气数学_
实验方法原理 | 用带EB病毒衣壳抗原的类淋巴细胞作抗原靶细胞,可与病人血清中的VCA--IgA抗体结合,形成抗原抗体复合物,再与酶标抗人IgA抗体结合,加入底物后酶催化底物变为有色产物,使靶细胞着色,产物的量与病人血清中的抗体量直接相关,故可根据颜色反应的深浅对抗体定量分析。 |
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实验步骤 | 取冷存的EB病毒抗原靶细胞涂片置室温中吹干。 用0.01M,pH7.4PBS将即检血清作1:5,1:10,1:20稀释,将各稀释度血清滴加至细胞涂片的小圆穴中,勿使液体外溢。 置于湿盒中在37℃温箱作用30分钟,用同一PBS浸洗三次,每次5分钟,末次浸洗后在室温中吹干。 滴加酶标抗体于各小圆穴内,置湿盒中在37℃作用60分钟,同上法浸洗三次。 将新鲜配制的底物溶液滴加在整个涂片上,避光作用10分钟后,倾去底物溶液,置于无水乙醇中浸3分钟使脱水。 滴加中性树胶于涂片上,加盖玻片封固,在低倍显微镜下观察结果。 结果判断: 阴性细胞:细胞不着色,或呈浅棕色与背景相同。 阳性细胞:细胞显示不同程度的棕色,胞膜染色较深,细胞表面可见棕色颗粒。 按阳性细胞着色强度和数量,将阳性分为四级: ++++:每个视野内有100个以上阳性细胞,是深棕色; +++:每个视野内有数十个阳性细胞,呈棕色; ++:每个视野内有少数阳性细胞,是淡咖啡色; +:在若干个视野内才见少数阳性细胞,呈淡咖啡色。 |
其他 | 此法简便敏感,适于对人群普查鼻咽癌,有助于早期诊断鼻咽癌。 有助于诊断和鉴别诊断鼻咽癌:用VCA-IgA试验检测鼻咽癌患者,抗体阳性率在90%以上,抗体滴度1:10以上或滴度持续上升者,对鼻咽癌有辅助诊断意义。鼻咽癌患者抗体滴度较高,其他肿瘤和正常人血清的抗体阳性率均在6%以下,且抗体滴度低。 有助于判断疗效和预后:病人疗效显著时,血清中的VCA-IgA抗体逐渐下降或消失;疗效差,鼻咽癌复发或远处转移时抗体滴度回升。 |
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发布于 : 2018-08-03
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