Description
2-Port Air Stone Stainless Steel Sparger Assembly is designed for the sparging of gases into the vessel liquid media. This design allows access through the side arms with a screw on cap assembly. Fully autoclavable.
Specifications:
- Sparger Assembly For 6L L/P OHD Vessel
- Fits Thru 45mm Sidearm
- 316L SST Sparger Tube Is 15″ Long With 12mm Glass Frit. Course Porosity 40-60 Microns
- 32 Ra Material Finish Or Better
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当然也有几项研究成功地应用Gd3+复合物通过胞饮作用或细胞内吞作用进入细胞内而后行MRI 的报道。Modo 等应用右旋糖酐聚合物连接的Gd-DTPA 与若丹明颗粒(gadolinium rhodamine dextran,GRID )可同时提供MRI 和荧光组织显像,将之标记永生化小鼠神经干细胞MHP36 细胞后移植至脑缺血大鼠的海马后进行4.7 T MR 离体成像, 证实MRI 能可靠分辨移植细胞以及示踪细胞迁移。
另一类是通过葡聚糖生物高分子包裹Fe3O4 晶体形成核壳式结构的超顺磁性氧化铁(superpara-magnetic iron oxide,SPIO) 纳米材料对比剂, 主要产生较强的T2 负性对比效应。其特点是粒径小、穿透力强且弛豫率约为同样 564 国际医学放射学杂志International Journal of Medical Radiology 2009 Nov; 32(6) 条件下Gd3+的7~10 倍,在很低浓度(nmol)时即可在 MRI 上形成对比且具有生物可降解性,能被细胞代谢后进入正常血浆铁池与红细胞血红蛋白结合或用于其他代谢过程。
以上特点使氧化铁类对比剂更受关注,是目前较理想的磁共振示踪剂。近年来,间充质干细胞(mesenchymal stem cells, MSCs)磁标记后MRI 示踪已成功应用于中枢神经系统和心脏等器官。Jendelova 等[21]将SPIO 和BrdU 双重标记的MSCs 经对侧脑半球局部移植入大鼠脑皮质损伤模型, 术后28 d 常规1.5 T MRI 显示MSCs 从注射点向对侧脑损伤区域迁移,脑损伤区域内见特异性低信号分布持续至术后50 d。
切片BrdU 免疫组化分析显示移植的MSCs 分化为神经元细胞,术后大鼠的神经功能改善,因此认为损伤组织可产生丰富的化学因子促使移植的MSCs 进行靶向迁移性修复。Kraitchman 等[22]利用Feridex 标记MSCs 经导管注入犬心肌梗死模型周边区域, 术后持续8 周,1.5 T MRI 明确观察到移植部位发出一条低信号线指向心肌梗死区域,心肌梗死面积逐渐减小。活体MRI 示踪磁标记MSCs 在骨关节领域也显示出重要的应用前景。
Mayer-Kuckuk 等应用与荧光基团结合的氧化铁粒子标记7F2 细胞和MC3T3-E1#4 细胞, 从股骨干骨骺端注射30 μL 含1×105 个磁标记细胞的磷酸盐缓冲液(PBS)至小鼠股骨髓腔,7 T MR 活体成像显示骨髓腔内见特异性低信号持续至术后第9 天,此后髓腔内信号增高,提示移植MSCs 在股骨髓腔内部分丢失。
居等应用磁性氧化铁纳米粒子和多聚赖氨酸(Poly-L-Lysine, PLL) 的偶联物 Fe2O3-PLL , 有效地标记了人脐血间充质干细胞,成功地进行了磁共振标记细胞成像, 且对细胞的活力、凋亡等生物学特性无明显影响。
国内一些研究者进行的实验室结合前期间充质干细胞的磁标记工作,正在进行肝干细胞、神经干细胞的磁探针标记, 评价其对细胞活力增殖与凋亡代谢分化的影响,评价MRI 不同序列上不同浓度标记细胞的信号特点,并将标记后的肝干细胞进行正常及肝衰大鼠体内移植,神经干细胞标记后进行正常及大脑半球缺血大鼠体内移植,用MRI 动态示踪移植细胞分析移植细胞的生存状态,总结MRI 示踪干细胞的理论依据、技术方法及影像学表现特征,达到活体下追踪干细胞存活迁移的目的[24-27]。虽然MRI 示踪干细胞已经显示出了良好的应用前景,但磁标记会随着细胞分裂而稀释,在监测移植后干细胞的分化方面尚存在不足[28],有待进一步改进。
综上所述,有关干细胞标记和活体示踪方面的研究虽然取得了重要进展,但尚有许多问题需要解决,目前应用的各种标记示踪方法都有自己的优缺点, 但是随着科技的发展以及相关实验的不断深入,各种标记示踪方法目前存在的问题必定能够得到解决,其中尤其以MRI 活体示踪磁标记干细胞技术值得期待。利用无创伤性影像学技术活体示踪干细胞的研究将会取得重大突破。
经过无数次的大鼠肝脏插针灌注,忍受过实验结果不理想的打击和折磨,今天终于成功了,特分享些相关图片以鼓励还在奋战中的网友们。
现在急需使用这个机器,补试验,不知道哪位能够提供重庆的Seahorse机器信息。非常感谢!
Seahorse细胞代谢分析
美国海马细胞能量代谢实时测定仪/生物能量代谢测定仪XF(SeahorseXFExtracellularFluxAnalyzers)——2009年全球创新技术产品Top10!
美国海马生物科学利用细胞外流量(ExtracellularFlux,XF)检测专利技术,发明了业界第一款海马细胞能量代谢实时测定仪/生物能量代谢测定仪XF24/96,是进行细胞代谢分析、氧呼吸测定、药物代谢分析、线粒体有氧代谢和糖酵解等功能的最佳分析工具。
美国海马细胞能量代谢实时测定仪/生物能量代谢测定仪XF24通过特殊的细胞培养微孔板设计,在测量时临时形成的约5ul微环境中,利用无创的专利光学传感器同步地实时探测溶解氧(OCR)和pH值变化,从而快速了解细胞内两大能量转换途径(线粒体的有氧代谢和糖酵解)的能量代谢状态。在使用XF24的检测过程中,研究人员可以通过预设程序控制在特定时间向待测细胞的培养基中添加多达四种药物,以便研究不同药物对细胞新陈代谢的影响,理解细胞的生物能量变化,快速解析细胞或组织的基础代谢率、ATP转换、膜的完整性、极限呼吸率、线粒体功能,产生氧自由基及超氧化物等有毒物的情况,省时省力,实验数据更科学,更具有说服力。
各位版友求助,
我使用Hek293构建转染模型,瞬转5质粒,用lipo2000做转染体系。
转染48h,发现荧光较强的细胞都在爬片的边缘,比例十分少。是因为我添加试剂的手法不对吗。
同时也发现加入转染体系后细胞状态特别差。想问一下用lipo2000时可以用无双抗的10%FBSDMEM吗。我转染前6h现在用的是纯DMEM,不含FBS。
请各位大神帮忙
1,一个孔中应接种多少个细胞?
当使用标准96孔板时,贴壁细胞的最小接种量至少为1,000个/孔(100μl培养基)。检测白细胞时的灵敏度相对较低,因此推荐接种量不低于2,500个/孔(100μl培养基)。如果要使用24孔板或6孔板实验,请先计算每孔相应的接种量,并按照每孔培养基总体积的10%加入CCK-8溶液。
能否用384孔板进行试验?
2,可以。向各孔中加入培养基体积10%的CCK-8溶液,如果加入的CCK-8体积太少,可以先将CCK-8溶液稀释1倍,然后加入培养基体积20%的量。
3,能否用24孔板进行试验?
可以。向各孔中加入培养基体积10%的CCK-8溶液。
4,酚红会影响检测吗?
不会。培养基中酚红的吸光度可以在计算时,通过扣除空白孔中本底的吸光度而消去,因此不会对检测造成影响。
5,CCK-8与胸苷结合检测之间是否有相关性?
有。然而,请注意由于CCK-8使用的检测原理与胸苷检测的不同,因此结果可能不同。
6,CCK-8能否检测细菌细胞?
可以检测E.coli,但不能检测酵母细胞。向100μlE.coli培养液中加入10μlCCK-8溶液,并培养1-4个小时或过夜。
7,CCK-8稳定吗?
CCK-8在0-5℃下能够保存至少6个月,在-20℃下避光可以保存1年。如果需要长期保存,我们推荐-20℃的储藏条件。
8,如果没有450nm的滤光片,还可以使用哪些其他滤光片?
还可使用450nm到490nm之间的滤光片。
9,如何减少由于CCK-8试剂在枪头上或孔壁上的残留所带来的误差?
可以在加样前用培养基稀释CCK-8试剂并混匀后加样。
10,CCK-8是什么颜色?
应该是粉红色。若颜色不一样,有可能会影响测定。
以上内容来自英格恩生物CCK8试剂盒

