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更新于 2021-07-30
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更新于 2021-07-29
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更新于 2021-07-27
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更新于 2021-07-26
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更新于 2021-07-23
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更新于 2021-07-21
C18柱脱盐：有人称其为简易反相柱，它对DNA有特异性的吸附，可以被有机溶解洗脱，但不会被水洗脱，所以能有效地去除盐分。它不能有效去除比目的片段短的小片段。实际上，它是一种脱盐的作用。这种方法一般不会对普通PCR反应产生影响。对于需要用于测序、克隆的引物不能使用这个级别。 ◆ OPC纯化： OPC纯化是根据DNA保护基（DMTr基）和Cartridge柱中树脂间的亲合力作用的原理进行纯化目的DNA片段。OPC法纯化的DNA纯度大于95%...
引物的OD数如何定量?
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更新于 2021-07-20
引物合成引物OD数是这样测定的：用紫外分光光度计，波长260nm，石英比色杯，光程为1厘米，测定溶液的光密度。测定时溶液的光密度最好稀释到0.2-1.0之间。DNA干粉用一定体积的水充分振荡溶解以后，用1ml水稀释测OD值。需要根据稀释倍数换算出母液的OD值。 ...
酶和酶作用底物
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更新于 2021-07-19
1.引物最好在模板cDNA的保守区内设计。2.引物长度一般在15~30碱基之间。3.引物GC含量在40%~60%之间，Tm值最好接近72℃。4.引物3′端要避开密码子的第3位。5.引物3′端不能选择A，最好选择T。6. 碱基要随机分布。7. 引物自身及引物之间不应存在互补序列。8. 引物5′ 端和中间△G值应该相对较高，而3′ 端△G值较低。9. 引物的5′端可以修饰，而3&p...
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