The LEGENDplex™ Human Essential Immune Response Panel Standard contains 13 human proteins, including IL-4, IL-2, CXCL10 (IP-10), IL-1β, TNF-α, CCL2 (MCP-1), IL-17A, IL-6, IL-10, IFN-γ, IL-12p70, CXCL8 (IL-8), Free Active TGF-β1. This standard cocktail is recommended for use with the following in Mix and Match assays:Human Essential Immune Response Panel740931 LEGENDplex™ Human Essential Immune Response Panel Detection Antibodies740933 LEGENDplex™ Human IL-4 Capture Bead A4, 13X740934 LEGENDplex™ Human IL-2 Capture Bead A5, 13X740935 LEGENDplex™ Human CXCL10 (IP-10) Capture Bead A6, 13X740936 LEGENDplex™ Human IL-1β Capture Bead A7, 13X740937 LEGENDplex™ Human TNF-α Capture Bead A8, 13X740938 LEGENDplex™ Human CCL2 (MCP-1) Capture Bead A10, 13X740939 LEGENDplex™ Human IL-17A Capture Bead B2, 13X740940 LEGENDplex™ Human IL-6 Capture Bead B3, 13X740941 LEGENDplex™ Human IL-10 Capture Bead B4, 13X740942 LEGENDplex™ Human IFN-γ Capture Bead B5, 13X740943 LEGENDplex™ Human IL-12p70 Capture Bead B6, 13X740904 LEGENDplex™ Human CXCL8 (IL-8) Capture Bead B7, 13X740944 LEGENDplex™ Human Free Active TGF-β1 Capture Bead B9, 13X740368 LEGENDplex™ Buffer Set A740377 LEGENDplex™ Filter PlateOR740379 LEGENDplex™ V-Bottom Plate
Product Detailsebiomall.com
    
                
        
        
        
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                                                    所以想请大家给推荐一个效果好的最好是国产的质粒提取试剂盒。
多谢!
1.熔融温度为75,74,73度的样品是否是同一个产物?熔融温度为56度的是不是没有扩增产物?
2.为什么相同的标准品不同反应CT值差别这么大?是不是荧光染料降解?我用的是试剂盒中的扩增酶,还没用几次。
3.扩增曲线的形态是否说明标准品已经有降解?
4.另外,我原来做CDNA梯度稀释做的挺好,可是这个直接是RNA为标准品,我用一步法进行QRT-PCR。标准品梯度稀释线性效果不稳定,有的时候好,有的时候不好。请假大家有没有好的建议?
附件中有扩增曲线和熔融曲线,请大家帮忙分析,谢过了!
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这些染料的结构式基本是保密的。有些地方能查到,象维基上就有SYBR Green的结果式,但谁也不能肯定是否是正确的。
一、荧光剂又名荧光增白剂,是一种荧光染料,或称为白色染料,也是一种复杂的有机化合物。它的特性是能吸收入射光线产生荧光,使所染物质获得类似荧石的闪闪发光的效应,使肉眼看到的物质很白,达到增白的效果。二、用途介绍1、荧光增白剂BC性能及用途 外观为淡黄色粉末。色光以与标准近似,溶于水呈蓝色荧光,不溶于水杂质含量0.5%,强度为标准品的1005,细度(通过100目筛残余物含量)5%,泛黄点5%,水分含量5%。本品主要用于棉纤维、人造丝、人造棉和纸浆等中性染浴增白处理。2、荧光增白剂JD-3 性能及用途 外观为淡黄色粉末,能溶于热水。本品在中性或微碱性条件下,用于合成洗涤剂、肥皂、造纸和纺织品的增白。3、荧光增白剂挺进31#性能及用途 外观为淡黄色粉末,具有一般二苯乙烯三嗪型增白剂性能。荧光色调为青光,呈阴离子型。可溶于100℃或1000倍25℃水中。水分含量5%,不溶于水的杂质含量0.5%。本品主要用于合成洗涤剂、肥皂、香皂、纸张的增白,也用于棉织物、锦纶、人造丝等的增白,可使被增白物增白发亮。4、荧光增白剂BR(增白剂BL)成 分 DSD酸钠盐与异氰酸苯酯的缩合物性能及用途 外观为淡黄色粉末,属阴离子型,微带红紫色。2%水溶液澄清,95%以上通过60目筛。5、荧光增白剂EBF成 分 邻氨基苯酚与2,5-二羧酸噻吩的缩合物性能及用途 外观为细微黄白色悬浮液。有鲜艳的蓝色荧光。含有效荧光物质10%,属非离子型,呈中性,可与水以任何比例稀释分散。耐硬水、耐酸、耐碱、耐晒,氧化漂白稳定。增白强度与标准品相似,能与大多数施用于白色织物的整理剂和染色载体共用。酸碱度为10g/L,分散液pH6。本品主要用于涤纶、锦纶和醋纤的增白,也可用于合纤与棉、毛混纺织物的增白。6、荧光增白剂R成 分 DSD酸钠盐与异氰酸苯酯的缩俣物性能及用途 外观为白色至淡黄色粉末。阴离子型。95%以上通过60目筛。0.2%水溶液澄清。本品主要用于纤维、纸张、白地印染增白和浅色纤维增艳。7、 荧光增白剂AD(荧光增白剂CA)成 分 对氯代--吗啉基丙酰苯盐酸盐与对甲磺酰苯肼盐酸盐的缩合性能及用途 外观为带绿光的淡黄色细针状结晶。本品主要用作合成纤维的增白剂。8、荧光增白剂ER(增白剂PS-1)性能及用途 强度为标准品的1003,色光与标准品近似,非离子型,在水中均匀分散。本品用于涤纶、涤/棉混纺织物的增白。用其处理的织物白度高、色光纯。具有优异的耐洗、耐晒和耐升华牢度。二、实验证明(1)对皮肤无刺激经过多年的动物及人体试验表明:即使是皮肤直接接触荧光增白剂CBS纯品,对皮肤也无刺激性,不会导致皮肤过敏。沈永嘉教授等编写的《荧光增白剂》一书中指出:荧光增白剂不会被皮肤吸收。即使荧光增白剂CBS在使用过程中可能有少量粘附在皮肤上,也不会和人体皮肤发生反应,而且通过日常的洗涤活动(例如洗手、洗澡等)很容易被完全的洗掉,不会经皮吸收[1] 。因此,皮肤直接与添加CBS的洗衣液接触不会造成伤害。(2)对伤口愈合无不良影响发表于1994年《德国皮肤病学》杂志上的《荧光增白剂的毒理学性质》一文中指出,即使是用含有荧光增白剂的纺织材料直接接触伤口,也不会对伤口愈合产生不良影响,且不会对人体皮肤造成病理性变化。(3)代谢:荧光增白剂CBS是水溶性的,通过正常代谢可很快完全排出体外德国Georg Thieme出版社出版的《环境质量和安全》增补第四卷《荧光增白剂》(`Environmental Quality and Safety` Supplement Volume IV `Fluorescent Whitening Agents`)一书中指出,通过小鼠代谢研究表明,在大剂量喂食洗涤剂用荧光增白剂CBS后,绝大部分增白剂都会迅速通过肠道排出,不被肠道吸收。其血、肝、肾、脑、肌肉和脂肪中均无荧光增白剂残留,即不会造成体内蓄积。所以日常生活中即使有少量荧光增白剂CBS进入人体,也会通过正常代谢过程很快排出体外。(4)荧光增白剂CBS无致畸性,无致癌性通过对多种动物的急性毒性研究和长达两年的小鼠慢性毒理实验研究证明:CBS属于无毒性物质,无致畸、无致癌、无致突变性。三、结论总之,在正常使用剂量下,含有荧光剂都是安全的。参考资料荧光剂:https://baike.baidu.com/item/%E8%8D%A7%E5%85%89%E5%89%82/6185591?fr=aladdin#2
1.怎么看两个反应-即目标基因和内参基因是否具有相同的扩增效率?
2.每次PCR反应的扩增情况都有差异,多次反应的扩增效率岂不是都不一样了吗?
3.如何设计才能让相对定量更可行?
由于对定量PCR的接触不多,希望各位高手多多帮助!谢谢!

                                    
                    