《《酵母遗传学方法实验指南》——生命科学实验指南..._中国图书网
| 实验步骤 | 各种型号的显微操作平台所附带的显微针在四分体解剖、分离合子以及操作单个细胞都十分有用。显微针可以从商业公司购买。或者，将细的玻璃纤维粘在弯的玻璃毛细吸液管上，自己制作显微针，下面介绍两种方法： 方法一：显微针是用直径2mm的玻璃丝在酒精喷灯上拉出来的（ScottandSnow1978)。针的具体直径要根据实验的具体要求，大直径（lOOum)的针比较容易挑取和转移孢子，然而在操作细胞密度比较高的区域是小直径（25um)的针会比较合适，一般而言直径SOjam的针能满足大多数实验。在拉针时，将玻璃丝置于酒精喷灯的上方直到玻璃棒发热呈橘红色，将玻璃丝拉成合适直径的纤维，然后移出火焰。拉出的玻璃纤维切成约2cm长的片段，并置于预先打湿的玻片上，然后用剃须刀片或玻璃盖玻片切成lcm的长度。理想的显微针应该有光滑平整的末端（图23.1),可以用显微镜观察直径和末端是否合适。  纤维针的玻璃支持棒是用直径2mm玻璃制作的，100ul玻璃毛细管正好适合。在距末端lcm处加热毛细管，当它变软时，向右弯成直角。在毛细管的末端滴一滴强力胶水，轻轻接触制作好的玻璃纤维，使玻璃纤维正好与毛细管支持棒的轴成直角，并且长度合适。显微针支持棒的长度应该适中，太短针头达不到平板表面。太长则容易扎入琼脂。当胶水干后，将显微针支持棒固定在显微操作平台上。 方法二：这种方法和第一种方法相同，区别在于不是自己制作针头，而是直接购买商品化的玻璃纤维。玻璃纤维剪成片段置于玻片上，然后用前面描述的方法制成末端光滑平整的显微针。和前面方法一样，显微针粘在支持棒上，然后固定在显微操作平台上。 |
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发布于 ： 2018-08-05
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