实验六 豚鼠t淋巴细胞的测定 ——兔红细胞玫瑰花环试验 玫瑰花环
人类T和B淋巴细胞表面具有不同的受体。由于人类T淋巴细胞表面具有与绵羊红细胞结合的受体，能与绵羊红细胞非特异性结合，形成E花环，因此，T细胞也成为红细胞花瓣形成细胞。 豚鼠T淋巴细胞的测定 实验原理 根据E—玫瑰花环形成率，可以间接判断机体细胞免疫力。目前，已广泛应用于临床，作为测定人群免疫状态的一个指标。 实验材料 豚鼠 1. 淋巴细胞提取 （1）取豚鼠抗凝血2毫升，加3毫升Hanks液使之稀释。加于3毫升淋巴细胞分层液液面之上（沿管壁轻轻加入，勿使两液相混）。 （2）2000转/分离心30分钟，吸淋巴细胞层到另一试管中加5倍体积的Hanks液洗1~2次，（1500转/分离心10分钟）弃上清即成。 图1 用分层液离心后的血细胞层 2. 加吸收过的胎牛血清0.1毫升，0.5%兔红细胞悬液0.2毫升，于淋巴细胞中。混合后，37℃水浴5分钟。 3. 500转/分离心5分钟，放4℃冰箱中2小时后，弃大部分上清。 4. 染色及观察 轻轻悬浮沉积的细胞。向悬液中滴一滴美兰液，混合，10分钟后取一滴放载玻片上，加盖玻片镜检。 高倍镜或油镜下计数200个淋巴细胞，凡结合3个或3个以上的兔红细胞者为阳性，计算花环形成细胞的百分率。
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发布于 ： 2018-08-06
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