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RayBiotech/Human Cytokine Array Q1000/8 Sample Kit/QAH-CAA-1000-1
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RayBiotech/Human Cytokine Array Q1000/8 Sample Kit/QAH-CAA-1000-1
品牌 / 
RayBiotech
货号 / 
QAH-CAA-1000-1
美元价:
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Antigen Information

Gene Symbols:
AREG | BDNF | BMP4 | BMP5 | BMP7 | CCL1 | CCL11 | CCL15 | CCL2 | CCL24 View more Hide

Assay Format

Number of Targets Detected:
80
Species Detected:
  • Human
Compatible Sample Types:
  • Cell Culture Supernatants
  • Cell Lysates
  • Other Body Fluids
  • Plasma
  • Serum
  • Tissue Lysates
Design Principle:
  • Sandwich-based
Method of Detection:
Fluorescence Laser Scanner
Quantitative/Semi-Quantitative:
  • Quantitative
Solid Support:
Glass Slide

Product Specifications

Size:
1, 2, or 4 Slide Kit (16 sub-arrays per slide)

Product Features

  • More cost-effective than traditional ELISA
  • High specificity and system reproducibility
  • Suitable for diverse sample types
  • Low sample volume requirement: 100 µL or less
  • Get results same day (6-hour processing time)
  • Well-suited for high throughput assays
  • Q Analyzer software provides one-step computation

Target Names

Scroll over each target protein for more information
Amphiregulin
  • Gene Symbol: AREG
  • Gene ID: 374
  • Accession #: P15514
  • ELISA Kit: RayBio Human AREG ELISA
BDNF
  • Gene Symbol: BDNF
  • Gene ID: 627
  • Accession #: P23560
  • ELISA Kit: RayBio Human BDNF ELISA
beta-NGF
  • Gene Symbol: NGF
  • Gene ID: 4803
  • Accession #: P01138
  • ELISA Kit: RayBio Human beta-NGF ELISA
bFGF
  • Gene Symbol: FGF2
  • Gene ID: 2247
  • Accession #: P09038
  • ELISA Kit: RayBio Human bFGF ELISA
BLC(CXCL13)
  • Gene Symbol: CXCL13
  • Gene ID: 10563
  • Accession #: O43927
  • ELISA Kit: RayBio Human BLC ELISA
BMP-4
  • Gene Symbol: BMP4
  • Gene ID: 652
  • Accession #: P12644
  • ELISA Kit: RayBio Human BMP-4 ELISA
BMP-5
  • Gene Symbol: BMP5
  • Gene ID: 653
  • Accession #: P22003
  • ELISA Kit: RayBio Human BMP-5 ELISA
BMP-7
  • Gene Symbol: BMP7
  • Gene ID: 655
  • Accession #: P18075
  • ELISA Kit: RayBio Human BMP-7 ELISA
EGF
  • Gene Symbol: EGF
  • Gene ID: 1950
  • Accession #: P01133
  • ELISA Kit: RayBio Human EGF ELISA
EGFR
  • Gene Symbol: EGFR
  • Gene ID: 1956
  • Accession #: P00533
  • ELISA Kit: RayBio Human EGFR ELISA
Eotaxin-1(CCL11)
  • Gene Symbol: CCL11
  • Gene ID: 6356
  • Accession #: P51671
  • ELISA Kit: RayBio Human Eotaxin-1 ELISA
Eotaxin-2(MPIF-2/CCL24)
  • Gene Symbol: Ccl24
  • Gene ID: 6369
  • Accession #: O00175
  • ELISA Kit: RayBio Human Eotaxin-2 ELISA
FGF-4
  • Gene Symbol: FGF4
  • Gene ID: 2249
  • Accession #: P08620
  • ELISA Kit: RayBio Human FGF-4 ELISA
FGF-7(KGF)
  • Gene Symbol: FGF7
  • Gene ID: 2252
  • Accession #: P21781
  • ELISA Kit: RayBio Human FGF-7 ELISA
GCSF
  • Gene Symbol: CSF3
  • Gene ID: 1440
  • Accession #: P09919
  • ELISA Kit: RayBio Human G-CSF ELISA
GDF-15
  • Gene Symbol: GDF15
  • Gene ID: 9518
  • Accession #: Q99988
  • ELISA Kit: RayBio Human GDF-15 ELISA
GDNF
  • Gene Symbol: GDNF
  • Gene ID: 2668
  • Accession #: P39905
  • ELISA Kit: RayBio Human GDNF ELISA
GM-CSF
  • Gene Symbol: CSF2
  • Gene ID: 1437
  • Accession #: P04141
  • ELISA Kit: RayBio Human GM-CSF ELISA
Growth Hormone
  • Gene Symbol: GH1
  • Gene ID: 2688
  • Accession #: P01241
  • ELISA Kit: RayBio Human GH ELISA
EG-VEGF(PK1)
  • Gene Symbol: PROK1
  • Gene ID: 84432
  • Accession #: P58294
  • ELISA Kit: RayBio Human EG-VEGF  ELISA
HB-EGF
  • Gene Symbol: HBEGF
  • Gene ID: 1839
  • Accession #: Q99075
  • ELISA Kit: RayBio Human HB-EGF ELISA
HGF
  • Gene Symbol: HGF
  • Gene ID: 3082
  • Accession #: P14210
  • ELISA Kit: RayBio Human HGF ELISA
I-309(TCA-3/CCL1)
  • Gene Symbol: CCL1
  • Gene ID: 6346
  • Accession #: P22362
  • ELISA Kit: RayBio Human I-309 ELISA
ICAM-1(CD54)
  • Gene Symbol: ICAM1
  • Gene ID: 3383
  • Accession #: P05362
  • ELISA Kit: RayBio Human sICAM-1 ELISA
IFN-gamma
  • Gene Symbol: IFNG
  • Gene ID: 3458
  • Accession #: P01579
  • ELISA Kit: RayBio Human IFN-gamma ELISA
IGF-1
  • Gene Symbol: IGF1
  • Gene ID: 3479
  • Accession #: P05019
  • ELISA Kit: RayBio Human IGF-1 ELISA
IGFBP-1
  • Gene Symbol: IGFBP1
  • Gene ID: 3484
  • Accession #: P08833
  • ELISA Kit: RayBio Human IGFBP-1 ELISA
IGFBP-2
  • Gene Symbol: IGFBP2
  • Gene ID: 3485
  • Accession #: P18065
  • ELISA Kit: RayBio Human IGFBP-2 ELISA
IGFBP-3
  • Gene Symbol: IGFBP3
  • Gene ID: 3486
  • Accession #: P17936
  • ELISA Kit: RayBio Human IGFBP-3 ELISA
IGFBP-4
  • Gene Symbol: IGFBP4
  • Gene ID: 3487
  • Accession #: P22692
  • ELISA Kit: RayBio Human IGFBP-4 ELISA
IGFBP-6
  • Gene Symbol: IGFBP6
  • Gene ID: 3489
  • Accession #: P24592
  • ELISA Kit: RayBio Human IGFBP-6 ELISA
IL-1 alpha(IL-1 F1)
  • Gene Symbol: IL1A
  • Gene ID: 3552
  • Accession #: P01583
  • ELISA Kit: RayBio Human IL-1 alpha ELISA
IL-1 beta(IL-1 F2)
  • Gene Symbol: IL1B
  • Gene ID: 3553
  • Accession #: P01584
  • ELISA Kit: RayBio Human IL-1 beta ELISA
IL-1 ra(IL-1 F3)
  • Gene Symbol: IL1RN
  • Gene ID: 3557
  • Accession #: P18510
  • ELISA Kit: RayBio Human IL-1 RA ELISA
IL-10
  • Gene Symbol: IL10
  • Gene ID: 3586
  • Accession #: P22301
  • ELISA Kit: RayBio Human IL-10 ELISA
IL-11
  • Gene Symbol: IL11
  • Gene ID: 3589
  • Accession #: P20809
  • ELISA Kit: RayBio Human IL-11 ELISA
IL-12 p40
  • Gene Symbol: IL12B
  • Gene ID: 3593
  • Accession #: P29460
  • ELISA Kit: RayBio Human IL-12 p40 ELISA
IL-12 p70
  • Gene Symbol: IL12A
  • Gene ID: 3592
  • Accession #: P29459
  • ELISA Kit: RayBio Human IL-12 p70 ELISA
IL-13
  • Gene Symbol: IL13
  • Gene ID: 3596
  • Accession #: P35225
  • ELISA Kit: RayBio Human IL-13 ELISA
IL-15
  • Gene Symbol: IL15
  • Gene ID: 3600
  • Accession #: P40933
  • ELISA Kit: RayBio Human IL-15 ELISA
IL-16
  • Gene Symbol: IL16
  • Gene ID: 3603
  • Accession #: Q14005
  • ELISA Kit: RayBio Human IL-16 ELISA
IL-17A
  • Gene Symbol: IL17A
  • Gene ID: 3605
  • Accession #: Q16552
  • ELISA Kit: RayBio Human IL-17A ELISA
IL-2
  • Gene Symbol: IL2
  • Gene ID: 3558
  • Accession #: P60568
  • ELISA Kit: RayBio Human IL-2 ELISA
IL-4
  • Gene Symbol: IL4
  • Gene ID: 3565
  • Accession #: P05112
  • ELISA Kit: RayBio Human IL-4 ELISA
IL-5
  • Gene Symbol: IL5
  • Gene ID: 3567
  • Accession #: P05113
  • ELISA Kit: RayBio Human IL-5 ELISA
IL-6
  • Gene Symbol: IL6
  • Gene ID: 3569
  • Accession #: P05231
  • ELISA Kit: RayBio Human IL-6 ELISA
IL-6 R
  • Gene Symbol: IL6R
  • Gene ID: 3570
  • Accession #: P08887
  • ELISA Kit: RayBio Human IL-6 sR ELISA
IL-7
  • Gene Symbol: IL7
  • Gene ID: 3574
  • Accession #: P13232
  • ELISA Kit: RayBio Human IL-7 ELISA
IL-8(CXCL8)
  • Gene Symbol: IL8
  • Gene ID: 3576
  • Accession #: P10145
  • ELISA Kit: RayBio Human IL-8 ELISA
Insulin
  • Gene Symbol: INS
  • Gene ID: 3630
  • Accession #: P01308
  • ELISA Kit: RayBio Human Insulin ELISA
MCP-1(CCL2)
  • Gene Symbol: CCL2
  • Gene ID: 6347
  • Accession #: P13500
  • ELISA Kit: RayBio Human MCP-1 ELISA
M-CSF
  • Gene Symbol: CSF1
  • Gene ID: 1435
  • Accession #: P09603
  • ELISA Kit: RayBio Human M-CSF ELISA
M-CSF R
  • Gene Symbol: CSF1R
  • Gene ID: 1436
  • Accession #: P07333
  • ELISA Kit: RayBio Human M-CSF R ELISA
MIG(CXCL9)
  • Gene Symbol: CXCL9
  • Gene ID: 4283
  • Accession #: Q07325
  • ELISA Kit: RayBio Human MIG ELISA
MIP-1 alpha(CCL3)
  • Gene Symbol: CCL3
  • Gene ID: 6348
  • Accession #: P10147
  • ELISA Kit: RayBio Human MIP-1 alpha ELISA
MIP-1 beta(CCL4)
  • Gene Symbol: CCL4
  • Gene ID: 6351
  • Accession #: P13236
  • ELISA Kit: RayBio Human MIP-1 beta ELISA
MIP-1 delta(CCL15)
  • Gene Symbol: CCL15
  • Gene ID: 6359
  • Accession #: Q16663
  • ELISA Kit: RayBio Human MIP-1 delta ELISA
NGFR(TNFRSF16)
  • Gene Symbol: NGFR
  • Gene ID: 4804
  • Accession #: P08138
  • ELISA Kit: RayBio Human NGF R ELISA
NT-3
  • Gene Symbol: NTF3
  • Gene ID: 4908
  • Accession #: P20783
  • ELISA Kit: RayBio Human NT-3 ELISA
NT-4
  • Gene Symbol: NTF4
  • Gene ID: 4909
  • Accession #: P34130
  • ELISA Kit: RayBio Human NT-4 ELISA
Osteoprotegerin(TNFRSF11B)
  • Gene Symbol: TNFRSF11B
  • Gene ID: 4982
  • Accession #: O00300
  • ELISA Kit: RayBio Human OPG ELISA
PDGF-AA
  • Gene Symbol: PDGFA
  • Gene ID: 5154
  • Accession #: P04085
  • ELISA Kit: RayBio Human PDGF-AA ELISA
PDGF-BB
  • Gene Symbol: PDGFB
  • Gene ID: 5155
  • Accession #: P01127
  • ELISA Kit: RayBio Human PDGF-BB ELISA
PLGF
  • Gene Symbol: PGF
  • Gene ID: 5228
  • Accession #: P49763
  • ELISA Kit: RayBio Human PLGF ELISA
RANTES(CCL5)
  • Gene Symbol: CCL5
  • Gene ID: 6352
  • Accession #: P13501
  • ELISA Kit: RayBio Human RANTES ELISA
SCF
  • Gene Symbol: KITLG
  • Gene ID: 4254
  • Accession #: P21583
  • ELISA Kit: RayBio Human SCF ELISA
SCF R(CD117/c-kit)
  • Gene Symbol: KIT
  • Gene ID: 3815
  • Accession #: P10721
  • ELISA Kit: RayBio Human SCF R ELISA
TGF alpha
  • Gene Symbol: TGFA
  • Gene ID: 7039
  • Accession #: P01135
  • ELISA Kit: RayBio Human TGF-alpha ELISA
TGF beta 1
  • Gene Symbol: TGFB1
  • Gene ID: 7040
  • Accession #: P01137
  • ELISA Kit: RayBio Human TGF-beta 1 ELISA
TGF beta 3
  • Gene Symbol: TGFB3
  • Gene ID: 7043
  • Accession #: P10600
TIMP-1
  • Gene Symbol: TIMP1
  • Gene ID: 7076
  • Accession #: P01033
  • ELISA Kit: RayBio Human TIMP-1 ELISA
TIMP-2
  • Gene Symbol: TIMP2
  • Gene ID: 7077
  • Accession #: P16035
  • ELISA Kit: RayBio Human TIMP-2 ELISA
TNF alpha
  • Gene Symbol: TNF
  • Gene ID: 7124
  • Accession #: P01375
  • ELISA Kit: RayBio Human TNF-alpha ELISA
TNF beta(TNFSF1B)
  • Gene Symbol: LTA
  • Gene ID: 4049
  • Accession #: P01374
  • ELISA Kit: RayBio Human TNF-beta ELISA
TNF RI(TNFRSF1A)
  • Gene Symbol: TNFRSF1A
  • Gene ID: 7132
  • Accession #: P19438
  • ELISA Kit: RayBio Human sTNFRI ELISA
TNF RII(TNFRSF1B)
  • Gene Symbol: TNFRSF1B
  • Gene ID: 7133
  • Accession #: P20333
  • ELISA Kit: RayBio Human sTNFRII ELISA
VEGF-A
  • Gene Symbol: VEGFA
  • Gene ID: 7422
  • Accession #: P15692
  • ELISA Kit: RayBio Human VEGF-A ELISA
VEGF-D
  • Gene Symbol: FIGF
  • Gene ID: 2277
  • Accession #: O43915
  • ELISA Kit: RayBio Human VEGF-D ELISA
VEGFR2
  • Gene Symbol: KDR
  • Gene ID: 3791
  • Accession #: P35968
  • ELISA Kit: RayBio Human VEGF R2 ELISA
VEGFR3
  • Gene Symbol: FLT4
  • Gene ID: 2324
  • Accession #: P35916
  • ELISA Kit: RayBio Human VEGF R3 ELISA

Species Detected

Human

Application Notes

Suggested Application
  • Multiplexed Protein Detection
  • Biomarker Screening
  • Identifying Key Factors
  • Confirming Biological Process
  • Biomarker Validation
  • Validation of Antibody Array Results
  • Quantitative Protein Detection
  • Establishing Normal Range
Kit Components
  • Human Cytokine Array Q1000 Slide(s)
  • Blocking Buffer
  • Wash Buffer 1
  • Wash Buffer 2
  • Lyophilized Standard Mix
  • Biotinylated Detection Antibody Cocktail
  • Streptavidin-Conjugated Fluor
  • Slide Washer/Dryer
  • Adhesive Plastic Strips
  • Manual
Other Materials Required
  • Distilled or deionized water
  • Small plastic boxes or containers
  • Pipettors, pipette tips and other common lab consumables
  • Orbital shaker or oscillating rocker
  • Aluminum foil
  • Gene microarray scanner or similar laser fluorescence scanner
View Compatible Laser ScannersDon"t have a compatible scanner? RayBiotech now offers FREE scanning service for all RayBio glass slide antibody arrays! Learn More
Protocol Outline
  1. Dry the glass slide
  2. Prepare Standards
  3. Block array surface
  4. Incubate with Samples and Standards
  5. Incubate with Biotinylated Detection Antibody Cocktail
  6. Incubate with Streptavidin-Conjugated Fluor
  7. Disassemble the glass slide
  8. Scan with a gene microarray laser scanner
  9. Perform densitometry and analysis

Storage/Stability

For best results, store the entire kit frozen at -20°C upon arrival. Stored frozen, the kit will be stable for at least 6 months which is the duration of the product warranty period. Once thawed, store array slide(s), standard mix, detection antibody cocktail, and Cy3-Conjugated Streptavidin at -20°C and all other reagents undiluted at 4°C for no more than 3 months.
  1. Massee M., Chinn K., Lim J., et al. Type I and II Diabetic Adipose-Derived Stem Cells Respond In Vitro to Dehydrated Human Amnion/Chorion Membrane Allograft Treatment by Increasing Proliferation, Migration, and Altering Cytokine Secretion. Adv Wound Care (New Rochelle). 2016 Feb 1;5(2):43-54 Species: HumanSample type: Conditioned Media
  2. Ciavarella S., Caselli A., Tamma A., et al. A peculiar molecular profile of umbilical cord-mesenchymal stromal cells drives their inhibitory effects on multiple myeloma cell growth and tumor progression. Stem Cells Dev. 2015 Jun 15;24(12):1457-70. doi: 10.1089/scd.2014.0254. Species: HumanSample type: Conditioned Media
  3. Massee M., Chinn K., Lei J., et al. Dehydrated human amnion/chorion membrane regulates stem cell activity in vitro. J Biomed Mater Res B Appl Biomater. 2015 Jul 14. doi: 10.1002/jbm.b.33478Species: HumanSample type: Conditioned Media

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公司简介
蚂蚁淘(www.ebiomall.cn)是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台, 该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁 淘搜索全球供应信息,找到合适的产品后在蚂蚁淘下单,然后蚂蚁淘的海外买手进行跨境采购、 运输到中国口岸,最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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一、原理 异染色质在整个分裂间期及分裂期都是浓缩的,因而其大小较为恒定。它们通常位于着丝粒附近,或在染色体臂上呈现“团块”,这些染色质主要由C显带技术呈现,故称为C带。CBG即C带、Ba(OH)2、Giemsa的简写。C带的根本特征是选择性地从染色体臂抽取DNA,但在C带区有很强抗性,仍保留大部分DNA, 查看更多>
一、原理 非显带染色体除可根据形态分辨部分染色体,其他多数染色体难以确认,而显带技术则可使染色体纵向长度上出现不同带纹,以辨认全部染色体。GTG即G带,Trypsin(胰酶),Giemsa的简写。Giemsa染料是噻嗪--曙红染料,染色体的着色有赖于在原位形成噻嗪--曙红(2∶1)的沉淀物。着色首先取决于二 查看更多>
常见问题
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fcm常用的荧光染料有哪些
想问一下各位大侠提质粒时用的是那个公司的试剂盒呀?我的扩增荧光增量一直不是很高,而且作为被动参比的ROX信号比FAM的基线部分高很多,不知是不是质粒的质量不好造成的。
所以想请大家给推荐一个效果好的最好是国产的质粒提取试剂盒。
多谢!
一般情况,不管荧光染料还是其他染料,只要不是活性染料和还原染料,基本上都不存在失效问题。
你的荧光染料具体是哪一种?你可以通过染色试验来决定是否有效啊?一般荧光染料染色后,都会呈现明亮的颜色,比一般同样颜色要亮的多。只要能染上、只要有亮度,就是没失效。
Forsiden regjeringen.no123
猴岛小寳Q冇M022021-07-31
fitc荧光染料能做流失elisa不好做
还可以标记细胞内的某些蛋白吧
染料有lucifer!Gfp rfp 地高辛标记的碱性磷酸酶
做荧光定量PCR的TAKARA的SYBR荧光染料保存于-20摄氏度了,说明书上说要放于4摄氏度保存,放-20的话会影响SYBR荧光染料的效果。

现在已经保存于-20度了,而且经过了很多次的反复冻融,这样对实验结果的影响有多大?
溴化乙锭通过嵌入碱基之间而与DNA结合,进而使双螺旋解旋。由此导致线状DNA的长度有所增加,作为补偿,将在闭环质粒DNA中引入超螺旋单位。最后,超螺旋度大为增加, 从而阻止了溴化乙锭分子的继续嵌入。但线状分子不受此限,可继续结合更多溴化乙锭,直至达到饱和( 每2个碱基对大约结合1个溴化乙锭分子) 。由于染料的结合量有所差别,线状和闭环DNA分子在含有饱和量溴化乙锭的氯化铯度中的浮力密度也有所不同。多年来,氯化铯-溴化乙锭梯度平衡离心已成为制备大量质粒DNA 的首选方法。然而该过程既昂贵又费时,为此发展了许多替代方法。其中主要包括利用离子交换层析、凝胶过滤层析、分级沉淀等分离质粒DNA和宿主DNA的方法。尽管这些方法大多数均被束之高阁,但其中最好的方法,也应是聚乙二醇分级沉淀法。
从大肠杆菌细胞中分离质粒DNA的方法众多,其分离的依据可利用分子大小不同,碱基组成的差异以及质粒DNA的超螺旋共价闭合环状结构的特点来进行。碱基性法抽提效果良好,既经济且得率较高。抽提到的质量DNA可用于酶切、连接和转化。对于分子量较大拷贝较少对的质粒DNA,由于DNA片段较大易于损伤断裂,因此选用吕华铯密度超高离心法抽提DNA,且具有纯度高、步骤少、方法稳定且获得的质量DNA是超螺旋构型等特点。对于高拷贝数质粒,用少量制备法抽提质粒DNA就有足够量可用于基因操作。

质粒DNA纯化的试验步骤:
测量DNA溶液的体积,按lg/ml的用量精确地加入固体CsCl, 将溶液加温至30℃助溶。温和地混匀溶液直到盐溶解。
每10mlDNA溶液加入0.8ml溴化乙锭溶液(10mg/ml溶于水);立即将溴化乙锭溶液(漂浮在表层)与DNA-氯化铯溶液混匀, 溶液的终密度应为1.55g/ml(溶液的折射率为1.3860)溴化乙锭浓度大约740μg/ml。【溴化乙锭贮存液应贮存于避光容器内(如用锡箔完全包裹的瓶子),于室温保存。
室温下用Sorvall SS34头(或与其相当的转头)以8000rpm离心5min, 浮在溶液上面的水垢状浮渣是溴化乙锭和细菌蛋白所形成的复合物。
用巴斯德吸管或带大号针头的一次性注射器将浮渣下的清亮红色溶液转移到离心管中。用轻石蜡油加满管的其余部分并封口。
以20℃对所得的密度梯度以45 000rpm离心16h(VTi65 转头)、 以45 000rpm离心48h(Ti50转头)、以60 000rpm离心24h(Ti65转头)或者以60 000rpm离心24h(Ti70.1转头)。普通光照下,在梯中心可见两条DNA区带, 上部区带材料通常较少,由线状的细菌(染色体)DNA和带切口的环状质粒DNA组成:下部区带则由闭环质粒DNA组成。管底部深红色的沉淀是溴化乙锭RNA复合物,位于CsCl溶液和石蜡油之间的是蛋白质。Beckman Quick-Seal离心管中的CsCl-溴化乙锭梯度可容纳4mg 闭环质粒DNA而不至超负荷。如有更大量的质粒存在,将扩展为一条宽带,并与染色体DNA相重叠。这种问题只有在质粒复制达到极高水平时才会出现,只要将该质粒提取物分为2个梯度即可解决。如出现负荷,可收集整个DNA区高产水平时才会出现,只要将该质粒提取物分为2个梯度即可解决。如出现超负荷,可收集整个DNA区带,用CsCl溶液(ρ=1.58g/ml)将体积调到15ml,在两个离心管中再度离心,使DNA达到平衡。
收集DNA带。将21 号皮下注射针头插入管的顶端以使空气进入,为尽量减少污染的机会,首先用18号皮下注射针头按下述方法收集上部的区带(杂色体DNA):用乙醇小心擦拭管外壁以除去任何油脂,然后将一块Soctch胶带贴于管外壁。穿过Soctch胶带将18号皮下注身针头(其斜面向上)插入管中,以便使针头的斜面开口恰好位于染色体DNA区带之下并与该区带相平行。将粘稠状DNA收集到一次性使用的管内,用造型粘土块封住皮下注射针头的末端并将第2根针头留于原处。 穿过Soctch 胶带插入第3根皮下注射针头(18号),将下部的质粒DNA区带收集到玻璃或塑料管中。展开
我是一个新手。做了两次real-timePCR(SYBRGREENI)标准曲线都很差劲,请好心的大侠们帮忙指点迷津。

标准品是用质粒DNA做了。第一个图是按10倍梯度进行稀释,以10^3~10^9copy/μl7个浓度的标准模板系列作为标准品;第二个图是按10倍梯度进行稀释,以50~0.0005ng/ul6个浓度的标准模板系列作为标准品,得到的标准曲线的参数值分别是R^2=0.87998694<0.99,Slope=-1.403786(图一);R^2=0.9702126<0.99,slope=-1.5033078.

我应该从哪些方面来改进我的实验?紧急求助!
请教各位高手,荧光分光光度法测物质的含量是否必须绘制标准曲线?如果不做标准曲线,能不能用Beer定律一类的公式来计算物质的相对含量?请做过荧光分光光度法的高手指点一下,如果有这方面的操作说明,尤其是如何计算待检物质含量的例子,能否说一下,先谢谢了。邮箱wzhnanhua@eyou.com
小弟就要进行荧光定量试验,所以在园子里面看了很多的资料?,真是似懂非懂,出现了很多的疑问,所以恳请各位指教一下,有些可能比较弱智,请各位不要见笑!非常感谢!

1.我知道一般缺省域值是3-15个循环荧光强度的标准方差的10倍,但是为什么公式是10×SD(6-15)?那仪器的本底荧光强度是前15个循环的荧光强度就算是baseline,那么仪器中用域值分析和用baseline分析有什么不同?域值能否改动?改动后的结果对于后续的分析有什么影响?一般什么时候需要改动?
2.所谓读板温度是不是就是每一部反应后检测荧光强度的步骤?是不是可以任意设定在某一步骤?譬如变性,退火,延伸甚至自己设定一个温度?
3.在做标准曲线的时候,对于标准品的要求是不是一般要求就是待扩增的目的片断,便于以后的扩增效率可比性?是不是这个也是购买的绝对标准品进行曲线作图的缺陷之一,虽然其绝对的定量已知?
4.在相对定量时候,如果内参和目的基因在同一管中进行扩增就是内参照法?不同管就是外参照法?是不是不太赞成内参照法,因为无法预知目的基因起始浓度,从而可能导致内参扩增效率远远大于目的基因而无法使用2-△△CT方法分析?
5.融解曲线的导出是不是在反应结束以后进行?融解曲线出现主峰异常增宽是什么原因导致?我还是不明白探针法是如何得出融解曲线的,主要是原理,因为染料法就是升高温度双链解链染料脱离?
6.如果用荧光染料方法进行试验,出现引物二具体很多,那么在NTC和加入模板的溶解曲线中dimer的峰值和模板中的峰值是否重叠?

敬请指教!非常感谢!
荧光染料是研究生物学围观世界特别是核酸时最常用的示踪工具之一,楼主想要详细的了解的话,可以去专业的网站上面找找看,有空的话可以去生物帮那里查看一下。我比较喜欢去那里查找资料的。这个网站蛮专业的。我记得上面有一个介绍了分子生物学实验和细胞学实验中常用的荧光染料文档,还对荧光染料的使用提出了自己的看法。你可以参考一下啊。有时间就去那儿上面( YINGG.www.bio1000.com/ )找找看啊,希望可以帮到你啊
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