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Boston Biochem/Recombinant Human His6-PolyUb WT Chains (2-7,K48-linked), CF/UCH-230-100
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Boston Biochem/Recombinant Human His6-PolyUb WT Chains (2-7,K48-linked), CF/UCH-230-100
品牌 / 
Boston Biochem
货号 / 
UCH-230-100
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Recombinant Human His6-PolyUb WT Chains (2-7,K48-linked), CF Summary

Purity
>95%, by SDS-PAGE under reducing conditions and visualized by Colloidal Coomassie® Blue stain
Activity
Ubiquitin chains vary in length, linkage, and function. K48-linked His6-Poly-Ubiquitin Chains (Ub2-7) are ideal for investigating Ubiquitin-binding proteins and as substrates for Ubiquitin-specific isopeptidases. Reaction conditions will need to be optimized for each specific application. IMPORTANT: Heating this product in SDS-PAGE buffer or terminating reactions containing this product with heated SDS-PAGE buffer could lead to unexpected, high apparent molecular weight banding or smearing on gels that is not representative of product purity. For optimal results, we recommend incubation in SDS-PAGE buffer + DTT at <40 °c="" for="" 20="" minutes="" prior="" to="" gel="">
Source
E. coli-derived human Poly-Ubiquitin proteinContains a 6-His tag
Predicted Molecular Mass

19 kDa (Ub2), 29 kDa (Ub3), 38 kDa (Ub4), 48 kDa (Ub5), 58 kDa (Ub6), and 67 kDa (Ub7)

Product Datasheets

Product Datasheet
COA

Carrier Free

What does CF mean?

CF stands for Carrier Free (CF). We typically add Bovine Serum Albumin (BSA) as a carrier protein to our recombinant proteins.Adding a carrier protein enhances protein stability, increases shelf-life, and allows the recombinant protein to be stored at a more dilute concentration.The carrier free version does not contain BSA.

What formulation is right for me?

In general, we advise purchasing the recombinant protein with BSA for use in cell or tissue culture, or as an ELISA standard.In contrast, the carrier free protein is recommended for applications, in which the presence of BSA could interfere.

UCH-230

FormulationLyophilized from a solution in deionized water.
ReconstitutionReconstitute atup to 5mg/mL in an aqueous solution.
ShippingThe product is shipped at ambient temperature. Upon receipt, store it immediately at the temperature recommended below.
Stability & Storage:Use a manual defrost freezer and avoid repeated freeze-thaw cycles.
  • 12 months from date of receipt, -20 to -70 °C as supplied.
  • 3 months, -20 to -70 °C under sterile conditions after reconstitution.
Reconstitution Calculator

Reconstitution Calculator

The reconstitution calculator allows you to quickly calculate the volume of a reagent to reconstitute your vial. Simply enter the mass of reagent and the target concentration and the calculator will determine the rest.

=
÷

Background: Poly-Ubiquitin

Poly-Ubiquitin chains are composed of Ubiquitin monomers that are covalently linked through isopeptide bonds, which typically form between a lysine residue of one Ubiquitin molecule and the C-terminal glycine residue of another Ubiquitin molecule (1). Each human Ubiquitin monomer is 76 amino acids (aa) in length and shares 96% and 100% aa identity with yeast and mouse Ubiquitin, respectively (2). Seven of the 76 aa in Ubiquitin are lysine residues that can participate in poly-Ubiquitin chain formation. Linkage through specific lysine residues is thought to serve as a signal that affects protein degradation, signaling, trafficking, and other cellular processes (3-8).

Linkage specific poly-Ubiquitin chains are used to investigate mechanisms of chain recognition, binding and hydrolysis by the proteasome, deubiquitinating enzymes, E3 ligases or other proteins that contain ubiquitin-associated domains (UBAs) or ubiquitin-interacting motifs (UIMs). Lys48-linked chains are abundant in vivo and act as a universal signal for proteasomal degradation. This product is formed with His6-tagged wild-type human recombinant Ubiquitin and linkage-specific enzymes. This mixture of poly-Ubiquitin chains contains di-Ubiquitin and higher MW species; mono-Ubiquitin has been removed. The His6-tag is convenient for metal chelate affinity purification and immuno-detection using His6-specific antibodies.

References
  1. Scheffner, M. et al. (1995) Nature 373:81.
  2. Sharp, P.M. & W.-H. Li (1987) Trends Ecol. Evol. 2:328.
  3. Behrends, C. & J.W. Harper (2011) Nat. Struct. Mol. Biol. 18:520.
  4. Greene, W. et al. (2012) PLoS Pathog. 8:e1002703.
  5. Henry, A.G. et al. (2012) Dev. Cell 23:519.
  6. Tong, X. et al. (2012) J. Biol. Chem. 287:25280.
  7. Wei, W. et al. (2004) Nature 428:194.
  8. Zhang, J. et al. (2012) J. Biol. Chem. 287:28646.
Alternate Names
CEP80; HEL112; PolyUbiquitin; Poly-Ubiquitin; ribosomal protein S27a; RPS27A; S27A; UBA80; UBC; UBCEP1; UBCEP80

FAQs

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Reconstitution Buffers

Reconstitution Buffer 1 (PBS)

RB01
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Lysis Buffer Proteinase K25 ml 1M Tris pH 8.0 (FC 50mM) 100 mg dry Proteinase K (Sigma #2308)50 ml 0.25M EDTA (FC 25 mM) 4.75 查看更多>
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PHEM (500 mls) 2x 18.14 g Pipes 6.5 g Hepes 3.8 g EGTA 0.99 g MgSO4 pH 7.0 w/ KOHPBS (5x in 500 mls) 20.45 g NaCl 0.465 g KCl 10.142 g Na2HPO4*7 H2O 0.545 g KH 查看更多>
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The purity of the transgene DNA used for microinjection is critical for the successful production of transgenic founder mice. DNA impurities in the form of bac 查看更多>
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小弟就要进行荧光定量试验,所以在园子里面看了很多的资料?,真是似懂非懂,出现了很多的疑问,所以恳请各位指教一下,有些可能比较弱智,请各位不要见笑!非常感谢!

1.我知道一般缺省域值是3-15个循环荧光强度的标准方差的10倍,但是为什么公式是10×SD(6-15)?那仪器的本底荧光强度是前15个循环的荧光强度就算是baseline,那么仪器中用域值分析和用baseline分析有什么不同?域值能否改动?改动后的结果对于后续的分析有什么影响?一般什么时候需要改动?
2.所谓读板温度是不是就是每一部反应后检测荧光强度的步骤?是不是可以任意设定在某一步骤?譬如变性,退火,延伸甚至自己设定一个温度?
3.在做标准曲线的时候,对于标准品的要求是不是一般要求就是待扩增的目的片断,便于以后的扩增效率可比性?是不是这个也是购买的绝对标准品进行曲线作图的缺陷之一,虽然其绝对的定量已知?
4.在相对定量时候,如果内参和目的基因在同一管中进行扩增就是内参照法?不同管就是外参照法?是不是不太赞成内参照法,因为无法预知目的基因起始浓度,从而可能导致内参扩增效率远远大于目的基因而无法使用2-△△CT方法分析?
5.融解曲线的导出是不是在反应结束以后进行?融解曲线出现主峰异常增宽是什么原因导致?我还是不明白探针法是如何得出融解曲线的,主要是原理,因为染料法就是升高温度双链解链染料脱离?
6.如果用荧光染料方法进行试验,出现引物二具体很多,那么在NTC和加入模板的溶解曲线中dimer的峰值和模板中的峰值是否重叠?

敬请指教!非常感谢!
带荧光的染料含不含重金属

1.取10mg荧光微球液体置于合适大小的离心管中,加入4mlMES缓冲液,混匀,离心(12000r/min),倾倒上清。

2.加入1mlMES缓冲液,超声重悬。

3.在装有1.5mgEDC和3mgNHS的离心管中分别加入300μl和600μlMES缓冲液,都配制成浓度5mg/ml,混匀。

4.加入配置好的NHS溶液0.2ml,EDC溶液0.1ml,混匀。

5.离心(12000r/min),得不到稳定沉淀。

想请教各位高手,为什么我加EDC和NHS活化之后离心得不到沉淀,所用荧光微球粒径196nm



相关疾病:目前微球栓塞剂的研究为肿瘤治疗的热点之一,其疗效和适应症有待探讨.请有这方面经验的战友发表高见.理论上用作肝动脉栓塞微球的粒径应在40-200um之间,小于40um则有可能通过动静脉吻合进入静脉,大于......
原文:ClinicalExperiencewithPolymethylmethacrylateMicrosphereFillerComplications---见3楼附件Aesthetic......
碘化丙啶(propiolium iodide,PI)能嵌入DNA双螺旋中,可使荧光强度增加约20倍,以488nm波长激发,DNA/PI复合物最大的发射波长约为615nm。小鼠Lewis肺癌细胞DNA含量测定方法(1).从C57BL/6小鼠上切除肿块,在培养皿内用PBS冲洗。(2).去除结缔组织及,剪碎肿块。(3).小碎片移入1.20×38mm针,加压使其通过,于4℃条件下重悬细胞于HBSS中。(4).将200~300μL细胞悬液(5×105细胞/mL)中加入3mL PI(50μg/mL),染色3LL细胞,于4℃存放20~30分钟。(5).测定580~750nm之间的发射荧光,以去除末结合PI产生的激发光与发射光谱线之间的重叠部分。注:PI染色液:0.1%柠檬酸钠1000mL+PI 5mg + 1% Nonide P40水。2. 培养细胞DNA的流式细胞仪分析(1).从培养皿中吸去培养基,以HBSS冲洗二次。(2).加入PI5mL于培养皿中,在4℃放10分钟。(3).用吸管反复次打细胞,使细胞破坏,胞核释放出来,再行流式细胞仪分析。3. 完整细胞DNA的PI染色(1).70%乙醇固定的细胞悬液,离心,去固定液。(2).室温条件下加入PI染色一批细胞(105~106细胞/mL),时间为30分钟,然后行流式细胞仪分析。(二)吖啶橙染色1. DNA和RNA的鉴别染色利用吖啶橙的变色特性可鉴别DNA和RNA。吖啶橙作为一种荧光染料已被用于染色固定,非固定细胞核酸,或作溶酶体的一种标记。观察死亡细胞荧光变色性变化以及区别分裂细胞和静止细胞群体。虽然测定DNA和RNA含量时较难获得好的重复性结果,但该方法已被许多实验室广泛采用。方法如下:1)试剂:(1)溶液A:低温保存,稳定期约2周。Triton X-100(0.1%) 0.1mL,1mol/L HCL 8mL1mol/L NaCL 15ml蒸馏水76mL,P
我是一个新手。做了两次real-timePCR(SYBRGREENI)标准曲线都很差劲,请好心的大侠们帮忙指点迷津。

标准品是用质粒DNA做了。第一个图是按10倍梯度进行稀释,以10^3~10^9copy/μl7个浓度的标准模板系列作为标准品;第二个图是按10倍梯度进行稀释,以50~0.0005ng/ul6个浓度的标准模板系列作为标准品,得到的标准曲线的参数值分别是R^2=0.87998694<0.99,Slope=-1.403786(图一);R^2=0.9702126<0.99,slope=-1.5033078.

我应该从哪些方面来改进我的实验?紧急求助!
相关疾病:原发性肝癌肿瘤先天性卵巢发育不全综合征新研究表明,对不宜手术切除的肝细胞癌(HCC)和门静脉血栓形成病人,动脉内注射放射性90钇玻璃微球(加拿大渥太华MDSNordion公司的ThereSphere)似乎安全,而且耐受性好。  这种新治......
对照品和标准品的概念

经常对对照品与标准品的概念不清楚,有何区别,查了一下,得到如下结果:
对照品系指用于鉴别、检查、含量测定和校正检定仪器性能的标准物质,而标准品系指用于生物检定、抗生素或生物药品中含量或效价测定的标准物质,以效价单位(U)表示。
还是感觉不甚明了,是否标准品只用于生物方面?是否化学方面只能称对照品?标准品有什么要求?对照品有什么要求?

[url]http://www.cdda.gov.cn/index/zcfg_detail.asp?ID=62a[/url]
国家药品标准品、对照品系指国家药品标准中用于鉴别、检查、含量测定、杂质和有关物质检查等标准物质,它是国家药品标准不可分割的组成部分。国家药品标准物质是国家药品标准的物质基础,它是用来检查药品质量的一种特殊的专用量具;是测量药品质量的基准;也是做为校正测试仪器与方法的物质标准;在药品检验中,它是确定药品真伪优劣的对照,是控制药品质量必不可少的工具。
目前,中国药品生物制品检定所已能提供各类国家标准物质1242种,其中中药化学对照品288种,对照药材400种,两者占总数的一半以上,

http://www.chp.org.cn/2005gs/swfl/swfl.htm
国家标准品及生物参考品系指用于鉴别、检查含量或效价测定的标准物质,其制备与标定应符合“生物制品国家标准物质制备和标定规程”要求,并由国务院药品监督管理部门指定的机构分发。企业工作标准品或参考品必须经国家标准品或参考品标化后方能使用。
对照品系指用于生物制品理化等方面测定的特定物质,由生产单位采用与制品生产工艺相同的方法制备。对照品应尽可能与制品原液配方一致,稳定性较差的,可加不含对测定有干扰物质的适宜的稳定剂。对照品由国家药品检定机构审查认可,其标准应不低于制品的质量标准。

From:[url]http://www.pharm.sdu.edu.cn/peiyang/jiaoan/yaowufenxihx.doc[/url]
(3)标准品、对照品:是指用于鉴别、检查、含量测定的标准物质,均由国务院药品监督管理部门指定的单位制备、标定和供应。标准品系指用于生物测定、抗生素或生化药品中含量或效价测定的标准物质,一国际标准品进行标定;对照品出另有规定外,按干燥进行计算后使用。
标准品和对照品均附有使用说明书,质量要求,有效期和装量等。

From:[url]http://www.chp.org.cn/2005gs/swfl/swbz.htm[/url]
1定义
生物制品标准物质系指用于生物制品效价、活性或含量测定的或其特性鉴别、检查的生物标准品或生物参考物质。
2标准物质的种类
生物制品标准物质分为二类。
国家生物标准品系指用国际标准品标定的,或我国自行研制的(尚无国际生物标准品者)用于定量测定某一制品效价或毒性的标准物质,其生物活性以国际单位(IU)或以单位(U)表示。
国家生物参考品系指用国际参考品标定的,或我国自行研制的(尚无国际参考品者)用于微生物(或其产物)的定性鉴定或疾病诊断的生物试剂、生物材料或特异性抗血清;或指用于定量检测某些制品的生物效价的参考物质,如用于麻疹活疫苗滴度或类毒素絮状单位测定的参考品,其效价以特定活性单位表示,不以(IU)表示。

From:[url]http://www.proteomics.com.cn/msl/papers/Notice1.html[/url]
1 对照品与标准品概念不清
对照品与标准品是2个不同的概念,中国药典凡例中已有明确的定义:对照品系指用于鉴别、检查、含量测定和校正检定仪器性能的标准物质,而标准品系指用于生物检定、抗生素或生物药品中含量或效价测定的标准物质,以效价单位(U)表示。文献中常将2种概念混淆,认为对照品就是标准品,是1种物质2种提法而已[1,2],造成错误的原因,可能是有的药品既有对照品,又有标准品。例如,当用微生物法测定头孢克罗效价时,用头孢克罗标准品,用HPLC或UV法测定时,则用对照品;非那西丁当用作熔点校准物质时,用熔点标准品,测定含量时,用对照品。即使是同一种物质的标准品和对照品,它们的规格、标定方法以及用途都可能是不同的。
2 对照品或标准品混用
对照品或标准品混用,即将对照品或标准品用于不是其标定方法的含量测定,是药品检验中经常出现但未引起重视的一个问题[3]。尽管同一批对照品不同标定方法的含量有很好的相关性,但并不完全相同,有时差别会很大。如英国Glaxo公司提供的头孢呋肟酯对照品,HPLC标定为96.9%,供含量测定用;UV为98.8%,供溶出度测定。虽然中国药典凡例明确规定卫生部所发对照品仅用于正文中所规定的分析方法。但由于:(1)卫生部提供的对照品使用说明书不够详尽,大多无对照品质量要求及标定方法;(2)对对照品或标准品的正确使用缺乏认识;(3)日常科研中极难找到相应的对照品;(4)中国药典正文中也常存在对照品混用的问题,如常将含量测定用的标准品或对照品用于溶出度检查,而含量测定方法与溶出度分析方法又不同,故极易引起混用。
普通的节能灯,日光灯发出的光各种波长都有,波长范围很宽。激光单色性很好,波长范围很窄,波长650nm指的是这种激光笔发出的光波长在650nm附近很窄的范围里。可见光的波长范围在390—770纳米之间。红:770—622nm;橙:622—597nm;黄:597—577nm;绿:577—492nm;蓝靛:492—455nm;紫:455—390nm。650nm应该是红光。所以是红色光的激光笔。
对不同材料来说不同,绝大多数情况下,发射波长会随着激发波长的偏移而有所偏移。 对于固态物质,主要是因为分子与其它材料形成了π建 对于量子点溶液,激发波长也会显著导致发射光谱的不同。但是不是绝对的,比如对于Alex555分子,发射波长的便宜往往就相对较小,这是由于分子内部的能带结构所决定的。 如果是单纯的回答问题,答案是:有关。
SolidPhaseImmunoassays:HowtouseMagneticMicrospheresduringImmunoassaydevelopment

主题:固相表面免疫分析:在免疫分析产品研发中如何使用磁性微球
主讲人:SégolèneMahotPh.DPharm.D,伯乐Bio-Rad
内容简介:磁性微球的主要特性,及其在免疫分析应用中的相关使用技巧(如化学
发光免疫分析、磁酶免等)

4SeminarHaikou290307SMahot.part01.rar(295.0k)
大家好,我有个问题,非常迷惑,而且一直没得到确定答案。那就是我们试剂盒内配的标准品,分装后的保存条件,以及确切的保存时间有多长。我就发现一个问题,由于我们用的是半自动生化,每次定标后,用了几天后,质控......
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