Astrocytes are the major cell type and among the most functionally diverse group of cells in the mammalian brain. They provide a variety of supportive functions to their partner neurons in the central nervous system (CNS); such as neuronal guidance during development, and nutritional and metabolic support throughout life. Human Astrocytes play important roles in various pathological processes. Impairment of normal astrocyte functions during stroke and other insults can critically influence neuron survival. Long-term recovery after brain injury, through neurite outgrowth, synaptic plasticity, or neuron regeneration, is also related to astrocyte surface molecule expression and trophic factor release. Much of what we have learned about astrocytes is from in vitro studies and astrocyte culture is a useful tool for exploring the diverse properties of this cell type. They are also very useful cells to stablish disease models for High Throughput and Hight Content Screening.
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- Reference: P10251-IM
- Size/Quantity: 1x106 cells / vial
- Product Use: For research use only
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- Technical Sheet / Cell Culture Manual
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2021-09-11
缩小细胞培养体积试验证明,MSCs最好培养于直径15cm的Nunclon或Corning板中,面积在140cm2和150cm2之间。细胞产率取决于培养皿的数量,一般使用此方法传代,每个培养皿中可收获5X105个细胞。来源:《人干细胞培养》 查看更多
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2019-12-28
Anatrace Ancell 丁香通为您找到 3 条 复苏冻存 产品的详细参数,实时报价、价格行情、优质批发/供应等信息,您还可以找 冻存细胞复苏,cm6,固体密度计 等产品信... 查看更多
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Load both sides of the hemacytometer with the cell suspension - covering both counting grids. Count the number of cells in 5 out of 9 squares from each countin 查看更多
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2021-09-09
货号:039-23511 查看更多
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2021-07-21
人类胚胎干细胞冻存液(2×)是由上海斯丹赛生物技术有限公司代理或销售的斯丹赛品牌的试剂,产品来源于上海。上海斯丹赛生物技术有限公司是中国最权威的人类胚胎干细胞冻存液(2×)试剂销售服务商之一,在上海等地方销售人类胚胎干细胞冻存液(2×)试剂已经多年。生物在线为您提供众多企业人类胚胎干细胞冻存液(2×)仪器产品及图片,以便挑选到性价比高,合适的人类胚胎干细胞冻存液(2×)产品 查看更多
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2021-09-20
For amplification of cognate sequences from different organisms, or for "evolutionary PCR", one may increase the chances of getting product by designing 查看更多
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2021-08-30
Cosmo Bio 精品推荐——小鼠精子冻存液和体外受精培养基FERTIUP® and CARD MEDIUM® 保证实验小鼠精子冷冻保存效果,提高小鼠体外受精效率 FERTIUP® 和CARD MEDIUM® 是用于小鼠精子冷冻保存、精子孵育及体外受精的高性能试剂。当FERTIUP® 和CARD MEDIUM® 联合使用时,可使冻融的小鼠精子保持稳定的高受精率。相比传统方法,FERTIUP精子冻存液、预孵化培养基可显著改善C5... 查看更多
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2018-12-26
菌种保存和微生物常识1、常用培养基的制备、灭菌与消毒 营养:从外部环境摄取其生命活动所必需的能量和物质,满足生长和繁殖需要的一种生理过程。是生命活动的物质基础,是生命活动 查看更多
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2018-12-26
第二节 含微生物样品的富集培养富集(enrichment)培养是在目的微生物含量较少时,根据微生物的生理特点,设计一种选择性培养基,创造有利的生长条件,使目的微生物在最适的环境下迅速 查看更多
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2021-07-23
造血干细胞(HSC)具有多向分化和自我更新的能力,来自于中胚层成血管细胞。HSC可分化成各类血细胞,如髓系和淋巴血细胞等。HSC存在于成人骨髓,外周血及脐带血中。小鼠研究发现,HSC分为两类细胞群,分为长期HSC和短期HSC。长期HSC可自我更新,短期HSC也叫造血祖细胞,可分化为所有类型血细胞,并可通过特定的marker进行鉴定。比如,HSC分化为淋巴细胞和粒细胞,可通过 查看更多
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Tissue Culture Media We use two different kinds of media. Most cells are grown in DMEM. A few lymphoid cell lines are grown in RPMI. Cells grown in DMEM must b 查看更多
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2020-03-21
弘业新创抗体技术股份有限公司在发布的必拓®无血清快速细胞冻存液(2mL*5支)供应信息,浏览与必拓®无血清快速细胞冻存液(2mL*5支)相关的产品或在搜索更多与必拓®无血清快速细胞冻存液(2mL*5支)相关的内容。 查看更多
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DMSO反复冻融了4次还能用于细胞冻存吗?对细胞有影响吗?求助 123
换行符4M9i2017-09-29
二甲基亚砜是一种重要的渗透型细胞保护剂。在深低温(零下200度)保存细胞时冻存过程中,为防止细胞内液冰晶形成、渗透压改变、细胞结构紊乱等导致的损
伤,有必要使用含有DMSO冷冻保护剂。 DMSO能够快速穿透细胞膜进入细胞中,降低冰点、延缓冻存过程, 同时提高细胞内离子浓度,
减少细胞内冰晶的形成,从而减少细胞损伤。深低温时二甲基亚砜的细胞毒性受到抑制。复苏时动作要快,尽快洗掉二甲基亚砜,否则会造成对细胞严重的毒性。二
甲基亚砜(DMSO)是目前最好的细胞冻存保护剂,但也是一种以细胞毒性很大的化学试验剂。研究结果表明,培养液中DMSO浓度为10%时,细胞生长抑制
率近100%;1‰浓度时抑制率为35%,即使是0.04‰的浓度,DMSO对细胞的生长也有不利的影响。
伤,有必要使用含有DMSO冷冻保护剂。 DMSO能够快速穿透细胞膜进入细胞中,降低冰点、延缓冻存过程, 同时提高细胞内离子浓度,
减少细胞内冰晶的形成,从而减少细胞损伤。深低温时二甲基亚砜的细胞毒性受到抑制。复苏时动作要快,尽快洗掉二甲基亚砜,否则会造成对细胞严重的毒性。二
甲基亚砜(DMSO)是目前最好的细胞冻存保护剂,但也是一种以细胞毒性很大的化学试验剂。研究结果表明,培养液中DMSO浓度为10%时,细胞生长抑制
率近100%;1‰浓度时抑制率为35%,即使是0.04‰的浓度,DMSO对细胞的生长也有不利的影响。
新鲜血液离心后冻存血浆,剩下的血细胞还可用来提取cdna吗 123
乱心or672017-09-29
很高兴能为你解答提问. 最好用新鲜血液提取,不具备条件时先抗凝再冷冻保存. 抗凝剂最好用肝素,因为EDTA可能会对后续的PCR有影响,会螯合PCR反应中的Mg2+,亦可根据实验要求选择适当的抗凝剂. 冷冻血液的保存:先液氮速冻,再置于- 80℃保存. 用TRIZOL试剂盒防止RNA降解.
关于冻存管的使用以及注意事项 | | 化工资讯网123
2021-08-19
具体看情况而定,实验室用的晶安生物的。
细胞冻存的方法与步骤 123
央央优耄Iy5M02017-09-29
(一)仪器
1. 净化工作台
2. 离心机
3. 恒温水浴箱
4. 冰箱(4℃、-20℃、-70℃)
5. 倒置相差显微镜
6. 培养箱
7. 液氮冰箱
(二)玻璃器皿
1. 吸管(弯头、直头)
2. 培养瓶
3. 玻璃瓶(250ml、100ml)
4. 废液缸
(三)塑料器皿
1. 吸头
2. 枪头
3. 胶塞
4. 移液管(10ml)
5. 15ml离心管
6. 冻存管(1~2ml)
(四)其他物品
1. 微量加样枪
2. 红血球计数板
3. 记号笔
4. 医用橡皮膏
5. 移液枪
(五)试剂
1. D-Hanks液
2. 小牛血清
3. 培养液
4. 双抗(青霉素、链霉素)
5. 胰蛋白酶(0.08%)
6. 1NHCl
7. 7.4%NaHCO3
8. DMSO(分析纯)或无色新鲜甘油 (一)细胞冻存
1. 配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的冻存培养液;
2. 取对数生长期的细胞,用胰蛋白酶把单层生长的细胞消化下来,悬浮生长的细胞则直接将细胞移至15ml离心管中;
3. 离心1000rpm,5min;
4. 去除胰蛋白酶及旧的培养液,加入适量配制好的冻存培养液,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,计数,调节冻存液中细胞的最终密度为5×106/ml~1×107/ml;
5. 将细胞分装入冻存管中,每管1~1.5 ml;
6. 在冻存管上标明细胞的名称,冻存时间及操作者;
7. 冻存:标准的冻存程序为降温速率-1~-2℃/ min;当温度达-25℃以下时,可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃时,则可迅速浸入液氮中。也可将装有细胞的冻存管放入-20℃冰箱2h ,然后放入-70℃冰箱中过夜,取出冻存管,移入液氮容器内。
(二) 细胞复苏
1. 从液氮容器中取出冻存管,直接浸入37℃温水中,并不时摇动令其尽快融化。
2. 从37℃水浴中取出冻存管,打开盖子,用吸管吸出细胞悬液,加到离心管并滴加10倍以上培养液,混匀;
3. 离心, 1000rpm,5min;
4. 弃去上清液,加入含10%小牛血清培养液重悬细胞,计数,调整细胞密度,接种培养瓶,37℃培养箱静置培养;
5. 次日更换一次培养液,继续培养。 1.从增殖期到形成致密的单层细胞以前的培养细胞都可以用于冻存,但最好为对数生长期细胞。在冻存前一天最好换一次培养液;
2.将冻存管放入液氮容器或从中取出时,要做好防护工作,以免冻伤;
3.冻存和复苏最好用新配制的培养液。向左转|向右转
1. 净化工作台
2. 离心机
3. 恒温水浴箱
4. 冰箱(4℃、-20℃、-70℃)
5. 倒置相差显微镜
6. 培养箱
7. 液氮冰箱
(二)玻璃器皿
1. 吸管(弯头、直头)
2. 培养瓶
3. 玻璃瓶(250ml、100ml)
4. 废液缸
(三)塑料器皿
1. 吸头
2. 枪头
3. 胶塞
4. 移液管(10ml)
5. 15ml离心管
6. 冻存管(1~2ml)
(四)其他物品
1. 微量加样枪
2. 红血球计数板
3. 记号笔
4. 医用橡皮膏
5. 移液枪
(五)试剂
1. D-Hanks液
2. 小牛血清
3. 培养液
4. 双抗(青霉素、链霉素)
5. 胰蛋白酶(0.08%)
6. 1NHCl
7. 7.4%NaHCO3
8. DMSO(分析纯)或无色新鲜甘油 (一)细胞冻存
1. 配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的冻存培养液;
2. 取对数生长期的细胞,用胰蛋白酶把单层生长的细胞消化下来,悬浮生长的细胞则直接将细胞移至15ml离心管中;
3. 离心1000rpm,5min;
4. 去除胰蛋白酶及旧的培养液,加入适量配制好的冻存培养液,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,计数,调节冻存液中细胞的最终密度为5×106/ml~1×107/ml;
5. 将细胞分装入冻存管中,每管1~1.5 ml;
6. 在冻存管上标明细胞的名称,冻存时间及操作者;
7. 冻存:标准的冻存程序为降温速率-1~-2℃/ min;当温度达-25℃以下时,可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃时,则可迅速浸入液氮中。也可将装有细胞的冻存管放入-20℃冰箱2h ,然后放入-70℃冰箱中过夜,取出冻存管,移入液氮容器内。
(二) 细胞复苏
1. 从液氮容器中取出冻存管,直接浸入37℃温水中,并不时摇动令其尽快融化。
2. 从37℃水浴中取出冻存管,打开盖子,用吸管吸出细胞悬液,加到离心管并滴加10倍以上培养液,混匀;
3. 离心, 1000rpm,5min;
4. 弃去上清液,加入含10%小牛血清培养液重悬细胞,计数,调整细胞密度,接种培养瓶,37℃培养箱静置培养;
5. 次日更换一次培养液,继续培养。 1.从增殖期到形成致密的单层细胞以前的培养细胞都可以用于冻存,但最好为对数生长期细胞。在冻存前一天最好换一次培养液;
2.将冻存管放入液氮容器或从中取出时,要做好防护工作,以免冻伤;
3.冻存和复苏最好用新配制的培养液。向左转|向右转
在80度冰箱保存的植物叶片(大概两三个月了)还能提取出完整的叶绿体么...123
2021-08-11
可以,或者保存在液氮中
(完整版)微生物标本采集及保存要求123
2021-08-08
ELISA实验中血清的采集、处理和保存; 1、 真空采血针采集2ml新鲜血液,加入无菌试管中; 2、 采血后室温静置1小时; 3、 将采集血液用离心机4℃,2500rpm离心10min,,将离心好的匀浆留上清,弃下面沉淀ELISA实验中血浆的采集、处理和保存; 1、 真空采血针采集2ml新鲜血液,加入无菌试管中; 2、 按1:9加入抗凝剂(EDTA、草酸钠、肝素、枸橼酸钠),30分钟内于冰上分离血浆以 减少血小板的污染;(也可以直接用抗凝管采集); 3、 将采集血液用离心机4℃,2500rpm离心5min,,将离心好的匀浆留上清,弃下面沉淀。 4、 取上清。 分装冻存备用,
酵母转化试剂盒中peg中文名是什么意思123
亚由美JOA2017-09-29
酵母转化试剂盒中peg中文名是什么意思
1、毕氏酵母氯化锂转化法
(1)试剂1M LiCl(用去离子蒸馏水配制,滤膜过滤除菌;必要时用消毒去离子水稀释)50% PEG3350(Sigma P3640 用去离子蒸馏水配制,滤膜过滤除菌,用较紧的盖子的瓶子分装)2mg/ml salmon sperm DNA / TE(10mM Tris-Cl, pH8.0, 1.0mM EDTA)-20℃保存注:醋酸锂对毕氏酵母无效,仅氯化锂有效;PEG3350可屏蔽高浓度LiCl的毒害作用;
(2)感受态毕氏酵母的制备接种Pachia pastoris到50ml YPD培养基中,30℃摇菌过夜(约24~28h)培养到OD值为0.8~1.0(约108 Cells/ml);收获细胞,用25ml无菌水洗涤一次,室温下1500g离心10min;重悬细胞于1ml 100mM LiCl溶液中,将悬液转入1.5ml离心管;离心机最大速度离心15秒沉淀菌体,重悬菌体于400ul 100mM LiCl溶液中;按50ul/管分装,立即进行转化;注:不要将感受态酵母菌冰浴;
(3)毕氏酵母的转化煮沸1ml鲑鱼精DNA 5min,迅速冰浴以制备单链担体DNA;将感受态酵母菌离心,以Tips去除残余的LiCl溶液;对于每一个转化,按以下顺序加入:50% PEG3350 240ul1M LiCl 36ul2mg/ml 单链Salmon sperm DNA 25ul5~10ug/50ul H2O 质粒DNA 50ul剧烈旋涡混匀直至沉淀菌体完全分布均匀(约1min);30℃水浴孵育30min;42℃水浴热休克20~25min;6000~8000rpm离心收集酵母菌体;重悬酵母于1ml YPD培养基,30℃摇床孵育;1~4h后,取25~100ul菌液铺选择性培养基平板,于30℃培养2~3天鉴定;
2、毕氏酵母PEG1000转化法
(1)试剂缓冲液A:1.0M Sorbitol,10mM Bicine,pH8.35(sigma),3%(v/v)ethylene glycol缓冲液B:40%(w/v)PEG1000(sigma),0.2M Bicine,pH8.35缓冲液C:0.15M NaCl,10mM Bicine,pH8.35未污染的新鲜、试剂级DMSO,-70℃保存注:缓冲液A、B、C均用滤膜过滤,-20℃保存;将DNA直接加在冻结的酵母细胞上是本实验的关键之处(即使在冰上解冻的待转化细胞,其摄取外源DNA的能力也在解冻过程中迅速下降;如进行多样品的转化,建议按6样品/组进行);
(2)待转化毕氏酵母的制备接种环接种Pachia pastoris于YPD平板,30℃培养2d;挑取单克隆酵母菌株于10mlYPD培养基中,30℃振荡培养过夜;取步骤2中小量菌液接种到100mlYPD培养基中振荡培养,待其OD值从0.1升到0.5~0.8;室温下3000g离心收集酵母菌体,50ml缓冲液A洗涤一次;重悬菌体于4ml缓冲液A中,按0.2ml/管分装于1.5ml的离心管中,每管加入11ulDMSO,混合后迅速于液氮中冷冻,-70℃保存
(3)毕氏酵母的转化将约50ug线性化质粒DNA溶于20ul TE或水中,直接加于冻结的酵母细胞中;加入担体DNA(40ug变性超声线性化鲑鱼精DNA)以获得最大转化率;37℃水浴孵育5min,中间混合样品1~2次;取出离心管,加入1.5ml缓冲液B,彻底混匀;30℃水浴孵育1h;室温下2000g离心10min,去除上清液,菌体沉淀重悬于1.5ml缓冲液C中;离心样品,去除上清液,轻微操作将样品重悬于0.2ml缓冲液C中;将所有转化液铺于选择性平板,于30℃孵育3~4天后,鉴定;
3、毕氏酵母电转化法
(1)E.coli TOP10F’感受态细胞的制备取10ul TOP10F’菌液,接种于200ml LB液体培养基中活化培养,37℃,200 rpm,16~18小时。取100ul菌液接种于200ml液体LB培养基中。37℃,200 rpm,培养16~18小时。灭菌500 ml离心管,4℃,4000 rpm,20 min。得菌体沉淀。弃上清,菌体用10%甘油重悬并洗涤。重复洗涤3次。第三次离心后,弃绝大部分上清,留下约1ml 液体用于重悬菌体。从制得得感受态细胞中,取200ul于灭菌EP管中,加入连接反应产物5ul,混匀,不要产生气泡,在冰上放置5min。将混匀后得200ul菌液移入电击杯中。使用电击穿孔仪进行转化,设置为电压 2500 V,时间 5 ms。电击后,往电击杯中加入 800ul SOC培养基,冲洗出菌体,转移至灭菌1.5 ml EP管中。37℃,150 rpm ,轻摇45~60 min。取全部均匀涂布于含 Zeocin 25 ug/ml 的LLB-Zeocin平板上,正放,待涂布液不在流动,37℃ 培养12~16小时。
(2)线性化质粒DNA对Pichia pastorisGS115的转化取新鲜制备的(或-70℃冻存的)感受态细胞置于冰浴中,使其完全解冻;
1)将100μl菌体移出至一新的无菌Eppendorf管中,加入5-20μg线性化质粒(5~10μl),轻弹混匀,尽数吸出转移到0.2cm型的电穿孔转化杯中;
2) 转化杯置于冰浴中5~10分钟,保持低温。
3) 电穿孔转化电击条件:电压:1500V;电阻:400Ω;电容:25μF;脉冲时间:10mS;一次电击。
4) 电击后,马上在电击转化杯中加入1ml 4℃预冷的1M的山梨醇溶液,用微量移液枪吹打均匀,置于冰浴中;5) 取30℃烘至表面半干的MD培养基平板,在超净工作台上无菌操作涂布平板,400μl/板
1、毕氏酵母氯化锂转化法
(1)试剂1M LiCl(用去离子蒸馏水配制,滤膜过滤除菌;必要时用消毒去离子水稀释)50% PEG3350(Sigma P3640 用去离子蒸馏水配制,滤膜过滤除菌,用较紧的盖子的瓶子分装)2mg/ml salmon sperm DNA / TE(10mM Tris-Cl, pH8.0, 1.0mM EDTA)-20℃保存注:醋酸锂对毕氏酵母无效,仅氯化锂有效;PEG3350可屏蔽高浓度LiCl的毒害作用;
(2)感受态毕氏酵母的制备接种Pachia pastoris到50ml YPD培养基中,30℃摇菌过夜(约24~28h)培养到OD值为0.8~1.0(约108 Cells/ml);收获细胞,用25ml无菌水洗涤一次,室温下1500g离心10min;重悬细胞于1ml 100mM LiCl溶液中,将悬液转入1.5ml离心管;离心机最大速度离心15秒沉淀菌体,重悬菌体于400ul 100mM LiCl溶液中;按50ul/管分装,立即进行转化;注:不要将感受态酵母菌冰浴;
(3)毕氏酵母的转化煮沸1ml鲑鱼精DNA 5min,迅速冰浴以制备单链担体DNA;将感受态酵母菌离心,以Tips去除残余的LiCl溶液;对于每一个转化,按以下顺序加入:50% PEG3350 240ul1M LiCl 36ul2mg/ml 单链Salmon sperm DNA 25ul5~10ug/50ul H2O 质粒DNA 50ul剧烈旋涡混匀直至沉淀菌体完全分布均匀(约1min);30℃水浴孵育30min;42℃水浴热休克20~25min;6000~8000rpm离心收集酵母菌体;重悬酵母于1ml YPD培养基,30℃摇床孵育;1~4h后,取25~100ul菌液铺选择性培养基平板,于30℃培养2~3天鉴定;
2、毕氏酵母PEG1000转化法
(1)试剂缓冲液A:1.0M Sorbitol,10mM Bicine,pH8.35(sigma),3%(v/v)ethylene glycol缓冲液B:40%(w/v)PEG1000(sigma),0.2M Bicine,pH8.35缓冲液C:0.15M NaCl,10mM Bicine,pH8.35未污染的新鲜、试剂级DMSO,-70℃保存注:缓冲液A、B、C均用滤膜过滤,-20℃保存;将DNA直接加在冻结的酵母细胞上是本实验的关键之处(即使在冰上解冻的待转化细胞,其摄取外源DNA的能力也在解冻过程中迅速下降;如进行多样品的转化,建议按6样品/组进行);
(2)待转化毕氏酵母的制备接种环接种Pachia pastoris于YPD平板,30℃培养2d;挑取单克隆酵母菌株于10mlYPD培养基中,30℃振荡培养过夜;取步骤2中小量菌液接种到100mlYPD培养基中振荡培养,待其OD值从0.1升到0.5~0.8;室温下3000g离心收集酵母菌体,50ml缓冲液A洗涤一次;重悬菌体于4ml缓冲液A中,按0.2ml/管分装于1.5ml的离心管中,每管加入11ulDMSO,混合后迅速于液氮中冷冻,-70℃保存
(3)毕氏酵母的转化将约50ug线性化质粒DNA溶于20ul TE或水中,直接加于冻结的酵母细胞中;加入担体DNA(40ug变性超声线性化鲑鱼精DNA)以获得最大转化率;37℃水浴孵育5min,中间混合样品1~2次;取出离心管,加入1.5ml缓冲液B,彻底混匀;30℃水浴孵育1h;室温下2000g离心10min,去除上清液,菌体沉淀重悬于1.5ml缓冲液C中;离心样品,去除上清液,轻微操作将样品重悬于0.2ml缓冲液C中;将所有转化液铺于选择性平板,于30℃孵育3~4天后,鉴定;
3、毕氏酵母电转化法
(1)E.coli TOP10F’感受态细胞的制备取10ul TOP10F’菌液,接种于200ml LB液体培养基中活化培养,37℃,200 rpm,16~18小时。取100ul菌液接种于200ml液体LB培养基中。37℃,200 rpm,培养16~18小时。灭菌500 ml离心管,4℃,4000 rpm,20 min。得菌体沉淀。弃上清,菌体用10%甘油重悬并洗涤。重复洗涤3次。第三次离心后,弃绝大部分上清,留下约1ml 液体用于重悬菌体。从制得得感受态细胞中,取200ul于灭菌EP管中,加入连接反应产物5ul,混匀,不要产生气泡,在冰上放置5min。将混匀后得200ul菌液移入电击杯中。使用电击穿孔仪进行转化,设置为电压 2500 V,时间 5 ms。电击后,往电击杯中加入 800ul SOC培养基,冲洗出菌体,转移至灭菌1.5 ml EP管中。37℃,150 rpm ,轻摇45~60 min。取全部均匀涂布于含 Zeocin 25 ug/ml 的LLB-Zeocin平板上,正放,待涂布液不在流动,37℃ 培养12~16小时。
(2)线性化质粒DNA对Pichia pastorisGS115的转化取新鲜制备的(或-70℃冻存的)感受态细胞置于冰浴中,使其完全解冻;
1)将100μl菌体移出至一新的无菌Eppendorf管中,加入5-20μg线性化质粒(5~10μl),轻弹混匀,尽数吸出转移到0.2cm型的电穿孔转化杯中;
2) 转化杯置于冰浴中5~10分钟,保持低温。
3) 电穿孔转化电击条件:电压:1500V;电阻:400Ω;电容:25μF;脉冲时间:10mS;一次电击。
4) 电击后,马上在电击转化杯中加入1ml 4℃预冷的1M的山梨醇溶液,用微量移液枪吹打均匀,置于冰浴中;5) 取30℃烘至表面半干的MD培养基平板,在超净工作台上无菌操作涂布平板,400μl/板
哪些人需要做精液冷冻保存呢?精液保存生殖男科/四川省人类精子...123
2021-08-18
只有医院生殖中心和精子库才有资格做吧,自己好像不允许也没那个条件
【求助】试剂盒提取冻存全血DNA PCR技术讨论版论坛123
yangjie11262021-08-21
我用bioteke的中量全血基因组DNA提取试剂盒(溶液型)提取冻存全血DNA:蛋白质沉淀液处理后上清呈褐色或淡红色,不是无色;在加入异丙醇后是褐色或淡红色絮状沉淀,不是白色絮状DNA沉淀。
我是参照试剂盒说明一步一步来的,请问这是什么原因?
是不是溶血啦,还是蛋白质没有沉淀完全,如何解决这一问题?
感谢啦!
aliquots是什么意思 123
leo20012004-10-15
请教各位大侠,谢谢!!
如何正确复苏冻存HUVEC细胞 企业动态 123
驚嘆1022017-09-29
(转载,仅供参考)
1. 37℃水浴预热培养液(HUVEC-004)。
2. 从液氮中取出HUVEC的细胞管,快速将其置入37℃水浴中解冻,直到管中只剩下最后一片结晶(注意:不要让水没过产品管)。 用75%的酒精擦拭产品管外壁。
3. 将HUVEC的细胞管中的细胞移至15ml无菌离心管中,慢慢逐滴加入预温的37℃ 基础培养液(HUVEC-004B)培养液4-5ml混匀,边加边摇匀。
4. 用1ml的培养液冲洗HUVEC的细胞管,向15ml离心管中加入冲洗的细胞悬液,边滴加边摇匀。
5. 取10μl细胞悬液和10μl台盼蓝混匀后,取10μl计数。
这一步骤非常重要,能确定您收到的产品是否合格(详见如何计数复苏的细胞)
6. HUVEC的细胞悬液在1500rpm,室温条件下,离心10分钟,去除上清。
7. 加HUVEC完全培养液4-5ml, 轻轻混匀细胞,备用。
8. 接种前将 T25培养瓶中的包被液吸去,按2500-5000个细胞/cm2接种细胞。(1支冷冻的细胞可以种一瓶T25培养瓶)
9. 每个HUVEC的细胞培养瓶中加完全培养液(HUVEC-004)3-5ml, 后置于37℃、5%CO2 培养箱内培养。
1. 37℃水浴预热培养液(HUVEC-004)。
2. 从液氮中取出HUVEC的细胞管,快速将其置入37℃水浴中解冻,直到管中只剩下最后一片结晶(注意:不要让水没过产品管)。 用75%的酒精擦拭产品管外壁。
3. 将HUVEC的细胞管中的细胞移至15ml无菌离心管中,慢慢逐滴加入预温的37℃ 基础培养液(HUVEC-004B)培养液4-5ml混匀,边加边摇匀。
4. 用1ml的培养液冲洗HUVEC的细胞管,向15ml离心管中加入冲洗的细胞悬液,边滴加边摇匀。
5. 取10μl细胞悬液和10μl台盼蓝混匀后,取10μl计数。
这一步骤非常重要,能确定您收到的产品是否合格(详见如何计数复苏的细胞)
6. HUVEC的细胞悬液在1500rpm,室温条件下,离心10分钟,去除上清。
7. 加HUVEC完全培养液4-5ml, 轻轻混匀细胞,备用。
8. 接种前将 T25培养瓶中的包被液吸去,按2500-5000个细胞/cm2接种细胞。(1支冷冻的细胞可以种一瓶T25培养瓶)
9. 每个HUVEC的细胞培养瓶中加完全培养液(HUVEC-004)3-5ml, 后置于37℃、5%CO2 培养箱内培养。
【求助】冻存外周血细胞提取基因组DNA用哪个公司的试剂盒好 ...123
竹溪20062021-07-25
本研究是一单基因遗传病的基因连锁定位及突变分析,现采集了外周血标本冻存(已分离出血浆,血细胞冻存-80度),择期拟提取基因组DNA做连锁分析,请问各位同道:用哪个公司的DNA试剂盒最好,谢谢!

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