
zeptometrixzeptometrix成立于1999年,是一家为药物研究行业提供诊断产品和服务的的私人控股公司。zeptometrix公司(ZMC)是一个传染病诊断行业先进者和创新者,为全球的客户提供值得信赖的产品和服务。zeptometrix是一个完全集成的生物技术公司的产品支持的研发的所有阶段;发展,验证,制和商业化的诊断测试。zeptometrix不断开拓创新,致力为生命科学行业带来更多优质产品与服务。
Zeptometrix Corporation(ZMC)是行业领dao者和创新者,为传染病诊断开发和质量控制提供优质,可靠和值得信赖的产品和服务。从检测概念到推出,我们的科学和运营团队为我们的客户提供了具有凝聚力,创造性和成本效益的解决方案。制造微生物产品zeptometrix是制造核酸扩增测试微生物控制的全球dingJI供应商之一。我们的基于NATtrol™*的产品远远超过行业质量标准,包括IVDCE控制,细菌控制,病毒控制,寄生虫控制,多标记质量控制等。我们的NAT控制产品可帮助实验室和医院简化测试过程,培训技术人员并校准设备。在zeptometrix,我们为合作伙伴提供大量细菌,病毒,寄生虫,真菌和噬菌体菌株,可根据贵公司的研究需求进行定制。我们的微生物菌株有多种不同的形式,包括质量控制组和分子控制。测试服务除了我们广泛的临床标本和微生物产品库存外,zeptometrix还为我们的合作伙伴提供分析测试服务。我们的测试服务可协助IVD提交的所有实验室测试领域,为我们的合作伙伴提供高效,低成本的解决方案,以便在他们自己的实验室或医生办公室进行测试。有关我们的微生物产品,测试服务或任何定制产品开发的问题,请立即LIAN系我们。让我们与您合作,定制您的测试解决方案。定制产品开发zeptometrix提供各种定制诊断产品开发,包括病毒学,细菌学,分子和免疫学服务。我们在我们的两个生物安全2级和3级实验室中生产和储存了大量微生物。我们的两家工厂都拥有符合ISO13485标准的质量管理体系,使我们能够有效地调整我们的产品和服务,以满足我们合作伙伴的研究和测试需求。Zeptometrix是一家私人控股公司,成立于1999年,为诊断和药物研究产品行业提供服务。在zeptometrix,我们始终了解研究成功通常需要团队方法。这就是为什么我们的公司理念“成为我们客户的合作伙伴”始终站在最前沿,因为我们与“合作伙伴”一起,共同改变全球传染病诊断行业。今天,我们自豪地为我们的全球合作伙伴提供各种突破性的,相关的和值得信赖的产品和服务。
Firegen血液RNA提取试剂盒(EDTA血)FirePure™BloodRNAExtractionKitFG0413-L Firegen血液RNA提取试剂盒(EDTA血)产品介绍: 该试剂盒为血液总RNA的提取提供了一个简单快速的解决方案。试剂盒基于超顺磁性的磁性粒子纯化技术,提取过程中无需使用有毒的酚lv仿抽提,也无需进行耗时的醇类沉淀,提取过程简单、耗时短。得到的RNA可直接用于RT-PCR、荧光定量、二代测序、病毒RNA检测等实验。高通量测序等下游实验。该试剂盒也可高效的与液体工作站和磁棒法磁珠自动提取系统配套使用,以进行快速、大样本量的提取。 产品特性: ※适配高通量自动化核酸提取仪,人工操作时间短 ※高收率,无降解 ※样本间差异低,结果重复性强 ※纯度高,无蛋白质、高分子量DNA污染 ※兼容自动化设备提取流程: 96深孔板、预装试剂--结合--洗涤1--DNase处理--洗涤1、2、3--洗脱
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在这种测定方法中有3种必要的试剂:①固相的抗原或抗体(免疫吸附剂) ②酶标记的抗原或抗体(标记物)③酶作用的底物(显色剂)
测量时,抗原(抗体)先结合在固相载体上,但仍保留其免疫活性,然后加一种抗体(抗原)与酶结合成的偶联物(标记物),此偶联物仍保留其原免疫活性与酶活性,当偶联物与固相载体上的抗原(抗体)反应结合后,再加上酶的相应底物,即起催化水解或氧化还原反应而呈颜色。
其所生成的颜色深浅与欲测的抗原(抗体)含量成正比。 这种有色产物可用肉眼、光学显微镜、电子显微镜观察,也可以用分光光度计(酶标仪)加以测定。其方法简单,方便迅速,特异性强。向左转|向右转
第一次:包被抗体浓度为:8ug/ml,4,2,1,0.5,0.25,0为A,B,C,D,E,F,G
血清稀释度为1:100
酶标抗体稀释度为:1:1000,1:5000,1:10000,1:25000为1,2,3,4
结果为:1234
A3.3440.7120.4900.238
B2.7570.5230.3450.176
C2.4280.4550.3100.172
D>4.51.7771.2150.439
E>4.51.3570.7890.424
F1.1090.2540.1720.110
G1.3660.3310.1970.069(空白)从结果可以判断包被抗体浓度1ug/ml最合适
第二次:包被抗体1ug/ml
血清稀释度为1:25,1:50,1:100,1:150,1:200,1:250,1:300,空白为A,B,C,D,E,F,G,H
酶标抗体稀释度为:1:1000,1:5000,1:10000,1:25000为1,2,3,4
结果为:1234
A2.9930.6390.3380.236
B3.0210.7220.3070.191
C2.3360.4960.3080.176
D2.2560.4640.3040.176
E2.0310.4160.2470.139
F1.8300.3360.2310.153
G1.5980.3320.2270.132
空白H0.1580.0780.0720.074
这样的话应该是血清稀释度1:50最合适,酶标抗体稀释度1:1000最合适,但是这样的话OD值为3.021,是不是太大了?OD值是不是在1左右比较好呢?应该选择哪个浓度,哪个稀释度来做正式试验呢?
1.标准曲线的标准品是否一定要梯度稀释,为什么?我试过非梯度稀释的,也可以达到线性R2=0.99.
2.我用了CurveExpert做标曲,自动搜索后发现有10种提供的方程,各种形式的,其中一个十分适合我的实验结果(LogisticModel),而其他的感觉又不适合,因为结果常常为负值。这又是为啥捏?
3.实验的酶标仪最大OD值可以测到4,如果我的测量结果在1.3,是否像其他人所说的>1了就不准确了。
4.利用夹心法进行定量分析是否一定要使用线性方程?
不好意思啊,一下问了这么多问题,最近做了一个月的ELISA,完全摸不清头脑啊。谢谢各位了
ELISA双抗体夹心法(enzyme linked immunosorbent assay——sandwich technique)的原理是将特异性抗体结合到固相载体上形成固相抗体,然后和待检血清中的相应抗原结合形成免疫复合物,洗涤后再加酶标记抗体,与免疫复合物中抗原结合形成酶标抗体-抗原-固相抗体复合物,加底物显色,判断抗原含量。
生物帮有相关介绍。编码RNA http://doc.bio1000.com/show-3399.html
(一)双抗体夹心法
(二)间接法
(三)竞争法
(四)双位点一步法
(五)捕获法测IgM抗体
(六)应用亲和素和生物素的ELISA
我现在用商品化的试剂盒进行夹心法ELISA测定某抗体的浓度,盒子给定了4个标准品,标准品抗体浓度为70000~1000单位,测定步骤中要求对样品进行1:1000稀释后测定。
但是有的样本按照1:1000稀释后,最终OD值大于70000浓度的标准品的OD值,然后使用ELISACALC软件进行四参数拟合,超过了标准曲线的范围,就算不出来这个样品的浓度,但是如果在1000-70000之间的OD值就可以算出相应浓度。请教大神们,接下来我是否可以对样品进行1:2000,1:4000浓度稀释,算出结果后再×2、×4,算作此样品的浓度呢?还是直接给一个>70000的定性结果?或者可以有能算出来的其他软件?
Ps试剂盒中提及Dilutionlinearity(稀释线性?)为141%,这个是什么意思呢?
多谢!!
(2)封闭:将已包被的板用洗涤液洗涤2次,每孔加入120 μL封闭液,封闭一段时间,取出,甩干备用。
(3)竞争反应:在制备好的板中每孔加入50 μL系列浓度的标准品溶液和50 μL稀释好的酶标抗体溶液,孵育一段时间。
(4)洗板:用洗涤液洗涤5次。
(5)显色反应:每孔加入显色溶液100 μL,孵育一段时间。
(6)终止:每孔各加入终止液,在酶标仪上测定各孔的吸光值。
下图为ELISA原理图,夹心法即Sandwich ELISA,竞争法就是Competitive ELISA
向左转|向右转
1、重复性不好;
2、收自身抗体、嗜异性抗体等干扰,易出现假阳性;
3、不论仪器和手工操作,干扰因素较多。影响最大的是温度和时间。1、直接法(direct ELISA)将抗原直接固定在固相载体上,参加酶符号的一级抗体,即可测定抗原总量,此一级抗体的特异性非常重要。优势:操作手续简略,因无须运用二抗可防止交互反响。缺陷:实验中的一抗都得用酶符号,但不是每种抗体都适合做符号,费用相对进步。2.间接法(indirect ELISA)此测定办法与直接法相似,不一样在于一级抗体没有酶符号,改用酶符号的二级抗体去辨识一级抗体来测定抗原量。优势:二抗能够加强信号,并且有多种挑选能做不一样的测定剖析。不加酶符号的一级抗体则能保存它最多的免疫反响性。缺陷:交互反响发作的机率较高。3.双抗体夹心法(sandwich ELISA)被检测的抗原包被在两个抗体之间,其间一个抗体将抗原固定于固相载体上,即捕捉抗体。另一个则是检测抗体,此抗体可用酶符号后直接测定抗原的量;或不符号,再透过酶符号的二级抗体来测定抗原的量。这两种抗体有必要当心选择,才可防止交互反响或竞争一样的抗原联系部位。优势:高活络、高专一性,抗原无须事前纯化。缺陷:抗原必定得具有两个以上的抗体联系部位。4.竞争法(competitive ELISA)样本里的抗原(自在抗原)和纯化并固定在固相载体上的抗原(固定抗原)一同竞争一样的抗体,当样品里的自在抗原越多,就能够联系越多的抗体,而固定抗原就只能联系到较少的抗体,反之亦然。经清洁过程,洗去自在抗原和抗体的复合物,只留下固定抗原和抗体的复合物,拿来与只要固定抗原的对照组成果相比拟,依据呈色区别就可计算出样品里的抗原含量。优势:可适用比拟不纯的样本,并且数据再现性很高。缺陷:全体的敏感性和专一性都较差。本数据来源于百度地图,最终结果以百度地图最新数据为准。

