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bellcoglass
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1964-45008R
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Description

2-Port Air Stone Stainless Steel Sparger Assembly is designed for the sparging of gases into the vessel liquid media. This design allows access through the side arms with a screw on cap assembly. Fully autoclavable.

Specifications:

  • Sparger Assembly For 6L L/P OHD Vessel
  • Fits Thru 45mm Sidearm
  • 316L SST Sparger Tube Is 15″ Long With 12mm Glass Frit. Course Porosity 40-60 Microns
  • 32 Ra Material Finish Or Better
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PurposeThe main purpose of the flow chamber assay is to visualize and measure interactions between flowing cells expressing a given adhesion molecule on their 查看更多>
The technique described here is a slight modification (March 1997) of methods presented in: Nagy A., J. Rossant. 1993. Production of completely ES cell-derived 查看更多>
IL-22 is an inflammatory cytokine related to IL-10 that is produced by T cells and that induces a response in cells through a heterodimeric cell surface recept 查看更多>
小鼠CD205,也称为DEC-205(树突状细胞和上皮细胞标记,205kD)。 其是一种完整的膜糖蛋白,与抗原摄取、处理和提呈相关,诱导抗原特异性T细胞免疫。CD205高表达于CD8阳性的树突状细胞,在骨髓Gr1+细胞、郎罕氏细胞(Langerhans cells)、骨髓来源的树突状细胞(BMDC)和胸腺上皮细胞也有不同水平的表达。 查看更多>
集中于 T 细胞的许多基础和临床免疫研究包括增殖测定,都是为了确定 T 细胞是否能够在不同的体外或体内条件下增殖。流式细胞仪术是测量 T 细 查看更多>
杆状病毒已经成为在真核细胞中表达重组蛋白质的标准工具。数千种胞内和分泌的蛋白质已经在昆虫细胞中成功表达。改造过的杆状病毒能够转导分裂的和不分裂的脊椎动物细胞,从而进一步扩大了杆状病毒表达载体系统(BEVS) 的应用范围。这就为通用的表达方法提供了基础,能通过一步克隆允许目的基因在一些不同类型的宿主中表达 。最近的发现证明杆状病毒能可以在哺乳动物中介导有效地基因递送。因为作为非哺乳类病毒,这类病毒无法在脊椎动物细胞中复制和表达病毒基因,所以,杆状病毒有成为有效的基因治疗载体的潜力。作者:T.弗里德曼等,译者 查看更多>
培养细胞染色体显示法1) 传代培养细胞染色体显示法1.培养细胞:取处于指数生长期、用较大瓶皿培养的、80%~90%汇合单层培养细胞。2.加秋水仙素:使用最终浓度为0.02~0.8微克/毫升营养液,温箱继续培养6~10小时;或用低温封闭法:把培养细胞置于4℃条件下6~12小时后,再于37℃温箱继续培养6 查看更多>
结直肠癌是世界第三大癌症,由腺瘤发展为恶性上皮肿瘤,并最终发生转移,其中,大约70%转移向肝,是造成患者死亡的首要原因。肝转移肿瘤对大多数化疗药物产生抗性,目前并没有较为有效的治疗方法。来自杜克大学,中国科学院生物物理研究所的研究人员发表了题为“Aldolase B-Mediated Fructose Meta-bolism Drives Metabolic Reprogramming of Colon Cancer Liver Met 查看更多>
凋亡细胞的原位末断转移酶标记法(TUNEL法) 细胞凋亡的多步骤机制作用的最终环节是;细胞内源性核酸内切酶的激活而导致核染色质DNA双链的断裂。大量DNA片段暴露出的3 羟基在末断转移酶(terminal deoxynucleotidyl transferase, TdT)或DNA多聚酶的作用下,与生物素或地高辛标记的核苷酸结合,最终借助与卵白素或抗地高辛抗体结合的荧光素或HRP,使凋亡细胞被特异性地标记和显示出来。 TUN... 查看更多>
人细胞凋亡抑制因子试剂盒,进口试剂盒http://www.aatbio.com.cn/人细胞凋亡抑制因子试剂盒用于盛放检测化学成分、药物残留、病毒种类等化学试剂的盒子。一般医院、制药企业使用。核酸提取纯化类、蛋白检测类、RNA。abcamhttp://www.aatbio.com.cn/goodsid/fenleiyi/3200090_abcam/1.htmlabihttp://www.aatbio.com.cn/goodsid/fen 查看更多>
采用美国Radnoti公司Langendorff离体心脏灌流系统,观察离体心脏功能变化,可排除其它组织器官、循环代谢产物的干扰。实验步骤:A.配制37℃ K-H液(1.25 CaCl2,130 NaCl,5.4 KCl,11 葡萄糖,0.5 MgCl2 查看更多>
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目前标记干细胞的MRI 对比剂主要有两类: 一类是以Gd3+对比剂即所谓顺磁性对比剂,主要产生T1 正性对比效应,目前有关的应用报道不多,主要是因为在目前MRI 场强下Gd3+的量需要达到相当程度,这在技术上尚有难度。
  当然也有几项研究成功地应用Gd3+复合物通过胞饮作用或细胞内吞作用进入细胞内而后行MRI 的报道。Modo 等应用右旋糖酐聚合物连接的Gd-DTPA 与若丹明颗粒(gadolinium rhodamine dextran,GRID )可同时提供MRI 和荧光组织显像,将之标记永生化小鼠神经干细胞MHP36 细胞后移植至脑缺血大鼠的海马后进行4.7 T MR 离体成像, 证实MRI 能可靠分辨移植细胞以及示踪细胞迁移。
  另一类是通过葡聚糖生物高分子包裹Fe3O4 晶体形成核壳式结构的超顺磁性氧化铁(superpara-magnetic iron oxide,SPIO) 纳米材料对比剂, 主要产生较强的T2 负性对比效应。其特点是粒径小、穿透力强且弛豫率约为同样 564 国际医学放射学杂志International Journal of Medical Radiology 2009 Nov; 32(6) 条件下Gd3+的7~10 倍,在很低浓度(nmol)时即可在 MRI 上形成对比且具有生物可降解性,能被细胞代谢后进入正常血浆铁池与红细胞血红蛋白结合或用于其他代谢过程。
  以上特点使氧化铁类对比剂更受关注,是目前较理想的磁共振示踪剂。近年来,间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSCs)磁标记后MRI 示踪已成功应用于中枢神经系统和心脏等器官。Jendelova 等[21]将SPIO 和BrdU 双重标记的MSCs 经对侧脑半球局部移植入大鼠脑皮质损伤模型, 术后28 d 常规1.5 T MRI 显示MSCs 从注射点向对侧脑损伤区域迁移,脑损伤区域内见特异性低信号分布持续至术后50 d。
  切片BrdU 免疫组化分析显示移植的MSCs 分化为神经元细胞,术后大鼠的神经功能改善,因此认为损伤组织可产生丰富的化学因子促使移植的MSCs 进行靶向迁移性修复。Kraitchman 等[22]利用Feridex 标记MSCs 经导管注入犬心肌梗死模型周边区域, 术后持续8 周,1.5 T MRI 明确观察到移植部位发出一条低信号线指向心肌梗死区域,心肌梗死面积逐渐减小。活体MRI 示踪磁标记MSCs 在骨关节领域也显示出重要的应用前景。
  Mayer-Kuckuk 等应用与荧光基团结合的氧化铁粒子标记7F2 细胞和MC3T3-E1#4 细胞, 从股骨干骨骺端注射30 μL 含1×105 个磁标记细胞的磷酸盐缓冲液(PBS)至小鼠股骨髓腔,7 T MR 活体成像显示骨髓腔内见特异性低信号持续至术后第9 天,此后髓腔内信号增高,提示移植MSCs 在股骨髓腔内部分丢失。
  居等应用磁性氧化铁纳米粒子和多聚赖氨酸(Poly-L-Lysine, PLL) 的偶联物 Fe2O3-PLL , 有效地标记了人脐血间充质干细胞,成功地进行了磁共振标记细胞成像, 且对细胞的活力、凋亡等生物学特性无明显影响。
  国内一些研究者进行的实验室结合前期间充质干细胞的磁标记工作,正在进行肝干细胞、神经干细胞的磁探针标记, 评价其对细胞活力增殖与凋亡代谢分化的影响,评价MRI 不同序列上不同浓度标记细胞的信号特点,并将标记后的肝干细胞进行正常及肝衰大鼠体内移植,神经干细胞标记后进行正常及大脑半球缺血大鼠体内移植,用MRI 动态示踪移植细胞分析移植细胞的生存状态,总结MRI 示踪干细胞的理论依据、技术方法及影像学表现特征,达到活体下追踪干细胞存活迁移的目的[24-27]。虽然MRI 示踪干细胞已经显示出了良好的应用前景,但磁标记会随着细胞分裂而稀释,在监测移植后干细胞的分化方面尚存在不足[28],有待进一步改进。
  综上所述,有关干细胞标记和活体示踪方面的研究虽然取得了重要进展,但尚有许多问题需要解决,目前应用的各种标记示踪方法都有自己的优缺点, 但是随着科技的发展以及相关实验的不断深入,各种标记示踪方法目前存在的问题必定能够得到解决,其中尤其以MRI 活体示踪磁标记干细胞技术值得期待。利用无创伤性影像学技术活体示踪干细胞的研究将会取得重大突破。

各位版友求助,

我使用Hek293构建转染模型,瞬转5质粒,用lipo2000做转染体系。

转染48h,发现荧光较强的细胞都在爬片的边缘,比例十分少。是因为我添加试剂的手法不对吗。

同时也发现加入转染体系后细胞状态特别差。想问一下用lipo2000时可以用无双抗的10%FBSDMEM吗。我转染前6h现在用的是纯DMEM,不含FBS。


请各位大神帮忙

我目前遇到的瞬时转染,没有专门做细胞同步化的。

但是有在转染前,将细胞进行重新传代的情况,这样做的目的在于保持细胞的活性状态。
“转染前将细胞以1.5-4.5X104 cells/well 的量(具体接细胞数请参考表1)接种在孔板中,于37℃, 5%CO2 的条件下进行培养,18-24小时( sf9细胞为3-4小时)后转染。”

用lip3000转染HAC15细胞,目的把质粒转入细胞,现阶段把带EGFP的质粒转进去就难,荧光显微镜下荧光很少,可以数清,按照lip3000说明书转染的(剂量有适当调整),求转染高手指点方法!!


如题。以及下面问题:

要检测转基因小鼠(不知道)和正常鼠细胞免疫的改变(T细胞)需要做那些实验?


http://www.proteinlounge.com/Default.aspx
pathwaybuild
CD11B: 单核细胞,巨噬细胞,中性粒细胞,NK细胞等
CD11C:树突细胞,单核细胞,巨噬细胞,中性粒细胞
淋巴因子促进B细胞增殖分化我知道,可是为什么还会促进T细胞增殖分化呢?
需要连接到载体上才能转染受体细胞,载体可能是质粒或者病毒
自我复制是细胞里面的DNA等遗传物质的复制,细胞增值指的是细胞分裂。
  自我复制也叫"自体复制"(self-duplication).生物体内通过代谢作用,按照原有结构复制成为完全相同的结构的生物合成过程.例如脱氧核糖核酸(DNA)在生物体内以原有的DNA分子为模板,合成两个完全相同的DNA分子的过程.
  细胞分裂(cell division)是指活细胞增殖其数量由一个细胞分裂为两个细胞的过程。分裂前的细胞称母细胞,分裂后形成的新细胞称子细胞。通常包括细胞核分裂和细胞质分裂两步。在核分裂过程中母细胞把遗传物质传给子细胞。
太浓了,有文献称Dapi用5ug/ml的就够了
是这个文献nanomedicine 2009;5:73-82
Karmali写的
质粒转染细胞后多久能提RNA做PCR
实验室一直都是用日常型质粒抽提试剂盒,转染细胞没问题。
我觉得只要是注意以下2点就可以了:
1,注意大肠杆菌(Escherichia coli)本身的污染,收集菌体沉淀时防止菌液散落,经常用75%的乙醇擦拭手套。
2,最后洗脱时最好使用无内毒素的水,我们是用注射用水的。
无论是小提还是大提我们都是用的日常型的,并没有刻意用转染级的,因为转染量大,去内毒素的操作太麻烦,损失太大。
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