新鲜实体组织样本的制备(化学处理法)
化学处理法是将组织细胞间起黏着作用的钙、镁离子置换出来，从而使细胞分散开来。本实验来源「实用流式细胞术彩色图谱」王书奎、周振英主编。
0 收藏 0 阅读一、试剂的配制
1. 0.2% EDTA 配制：称 EDTA 0.2 g，加入 Hank 液 100 ml，封装高压消毒。置 0~4℃ 保存。
2. 胰酶加 EDTA 配制：胰酶 0.25 g 加 PBS ( pH 7.0) 200 ml，浓度 0.125%，EDTA 0.2 g 加 PBS ( pH 7.0) 100 ml，浓度 0.2%。各取 40 ml 混合，分装置冰箱保存，用时过滤即可使用。
二、实验方法
1. 将组织切成薄片，置入试管中。
2. 首先加入 EDTA 液 5 ml，室温下 0.5 h，离心弃之。
3. 再加入胰酶-EDTA 液 5 ml。在 37℃ 恒温水浴振荡器内 30 min。
4. 用 300 目尼龙网过滤，离心沉淀 1000 r/min，5 min。再以生理盐水洗 2~3 次。
5. 细胞固定或低温保存备用。
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发布于 ： 2018-08-10
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