D.600 readings) of selective 查看更多
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2021-07-15
确定肿瘤的类型时，检测肿瘤细胞的增殖活性时，在某些肿瘤的组织病理诊断中，借助于检测肿瘤细胞表面或细胞内的一些特定的分子，称为肿瘤免疫组织化学标记物。确定肿瘤的类型，除了依靠其临床表现、影像学和形态学特点，还借助于检测肿瘤细胞表面或细胞内的一些特定的分子，例如通过免疫... 查看更多
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2021-09-08
Antibody LabelingThin sections of biological material, mounted on specimen grids, can be easily labeled by floating them, section-side down, on small drops of 查看更多
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求助:免疫组化染色低表达和高表达的划分 肿瘤医学 专业医生...123
babies32021-07-20
如题，做了免疫组化，分析趋势的时候发现，总共染色强度0~,3分，着色百分率0~4分，最后相乘0~12...
免疫组化一张片子多个样品可以同时染几个不同抗体吗_问答详情_...123
苹果Nq02021-07-25
免疫组化是利用抗原与抗体间的特异结合原理和特殊的标记技术，对组织和细胞内的特定抗原、抗体进行定位、定性、定量的一们技术。我们都是先进行免疫组化，在DAB染色后进行HE染色。既能看到免疫组化的结果，又能看到细胞的形态，CD34+免疫组化染色后是棕色的颗粒，效果很好。
1）做免疫组化的片子最好不要同时做HE染色，因为那样会掩盖阳性着色的结果；而且用苏木素复染细胞核也是淡染，若要在免疫组化的片子上观察形态学的改变，除非有非常典型的表现，一般是有很大的难度的。
2）你是培养的细胞做免疫组化吗？如果是的话，那就每个样本只有一张片子吧？唯一的办法是进行免疫双染，同时做CD34和AFP（甲胎蛋白）。我觉得后者阳性便可以或多或少的获得向肝细胞分化的证据。
3）用HE染色来识别造血干细胞向肝细胞分化，也就是说要看到肝细胞的典型形态学改变后才可以下结论。问题是：早期的肝细胞仅凭形细胞态学观察并不能很容易的被识别。病理大夫看组织切片，重要的是看其组织学结构，对肝细胞也是这样。如果单拿出来一个细胞，还是培养的细胞，染色后真的不容易区分。所以我觉得你设计的用HE染色来确定早期细胞向哪个方向分化不是很有说服力。
4）如果是切片，也就是说每个样本可以有多张切片，那可以在连续切片上分别染CD34和AFP，拍照时选择相同视野，也有一定说服力。但是还是不如双染法更可靠。
5）用双染最大的问题在于：这两者都表达在胞浆中，染色容易相互覆盖。所以在双染的方法选择上你还要再考虑一下，可不可以用免疫荧光双染？这样也很有说服力的
1）做免疫组化的片子最好不要同时做HE染色，因为那样会掩盖阳性着色的结果；而且用苏木素复染细胞核也是淡染，若要在免疫组化的片子上观察形态学的改变，除非有非常典型的表现，一般是有很大的难度的。
2）你是培养的细胞做免疫组化吗？如果是的话，那就每个样本只有一张片子吧？唯一的办法是进行免疫双染，同时做CD34和AFP（甲胎蛋白）。我觉得后者阳性便可以或多或少的获得向肝细胞分化的证据。
3）用HE染色来识别造血干细胞向肝细胞分化，也就是说要看到肝细胞的典型形态学改变后才可以下结论。问题是：早期的肝细胞仅凭形细胞态学观察并不能很容易的被识别。病理大夫看组织切片，重要的是看其组织学结构，对肝细胞也是这样。如果单拿出来一个细胞，还是培养的细胞，染色后真的不容易区分。所以我觉得你设计的用HE染色来确定早期细胞向哪个方向分化不是很有说服力。
4）如果是切片，也就是说每个样本可以有多张切片，那可以在连续切片上分别染CD34和AFP，拍照时选择相同视野，也有一定说服力。但是还是不如双染法更可靠。
5）用双染最大的问题在于：这两者都表达在胞浆中，染色容易相互覆盖。所以在双染的方法选择上你还要再考虑一下，可不可以用免疫荧光双染？这样也很有说服力的
免疫组化检查多少钱?__123
游客军团ra2017-10-02
免疫组化根据所做的指标的个数收费，比如做10个就收10个免疫组化，每个收费40-160元左右（每个省的定价不一样）。
查出乳腺癌要及早做免疫组化检测什么是乳腺癌免疫组化检测_疾病_...123
丹儿淘气2021-08-10
在确诊乳腺癌的检查中，对穿刺活检和手术活检取得的组织，都要做常规病理检查。免疫组化是对取下的人体组织做进一步的处理，进行特殊的染色，这对于明确是不是癌症、是什么类型的乳腺癌有很大的帮助。如果常规病理尚不能确定肿块的性质，则需要进行免疫组化染色，以进一步明确疾病的性质。
IHC免疫组化常见问题分析,你的组织切片有遇到这些问题吗?_染色123
知识就是命运2021-08-06
细胞衰老β半乳糖苷酶染色试剂盒_细胞衰老β半乳糖苷酶染色试剂盒【价 ...123
陈林木2016-06-28
有没有朋友使用碧云天的细胞衰老β-半乳糖苷酶染色试剂盒做过细胞衰老，本人小白，求相关细胞处理的过程及数据分析方法。贴壁细胞六孔板需要接种多少，染色后怎样计数进行数据处理。谢谢啦！
血凝块中DNA的抽提方法123
知识就是命运2021-07-22
免疫组织化学sp法和pv法的区别_123
时夏CD58EZ2021-08-11
一·第二代聚合酶两步法（ PV，En Vision) PV－9000是2001年投入美国市场的，它是将二抗抗体分子的单价Fab段与酶聚合在一起，与一抗结合后，直接用底物进行显色的方法。此方法由于简单、快速、敏感性强且避免了内源性生物素所造成的背景染色，以有逐渐取代其他免疫酶组织化学检测方法的趋势。 PV法操作流程 1石蜡切片脱蜡至PBS。 2 0.3％H2O2甲醇液或3％H2O2室温孵育20min。 3 抗原修复。 4滴加适当稀释的一抗370C 60min或40C过夜。 5 PBS洗涤。 6 酶标记二抗370C 30min或室温60min。 7 DAB(0.04%)显色（镜检控制），水洗、复染、封片二·sp法是一抗＋生物素化二抗＋HRP标记的链霉卵白素（HRP标记的亲和素） 一般的sp法步骤啊,具体如下： 1.烤片，68℃，20分钟, 2. 常规二甲苯脱蜡，梯度酒精脱水；二甲苯I 20min --二甲苯II 20 min--100%酒精I 10min --100%II 10min --95% 5min-- 80% 5min-- 70% 5min 3.阻断 灭活内源性过氧化物酶：3%H2O2 37℃孵育10min，PBS冲洗3X5min； 4. 抗原修复:置0.01M枸橼酸缓冲液（PH 6.0）中用煮沸（95℃，15－20min），自然冷却20min 以上，再用冷水冲洗缸子，加快冷却至室温，PBS冲洗3X5min。 5. 正常羊血清工作液封闭，37℃10 min，倾去勿洗. 6. 滴加一抗4℃ 冰箱孵育过夜，PBS冲洗3X5min（用PBS缓冲液代替一抗作阴性对照）； 滴加生物素标记二抗, 37℃孵育30min, PBS冲洗3X5min; 7. 滴加辣根过氧化物酶标记的链霉素卵白素工作液，37℃孵育30min, PBS冲洗3X5min; 8. DAB/ H2O2反应染色，自来水充分冲洗后， 苏木素复染，常规脱水，透明，干燥，封片。三·检测试剂盒 灵敏度高而极易控制背景的检测系统试剂盒是最为理想也是免疫组化染色优劣的关键，根据免疫组化技术发展至今PV系列及SP试剂盒更优于其它试剂盒。检测系统应与一抗来源相匹配，否则检不出目的物。如一抗是鼠单或多抗的，二抗就应该是羊或兔抗鼠的。四·建议选SP，亦可根据实验室习惯及在组织中的表达情况来定
ivisionTM免疫组化双染试剂盒 产品中心 >> 诊断科研 >> 免疫组...123
LamJiYam2021-07-29
间接法、ABC法和UltraVision法免疫组化染色效果的比较123
qq3312128462021-08-01
【求助】请问免疫组化中核蛋白为什么在细胞浆染色? 生理生化与...123
dsfM42017-10-02
免疫组化中，所染色的蛋白的位置与该蛋白的特性有关系。在现有所研究的蛋白中，不少蛋白存在核转位的情况， 也就是说当细胞培养的环境或者刺激的因素不同，该蛋白会出现从胞浆到细胞核的表达位置的改变。有时候表达不变仅仅是从胞浆转位到细胞核，有时候还伴有表达的上调，比如nf-kb。
SANTA CRUZ公司的免疫组化试剂盒好染色吗？_问答详情_蚂蚁淘,...123
beatingheart2003-09-26
我打算从中山公司定SANTACRUZ公司的mmp-9抗体,但是听师姐说这个公司
的抗体不容易染色,哪为同仁有这方面的经验?另外基因公司卖的cellsignalingtechnology的抗体要1875元,而中山公司卖的这个抗体只有800多,其中差距在哪里?请赐教
的抗体不容易染色,哪为同仁有这方面的经验?另外基因公司卖的cellsignalingtechnology的抗体要1875元,而中山公司卖的这个抗体只有800多,其中差距在哪里?请赐教
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