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RayBiotech/Human Cytokine Array Q1000/8 Sample Kit/QAH-CAA-1000-1
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RayBiotech/Human Cytokine Array Q1000/8 Sample Kit/QAH-CAA-1000-1
品牌 / 
RayBiotech
货号 / 
QAH-CAA-1000-1
美元价:
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4000-520-616

Antigen Information

Gene Symbols:
AREG | BDNF | BMP4 | BMP5 | BMP7 | CCL1 | CCL11 | CCL15 | CCL2 | CCL24 View more Hide

Assay Format

Number of Targets Detected:
80
Species Detected:
  • Human
Compatible Sample Types:
  • Cell Culture Supernatants
  • Cell Lysates
  • Other Body Fluids
  • Plasma
  • Serum
  • Tissue Lysates
Design Principle:
  • Sandwich-based
Method of Detection:
Fluorescence Laser Scanner
Quantitative/Semi-Quantitative:
  • Quantitative
Solid Support:
Glass Slide

Product Specifications

Size:
1, 2, or 4 Slide Kit (16 sub-arrays per slide)

Product Features

  • More cost-effective than traditional ELISA
  • High specificity and system reproducibility
  • Suitable for diverse sample types
  • Low sample volume requirement: 100 µL or less
  • Get results same day (6-hour processing time)
  • Well-suited for high throughput assays
  • Q Analyzer software provides one-step computation

Target Names

Scroll over each target protein for more information
Amphiregulin
  • Gene Symbol: AREG
  • Gene ID: 374
  • Accession #: P15514
  • ELISA Kit: RayBio Human AREG ELISA
BDNF
  • Gene Symbol: BDNF
  • Gene ID: 627
  • Accession #: P23560
  • ELISA Kit: RayBio Human BDNF ELISA
beta-NGF
  • Gene Symbol: NGF
  • Gene ID: 4803
  • Accession #: P01138
  • ELISA Kit: RayBio Human beta-NGF ELISA
bFGF
  • Gene Symbol: FGF2
  • Gene ID: 2247
  • Accession #: P09038
  • ELISA Kit: RayBio Human bFGF ELISA
BLC(CXCL13)
  • Gene Symbol: CXCL13
  • Gene ID: 10563
  • Accession #: O43927
  • ELISA Kit: RayBio Human BLC ELISA
BMP-4
  • Gene Symbol: BMP4
  • Gene ID: 652
  • Accession #: P12644
  • ELISA Kit: RayBio Human BMP-4 ELISA
BMP-5
  • Gene Symbol: BMP5
  • Gene ID: 653
  • Accession #: P22003
  • ELISA Kit: RayBio Human BMP-5 ELISA
BMP-7
  • Gene Symbol: BMP7
  • Gene ID: 655
  • Accession #: P18075
  • ELISA Kit: RayBio Human BMP-7 ELISA
EGF
  • Gene Symbol: EGF
  • Gene ID: 1950
  • Accession #: P01133
  • ELISA Kit: RayBio Human EGF ELISA
EGFR
  • Gene Symbol: EGFR
  • Gene ID: 1956
  • Accession #: P00533
  • ELISA Kit: RayBio Human EGFR ELISA
Eotaxin-1(CCL11)
  • Gene Symbol: CCL11
  • Gene ID: 6356
  • Accession #: P51671
  • ELISA Kit: RayBio Human Eotaxin-1 ELISA
Eotaxin-2(MPIF-2/CCL24)
  • Gene Symbol: Ccl24
  • Gene ID: 6369
  • Accession #: O00175
  • ELISA Kit: RayBio Human Eotaxin-2 ELISA
FGF-4
  • Gene Symbol: FGF4
  • Gene ID: 2249
  • Accession #: P08620
  • ELISA Kit: RayBio Human FGF-4 ELISA
FGF-7(KGF)
  • Gene Symbol: FGF7
  • Gene ID: 2252
  • Accession #: P21781
  • ELISA Kit: RayBio Human FGF-7 ELISA
GCSF
  • Gene Symbol: CSF3
  • Gene ID: 1440
  • Accession #: P09919
  • ELISA Kit: RayBio Human G-CSF ELISA
GDF-15
  • Gene Symbol: GDF15
  • Gene ID: 9518
  • Accession #: Q99988
  • ELISA Kit: RayBio Human GDF-15 ELISA
GDNF
  • Gene Symbol: GDNF
  • Gene ID: 2668
  • Accession #: P39905
  • ELISA Kit: RayBio Human GDNF ELISA
GM-CSF
  • Gene Symbol: CSF2
  • Gene ID: 1437
  • Accession #: P04141
  • ELISA Kit: RayBio Human GM-CSF ELISA
Growth Hormone
  • Gene Symbol: GH1
  • Gene ID: 2688
  • Accession #: P01241
  • ELISA Kit: RayBio Human GH ELISA
EG-VEGF(PK1)
  • Gene Symbol: PROK1
  • Gene ID: 84432
  • Accession #: P58294
  • ELISA Kit: RayBio Human EG-VEGF  ELISA
HB-EGF
  • Gene Symbol: HBEGF
  • Gene ID: 1839
  • Accession #: Q99075
  • ELISA Kit: RayBio Human HB-EGF ELISA
HGF
  • Gene Symbol: HGF
  • Gene ID: 3082
  • Accession #: P14210
  • ELISA Kit: RayBio Human HGF ELISA
I-309(TCA-3/CCL1)
  • Gene Symbol: CCL1
  • Gene ID: 6346
  • Accession #: P22362
  • ELISA Kit: RayBio Human I-309 ELISA
ICAM-1(CD54)
  • Gene Symbol: ICAM1
  • Gene ID: 3383
  • Accession #: P05362
  • ELISA Kit: RayBio Human sICAM-1 ELISA
IFN-gamma
  • Gene Symbol: IFNG
  • Gene ID: 3458
  • Accession #: P01579
  • ELISA Kit: RayBio Human IFN-gamma ELISA
IGF-1
  • Gene Symbol: IGF1
  • Gene ID: 3479
  • Accession #: P05019
  • ELISA Kit: RayBio Human IGF-1 ELISA
IGFBP-1
  • Gene Symbol: IGFBP1
  • Gene ID: 3484
  • Accession #: P08833
  • ELISA Kit: RayBio Human IGFBP-1 ELISA
IGFBP-2
  • Gene Symbol: IGFBP2
  • Gene ID: 3485
  • Accession #: P18065
  • ELISA Kit: RayBio Human IGFBP-2 ELISA
IGFBP-3
  • Gene Symbol: IGFBP3
  • Gene ID: 3486
  • Accession #: P17936
  • ELISA Kit: RayBio Human IGFBP-3 ELISA
IGFBP-4
  • Gene Symbol: IGFBP4
  • Gene ID: 3487
  • Accession #: P22692
  • ELISA Kit: RayBio Human IGFBP-4 ELISA
IGFBP-6
  • Gene Symbol: IGFBP6
  • Gene ID: 3489
  • Accession #: P24592
  • ELISA Kit: RayBio Human IGFBP-6 ELISA
IL-1 alpha(IL-1 F1)
  • Gene Symbol: IL1A
  • Gene ID: 3552
  • Accession #: P01583
  • ELISA Kit: RayBio Human IL-1 alpha ELISA
IL-1 beta(IL-1 F2)
  • Gene Symbol: IL1B
  • Gene ID: 3553
  • Accession #: P01584
  • ELISA Kit: RayBio Human IL-1 beta ELISA
IL-1 ra(IL-1 F3)
  • Gene Symbol: IL1RN
  • Gene ID: 3557
  • Accession #: P18510
  • ELISA Kit: RayBio Human IL-1 RA ELISA
IL-10
  • Gene Symbol: IL10
  • Gene ID: 3586
  • Accession #: P22301
  • ELISA Kit: RayBio Human IL-10 ELISA
IL-11
  • Gene Symbol: IL11
  • Gene ID: 3589
  • Accession #: P20809
  • ELISA Kit: RayBio Human IL-11 ELISA
IL-12 p40
  • Gene Symbol: IL12B
  • Gene ID: 3593
  • Accession #: P29460
  • ELISA Kit: RayBio Human IL-12 p40 ELISA
IL-12 p70
  • Gene Symbol: IL12A
  • Gene ID: 3592
  • Accession #: P29459
  • ELISA Kit: RayBio Human IL-12 p70 ELISA
IL-13
  • Gene Symbol: IL13
  • Gene ID: 3596
  • Accession #: P35225
  • ELISA Kit: RayBio Human IL-13 ELISA
IL-15
  • Gene Symbol: IL15
  • Gene ID: 3600
  • Accession #: P40933
  • ELISA Kit: RayBio Human IL-15 ELISA
IL-16
  • Gene Symbol: IL16
  • Gene ID: 3603
  • Accession #: Q14005
  • ELISA Kit: RayBio Human IL-16 ELISA
IL-17A
  • Gene Symbol: IL17A
  • Gene ID: 3605
  • Accession #: Q16552
  • ELISA Kit: RayBio Human IL-17A ELISA
IL-2
  • Gene Symbol: IL2
  • Gene ID: 3558
  • Accession #: P60568
  • ELISA Kit: RayBio Human IL-2 ELISA
IL-4
  • Gene Symbol: IL4
  • Gene ID: 3565
  • Accession #: P05112
  • ELISA Kit: RayBio Human IL-4 ELISA
IL-5
  • Gene Symbol: IL5
  • Gene ID: 3567
  • Accession #: P05113
  • ELISA Kit: RayBio Human IL-5 ELISA
IL-6
  • Gene Symbol: IL6
  • Gene ID: 3569
  • Accession #: P05231
  • ELISA Kit: RayBio Human IL-6 ELISA
IL-6 R
  • Gene Symbol: IL6R
  • Gene ID: 3570
  • Accession #: P08887
  • ELISA Kit: RayBio Human IL-6 sR ELISA
IL-7
  • Gene Symbol: IL7
  • Gene ID: 3574
  • Accession #: P13232
  • ELISA Kit: RayBio Human IL-7 ELISA
IL-8(CXCL8)
  • Gene Symbol: IL8
  • Gene ID: 3576
  • Accession #: P10145
  • ELISA Kit: RayBio Human IL-8 ELISA
Insulin
  • Gene Symbol: INS
  • Gene ID: 3630
  • Accession #: P01308
  • ELISA Kit: RayBio Human Insulin ELISA
MCP-1(CCL2)
  • Gene Symbol: CCL2
  • Gene ID: 6347
  • Accession #: P13500
  • ELISA Kit: RayBio Human MCP-1 ELISA
M-CSF
  • Gene Symbol: CSF1
  • Gene ID: 1435
  • Accession #: P09603
  • ELISA Kit: RayBio Human M-CSF ELISA
M-CSF R
  • Gene Symbol: CSF1R
  • Gene ID: 1436
  • Accession #: P07333
  • ELISA Kit: RayBio Human M-CSF R ELISA
MIG(CXCL9)
  • Gene Symbol: CXCL9
  • Gene ID: 4283
  • Accession #: Q07325
  • ELISA Kit: RayBio Human MIG ELISA
MIP-1 alpha(CCL3)
  • Gene Symbol: CCL3
  • Gene ID: 6348
  • Accession #: P10147
  • ELISA Kit: RayBio Human MIP-1 alpha ELISA
MIP-1 beta(CCL4)
  • Gene Symbol: CCL4
  • Gene ID: 6351
  • Accession #: P13236
  • ELISA Kit: RayBio Human MIP-1 beta ELISA
MIP-1 delta(CCL15)
  • Gene Symbol: CCL15
  • Gene ID: 6359
  • Accession #: Q16663
  • ELISA Kit: RayBio Human MIP-1 delta ELISA
NGFR(TNFRSF16)
  • Gene Symbol: NGFR
  • Gene ID: 4804
  • Accession #: P08138
  • ELISA Kit: RayBio Human NGF R ELISA
NT-3
  • Gene Symbol: NTF3
  • Gene ID: 4908
  • Accession #: P20783
  • ELISA Kit: RayBio Human NT-3 ELISA
NT-4
  • Gene Symbol: NTF4
  • Gene ID: 4909
  • Accession #: P34130
  • ELISA Kit: RayBio Human NT-4 ELISA
Osteoprotegerin(TNFRSF11B)
  • Gene Symbol: TNFRSF11B
  • Gene ID: 4982
  • Accession #: O00300
  • ELISA Kit: RayBio Human OPG ELISA
PDGF-AA
  • Gene Symbol: PDGFA
  • Gene ID: 5154
  • Accession #: P04085
  • ELISA Kit: RayBio Human PDGF-AA ELISA
PDGF-BB
  • Gene Symbol: PDGFB
  • Gene ID: 5155
  • Accession #: P01127
  • ELISA Kit: RayBio Human PDGF-BB ELISA
PLGF
  • Gene Symbol: PGF
  • Gene ID: 5228
  • Accession #: P49763
  • ELISA Kit: RayBio Human PLGF ELISA
RANTES(CCL5)
  • Gene Symbol: CCL5
  • Gene ID: 6352
  • Accession #: P13501
  • ELISA Kit: RayBio Human RANTES ELISA
SCF
  • Gene Symbol: KITLG
  • Gene ID: 4254
  • Accession #: P21583
  • ELISA Kit: RayBio Human SCF ELISA
SCF R(CD117/c-kit)
  • Gene Symbol: KIT
  • Gene ID: 3815
  • Accession #: P10721
  • ELISA Kit: RayBio Human SCF R ELISA
TGF alpha
  • Gene Symbol: TGFA
  • Gene ID: 7039
  • Accession #: P01135
  • ELISA Kit: RayBio Human TGF-alpha ELISA
TGF beta 1
  • Gene Symbol: TGFB1
  • Gene ID: 7040
  • Accession #: P01137
  • ELISA Kit: RayBio Human TGF-beta 1 ELISA
TGF beta 3
  • Gene Symbol: TGFB3
  • Gene ID: 7043
  • Accession #: P10600
TIMP-1
  • Gene Symbol: TIMP1
  • Gene ID: 7076
  • Accession #: P01033
  • ELISA Kit: RayBio Human TIMP-1 ELISA
TIMP-2
  • Gene Symbol: TIMP2
  • Gene ID: 7077
  • Accession #: P16035
  • ELISA Kit: RayBio Human TIMP-2 ELISA
TNF alpha
  • Gene Symbol: TNF
  • Gene ID: 7124
  • Accession #: P01375
  • ELISA Kit: RayBio Human TNF-alpha ELISA
TNF beta(TNFSF1B)
  • Gene Symbol: LTA
  • Gene ID: 4049
  • Accession #: P01374
  • ELISA Kit: RayBio Human TNF-beta ELISA
TNF RI(TNFRSF1A)
  • Gene Symbol: TNFRSF1A
  • Gene ID: 7132
  • Accession #: P19438
  • ELISA Kit: RayBio Human sTNFRI ELISA
TNF RII(TNFRSF1B)
  • Gene Symbol: TNFRSF1B
  • Gene ID: 7133
  • Accession #: P20333
  • ELISA Kit: RayBio Human sTNFRII ELISA
VEGF-A
  • Gene Symbol: VEGFA
  • Gene ID: 7422
  • Accession #: P15692
  • ELISA Kit: RayBio Human VEGF-A ELISA
VEGF-D
  • Gene Symbol: FIGF
  • Gene ID: 2277
  • Accession #: O43915
  • ELISA Kit: RayBio Human VEGF-D ELISA
VEGFR2
  • Gene Symbol: KDR
  • Gene ID: 3791
  • Accession #: P35968
  • ELISA Kit: RayBio Human VEGF R2 ELISA
VEGFR3
  • Gene Symbol: FLT4
  • Gene ID: 2324
  • Accession #: P35916
  • ELISA Kit: RayBio Human VEGF R3 ELISA

Species Detected

Human

Application Notes

Suggested Application
  • Multiplexed Protein Detection
  • Biomarker Screening
  • Identifying Key Factors
  • Confirming Biological Process
  • Biomarker Validation
  • Validation of Antibody Array Results
  • Quantitative Protein Detection
  • Establishing Normal Range
Kit Components
  • Human Cytokine Array Q1000 Slide(s)
  • Blocking Buffer
  • Wash Buffer 1
  • Wash Buffer 2
  • Lyophilized Standard Mix
  • Biotinylated Detection Antibody Cocktail
  • Streptavidin-Conjugated Fluor
  • Slide Washer/Dryer
  • Adhesive Plastic Strips
  • Manual
Other Materials Required
  • Distilled or deionized water
  • Small plastic boxes or containers
  • Pipettors, pipette tips and other common lab consumables
  • Orbital shaker or oscillating rocker
  • Aluminum foil
  • Gene microarray scanner or similar laser fluorescence scanner
View Compatible Laser ScannersDon"t have a compatible scanner? RayBiotech now offers FREE scanning service for all RayBio glass slide antibody arrays! Learn More
Protocol Outline
  1. Dry the glass slide
  2. Prepare Standards
  3. Block array surface
  4. Incubate with Samples and Standards
  5. Incubate with Biotinylated Detection Antibody Cocktail
  6. Incubate with Streptavidin-Conjugated Fluor
  7. Disassemble the glass slide
  8. Scan with a gene microarray laser scanner
  9. Perform densitometry and analysis

Storage/Stability

For best results, store the entire kit frozen at -20°C upon arrival. Stored frozen, the kit will be stable for at least 6 months which is the duration of the product warranty period. Once thawed, store array slide(s), standard mix, detection antibody cocktail, and Cy3-Conjugated Streptavidin at -20°C and all other reagents undiluted at 4°C for no more than 3 months.
  1. Massee M., Chinn K., Lim J., et al. Type I and II Diabetic Adipose-Derived Stem Cells Respond In Vitro to Dehydrated Human Amnion/Chorion Membrane Allograft Treatment by Increasing Proliferation, Migration, and Altering Cytokine Secretion. Adv Wound Care (New Rochelle). 2016 Feb 1;5(2):43-54 Species: HumanSample type: Conditioned Media
  2. Ciavarella S., Caselli A., Tamma A., et al. A peculiar molecular profile of umbilical cord-mesenchymal stromal cells drives their inhibitory effects on multiple myeloma cell growth and tumor progression. Stem Cells Dev. 2015 Jun 15;24(12):1457-70. doi: 10.1089/scd.2014.0254. Species: HumanSample type: Conditioned Media
  3. Massee M., Chinn K., Lei J., et al. Dehydrated human amnion/chorion membrane regulates stem cell activity in vitro. J Biomed Mater Res B Appl Biomater. 2015 Jul 14. doi: 10.1002/jbm.b.33478Species: HumanSample type: Conditioned Media

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蚂蚁淘(www.ebiomall.cn)是中国大陆目前唯一的生物医疗科研用品B2B跨境交易平台, 该平台由多位经验丰富的生物人和IT人负责运营。蚂蚁淘B2B模式是指客户有采购意向后在蚂蚁 淘搜索全球供应信息,找到合适的产品后在蚂蚁淘下单,然后蚂蚁淘的海外买手进行跨境采购、 运输到中国口岸,最后由蚂蚁淘国内团队报关运输给客户...
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Materials to be prepared beforehand:1) FBS free medium2) 10% FBS medium3) Cell migration filter insert ( Transwell®, 12mm Diameter, 12 μm Pore Size.)Proced 查看更多>
概述及注意事项:细胞学检查包括有细胞的涂片与染色技术,其来源先于组织切片技术,目前是较为常用的病理检查方法之一。它所运用的范围也很广泛,如女性生殖系统、食管、胃、肺、浆膜腔积液、泌尿管道、鼻咽部等部位的脱落癌细胞,以及胸、腹腔的肿块、淋巴结、乳腺、和其它组织器官的细胞 查看更多>
Fixation and Staining ParametersAntigen Fixation Fixation time AntibodyDilutionRefmicrotubules 100% MeOH 5 min @ RT DM1a1:500actin 4% Formaldehyde* 8 min @ RT 查看更多>
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普通的节能灯,日光灯发出的光各种波长都有,波长范围很宽。激光单色性很好,波长范围很窄,波长650nm指的是这种激光笔发出的光波长在650nm附近很窄的范围里。可见光的波长范围在390—770纳米之间。红:770—622nm;橙:622—597nm;黄:597—577nm;绿:577—492nm;蓝靛:492—455nm;紫:455—390nm。650nm应该是红光。所以是红色光的激光笔。
对不同材料来说不同,绝大多数情况下,发射波长会随着激发波长的偏移而有所偏移。 对于固态物质,主要是因为分子与其它材料形成了π建 对于量子点溶液,激发波长也会显著导致发射光谱的不同。但是不是绝对的,比如对于Alex555分子,发射波长的便宜往往就相对较小,这是由于分子内部的能带结构所决定的。 如果是单纯的回答问题,答案是:有关。
fcm常用的荧光染料有哪些
请教大家问题:我做的QPCR扩增同一个模板,结果熔融温度分别是74.45,74.17,75.71,75.09,75.21,73.93等,多数在74-75之间,73左右的就一个数值。原来做过用相同的模板扩增,熔融温度是》74《75之间的数值,熔融峰为单峰,且确定是目的基因,不是引物二聚体。并且,相同的标准品时隔一段时间(-80度保存),不同时间做PCR,结果CT值差别较大。有以下的疑问想和大家一起讨论:
1.熔融温度为75,74,73度的样品是否是同一个产物?熔融温度为56度的是不是没有扩增产物?
2.为什么相同的标准品不同反应CT值差别这么大?是不是荧光染料降解?我用的是试剂盒中的扩增酶,还没用几次。
3.扩增曲线的形态是否说明标准品已经有降解?
4.另外,我原来做CDNA梯度稀释做的挺好,可是这个直接是RNA为标准品,我用一步法进行QRT-PCR。标准品梯度稀释线性效果不稳定,有的时候好,有的时候不好。请假大家有没有好的建议?
附件中有扩增曲线和熔融曲线,请大家帮忙分析,谢过了!

新建MicrosoftOfficeWord文档.docx(46.18k)
荧光染料是研究生物学围观世界特别是核酸时最常用的示踪工具之一,楼主想要详细的了解的话,可以去专业的网站上面找找看,有空的话可以去生物帮那里查看一下。我比较喜欢去那里查找资料的。这个网站蛮专业的。我记得上面有一个介绍了分子生物学实验和细胞学实验中常用的荧光染料文档,还对荧光染料的使用提出了自己的看法。你可以参考一下啊。有时间就去那儿上面( YINGG.www.bio1000.com/ )找找看啊,希望可以帮到你啊
理想情况下毫无疑问应该是PCR扩增的指数期。
快到年关,才准备要做实时定量,但因从没做过,万一设计有误,那损失不堪设想,恳请各位高手帮我看看有没有什么问题:
我要检测的是一个巢氏PCR的终产物,那我能否用首次PCR的产物纯化,稀释后来作标准品?好象一般都认为用质粒作更好,但我想质粒片段与我样品首次PCR产物的长度不同,扩增效率是不是也有差异?而且用质粒扩增前,是不是要先把质粒酶切成线性后,才能扩?(这个问题好象有点菜)
另外,如果用荧光染料,那是用预混型试剂好,还是各配各的好?因为据说镁离子浓度对实验影响较大,如果用预混型,不是就不能调离子浓度了吗?

先谢谢各位了。
http://www.dojindo.cn/products/C/cfse.htm
这个么…染色一般用新亚甲蓝枸橼酸钠,全血涂片可用瑞氏染液或新亚甲枸橼酸钠,
我是定量PCR的新手,有很多问题要请教大家。
我做的病毒的普通PCR结果还可以。我现在要做该病毒的定量。用的是ICycler定量PCR仪器。有那位高手能告诉我怎样操作该仪器。
我还要重新设计目的基因片段的因物吗?如果不用重新设计,那我下一步应该为做定量PCR做哪些准备呐?还需要设计参照模板吗?
这种实验的把握性有多大?
大家有什么更好的建议吗?
想问一下各位大侠提质粒时用的是那个公司的试剂盒呀?我的扩增荧光增量一直不是很高,而且作为被动参比的ROX信号比FAM的基线部分高很多,不知是不是质粒的质量不好造成的。
所以想请大家给推荐一个效果好的最好是国产的质粒提取试剂盒。
多谢!
1.无Ct值出现
  检测荧光信号的步骤有误:一般SG法采用72℃延伸时采集,Taqman法则一般在退火结束时或延伸结束采集信号。
  引物或探针降解:可通过PAGE电泳检测其完整性。
  模板量不足:对未知浓度的样品应从系列稀释样本的最高浓度做起。
  模板降解:避免样品制备中杂质的引入及反复冻融的情况。
  2.Ct值出现过晚(Ct>38)
  扩增效率低:反应条件不够优化。设计更好的引物或探针;改用三步法进行反应;适当降低退火温度;增加镁离子浓度等。
  PCR各种反应成分的降解或加样量的不足。
  PCR产物太长:一般采用80-150bp的产物长度。
  3.标准曲线线性关系不佳
  加样存在误差:使得标准品不呈梯度。
  标准品出现降解:应避免标准品反复冻融,或重新制备并稀释标准品。
  引物或探针不佳:重新设计更好的引物和探针。
  模板中存在抑制物,或模板浓度过高
  4.负对照有信号
  引物设计不够优化:应避免引物二聚体和发夹结构的出现。
  引物浓度不佳:重庆新桥医院网上预约挂号www.cqxqyy.net适当降低引物的浓度,并注意上下游引物的浓度配比。
  镁离子浓度过高:适当降低镁离子浓度,或选择更合适的mix试剂盒
  模板有基因组的污染:RNA提取过程中避免基因组DNA的引入,或通过引物设计避免非特异扩增。
  5.溶解曲线不止一个主峰
  引物设计不够优化:应避免引物二聚体和发夹结构的出现。
  引物浓度不佳:适当降低引物的浓度,并注意上下游引物的浓度配比。
  镁离子浓度过高:适当降低镁离子浓度,或选择更合适的mix试剂盒。
  模板有基因组的污染:RNA提取过程中避免基因组DNA的引入,或通过引物设计避免非特异扩增。
  6.扩增效率低
  反应试剂中部分成分特别是荧光染料降解。
  反应条件不够优化:可适当降低退火温度或改为三步扩增法。
  反应体系中有PCR反应抑制物:一般是加入模板时所引入,应先把模板适度稀释,再加入反应体系中,减少抑制物的影响。
  7.同一试剂在不同仪器上产生不同的曲线,如何判断?
  判断标准:扩增效率,灵敏度,特异性
  如果扩增效率在90%-110%,都是特异性扩增,都可以把数据用于分析。
  8.扩增曲线的异常?比如“S”型曲线?
  参比染料设定不正确(MasterMix不加参比染料时,选NONE)
  模板的浓度太高或者降解
  荧光染料的降解
带荧光的染料含不含重金属
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