由NAD+还原反应测定的 PDHC 总活性实验 实验方法
实验所需「试剂」具体见「其他」
0.98 ml 实验混合物
0.02 ml 酶样品
37℃ 时，在 340 nm 处吸收值发生变化。NADPH 的吸收系数 ε340＝6.3×103 l/（mol·cm）。
试剂：
0.1 mol/L 磷酸钾，pH 7.6
0.1 mol/L NAD＋（Mr＝663.4，游离酸；663 mg 溶于 10 ml 水中）
0.01 mol/L 二磷酸硫胺（ThDP，脱竣辅酶，Mr＝460.8；46.1 mg 溶于 10 ml 水中）
0.1 mol/L MgCl2（MgCl2·6H2O，Mr＝203.3；203 mg 溶于 10 ml 水）
0.1 mol/L 丙酮酸（丙酮酸钠，Mr＝110.0；110 mg 溶于 10 ml 水中）
0.1 mol/L 二硫代苏糖醇（DTE，Mr＝154.2，或二硫代苏糖醇、DTT，Mr＝154.2；154 mg 溶于 10 ml 水中）
0.01 mol/L 辅酶 A（游离酸，Mr＝767.5，CoA·Li3，Mr＝785.4；23 mg 溶于 3 ml 水中）
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发布于 ： 2018-08-06
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