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ICL Lab/Horse IgM ELISA Kit/1.0 plate/E-70M
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ICL Lab/Horse IgM ELISA Kit/1.0 plate/E-70M
品牌 / 
ICL Lab
货号 / 
E-70M
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Horse IgM ELISA Kit

CATALOG # E-70M
Horse IgM ELISA Kit
Size1.0 plate
Price
$405.00
OR

Details

  • Horse
  • Goat
  • ELISA
  • IgM
  • 2-8C
  • Plasma, Serum
  • 10 ng/ml - 320 ng/ml
  • 3.801 ng/ml
  • 60 min.

Documents

  1. Data Sheet
  2. SDS

Kit Contents

  • 1

    One ELISA Micro Plate with 12 removable (8 well) micro well strips in holding frame, each coated with Affinity Purified Antibody

  • 2

    One ELISA Kit Data Sheet

  • 3

    One Certificate of Analysis

  • 4

    One 50 mL bottle of Diluent Running Buffer

  • 5

    One 50 mL bottle of 20X Concentrated Wash Solution

  • 6

    One 150 uL Vial of Affinity Purified HRP Conjugated Antibody in stabilizing buffer

  • 7

    One 12 mL vial of Chromogen-Substrate Solution

  • 8

    One 12 mL vial of Stop Solution

  • 9

    One Calibrator Vial

Citations

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This product is for research use only, not for diagnostic or therapeutic use.

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细胞冻存液 含血清不含DMSO 查看更多>
快速复苏细胞,缓慢稀释,以高细胞密度重新接种来源:动物细胞培养:基础技术指南第五版 查看更多>
上海徕创生物科技有限公司在发布的Cryosure-DMSO(二甲基亚砜)细胞冻存液供应信息,浏览与Cryosure-DMSO(二甲基亚砜)细胞冻存液相关的产品或在搜索更多与Cryosure-DMSO(二甲基亚砜)细胞冻存液相关的内容。 查看更多>
For amplification of cognate sequences from different organisms, or for "evolutionary PCR", one may increase the chances of getting product by designing 查看更多>
Contributor: Suprya JayadevDate: January 10, 19911) Keep prepared solutions on ice.2) Determine total cell count of cells to be frozen. (e.g. 1 X 108 )3) Deter 查看更多>
北京裕恒丰科技有限公司在发布的细胞冻存液供应信息,浏览与细胞冻存液相关的产品或在搜索更多与细胞冻存液相关的内容。 查看更多>
1.何时须更换培养基?视细胞生长密度而定,或遵照细胞株基本资料上之更换时间,按时更换培养基即可。2.如何选用特殊细胞系培养基?培养某一类型细胞没有固定的培养条件。在MEM中培养的细胞,很可能在DMEM或M199中同样很容易生长。总之,首选MEM做粘附细胞培养、 RPMI-1640做悬浮细胞培养是一个好的开始。3.可否使用与原先培养条件不同之培养基?不能。每一细胞株均有其 查看更多>
上海笃玛生物科技有限公司在发布的精子细胞冻存液进口原装供应信息,浏览与精子细胞冻存液进口原装相关的产品或在搜索更多与精子细胞冻存液进口原装相关的内容。 查看更多>
Tissue Culture Media We use two different kinds of media. Most cells are grown in DMEM. A few lymphoid cell lines are grown in RPMI. Cells grown in DMEM must b 查看更多>
友康恒业生物科技(北京)有限公司在发布的无血清细胞冻存液供应信息,浏览与无血清细胞冻存液相关的产品或在搜索更多与无血清细胞冻存液相关的内容。 查看更多>
您是否也经常有这些困扰?每次冻存细胞都需要现配冻存液,太麻烦程序降温(4℃~-20℃~-80℃~液氮),太繁琐太耗时90%血清+10%DMSO冻存,成本太高细胞比较娇贵,细胞冻存后复苏率太低日本A/B品牌无血清冻存液好用,价格太高…………那是时候换一款无需程序降温的细胞冻存液了~~特别配方有效提高细胞冻存活率和复苏活力不含血清,不含动物来源性蛋白能减少各类病毒、霉菌和支原体等的污染... 查看更多>
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细胞冻存的方法与步骤 123
央央优耄Iy5M02017-09-29
(一)仪器
1. 净化工作台
2. 离心机
3. 恒温水浴箱
4. 冰箱(4℃、-20℃、-70℃)
5. 倒置相差显微镜
6. 培养箱
7. 液氮冰箱
(二)玻璃器皿
1. 吸管(弯头、直头)
2. 培养瓶
3. 玻璃瓶(250ml、100ml)
4. 废液缸
(三)塑料器皿
1. 吸头
2. 枪头
3. 胶塞
4. 移液管(10ml)
5. 15ml离心管
6. 冻存管(1~2ml)
(四)其他物品
1. 微量加样枪
2. 红血球计数板
3. 记号笔
4. 医用橡皮膏
5. 移液枪
(五)试剂
1. D-Hanks液
2. 小牛血清
3. 培养液
4. 双抗(青霉素、链霉素)
5. 胰蛋白酶(0.08%)
6. 1NHCl
7. 7.4%NaHCO3
8. DMSO(分析纯)或无色新鲜甘油 (一)细胞冻存
1. 配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的冻存培养液;
2. 取对数生长期的细胞,用胰蛋白酶把单层生长的细胞消化下来,悬浮生长的细胞则直接将细胞移至15ml离心管中;
3. 离心1000rpm,5min;
4. 去除胰蛋白酶及旧的培养液,加入适量配制好的冻存培养液,用吸管轻轻吹打使细胞均匀,计数,调节冻存液中细胞的最终密度为5×106/ml~1×107/ml;
5. 将细胞分装入冻存管中,每管1~1.5 ml;
6. 在冻存管上标明细胞的名称,冻存时间及操作者;
7. 冻存:标准的冻存程序为降温速率-1~-2℃/ min;当温度达-25℃以下时,可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃时,则可迅速浸入液氮中。也可将装有细胞的冻存管放入-20℃冰箱2h ,然后放入-70℃冰箱中过夜,取出冻存管,移入液氮容器内。
(二) 细胞复苏
1. 从液氮容器中取出冻存管,直接浸入37℃温水中,并不时摇动令其尽快融化。
2. 从37℃水浴中取出冻存管,打开盖子,用吸管吸出细胞悬液,加到离心管并滴加10倍以上培养液,混匀;
3. 离心, 1000rpm,5min;
4. 弃去上清液,加入含10%小牛血清培养液重悬细胞,计数,调整细胞密度,接种培养瓶,37℃培养箱静置培养;
5. 次日更换一次培养液,继续培养。 1.从增殖期到形成致密的单层细胞以前的培养细胞都可以用于冻存,但最好为对数生长期细胞。在冻存前一天最好换一次培养液;
2.将冻存管放入液氮容器或从中取出时,要做好防护工作,以免冻伤;
3.冻存和复苏最好用新配制的培养液。向左转|向右转

最近与战友们探讨原液冻存的问题,各家做的五花八门,做法各不相同。

有的-20度冻存的(有的项目有问题,有的没问题)、有-35度冻存的,有-60度冻存的,有-80度冻存的。

冻存的因素:冻存温度,这个文献等于没说(依据是啥,@fjj8802战友说低于玻璃化转变温度,是否还有别的考虑)、冷冻速率(快,快到什么程度),冻时间(完全冻上,这个貌似需要估计吧,尤其是大量的,如何靠小模型能看出来)、融化温度、融化速率(搅拌)、规模(这个还真不好靠模型来评估)。评估如何来评估冻存的质量好坏,有人说冻融循环,这个小模型适合看蛋白是否对冻融敏感,但是不能很快知道这个蛋白长期冻存的稳定问题。

开本帖探讨原液冻存的注意事项及依据,战友们也可以谈谈自己家目前的做法。

链接:

//d.dxy.cn/detail/12769151

回复:【求助】蛋白制剂处方筛选及稳定性研究参考书,求电子的-蚂蚁淘论坛




CurrentPerspectivesonStABIlityofProteinDrugProductsduringFormulation,FillandFinishOperations.pdf(235.33k)
凝血酶时间测定试剂盒(凝固法)  使用说明书  产品名称  1.通用名称:凝血酶时间测定试剂盒  2.英文名称:TT  包装规格  10×2ml,10×4ml,5×2ml,10×10ml  预期用途  本试剂盒用于检测人血浆的凝血酶时间。  该产品可辅助用于高分子量肝素的监控治疗以及纤维蛋白溶解治疗监控,初步筛选纤维蛋白原机能不良及一些严重的纤维蛋白原缺乏病症,可粗略用于检测干素抗凝的治疗。  (1)TT延长的临床意义:超过正常对照3s以上为TT延长:①纤维增多或肝素抗凝物质存在以及AT-III显著提高;②纤维蛋白原降解物的增加;③纤维蛋白原减少;④纤维蛋白原机能障碍;⑤纤维蛋白原分子异常。  (2)TT缩短的临床意义:①高FIB血症;②钙离子存在时或标本有微小凝结块及PH呈酸性。  检验原理  适量的凝血酶将血浆样品中的纤维蛋白原转变成纤维蛋白,从而使血浆凝固。凝固所需的时间即为凝血酶时间(TT)。  主要组成成份  凝血酶 28.5IU/ml  Hepes缓冲液 60mM  储存条件及有效期  2-8℃可保存12个月,未开封试剂有效期内稳定。开封复溶后37℃下试剂可稳定7天。  适用仪器  适用于SYSMEX CA-50半自动血凝仪,SYSMEX CA-1500全自动血凝仪, STAGO COMPACT全自动血凝仪。  样本要求  新鲜静脉血与0.109M的柠檬酸钠按9:1混合均匀,以3000rpm离心15分钟(建议使用低温离心机),收集上层液体(血浆),在2小时内进行实验。如果样品2小时内不能检测,血浆应冻存。-20℃以下冷冻保存两周,-70℃以下冷冻可保存一个月。冻存的样品检测前必须37℃迅速解冻,不可反复冻融。  检验方法  1.半自动血凝仪将  TT试剂平衡至室温,轻轻倒置混匀。  2.全自动血凝仪  操作参照仪器操作手册。  血浆/试剂比例请按检验方法1操作要求。  3.质量控制  各实验室应建立自己的正常和异常质控范围,以核定仪器和试剂的操作。  4.结果显示  凝血酶时间测定结果以秒显示。  参考区间  9.0~16.0秒。  以上值仅供参考。由于仪器、实验室、当地人群之间都可能有差异,建议建立自己的参考范围。  检验结果的解释  可能影响检验结果的因素:  1.血凝仪未按要求定期维护保养出现异常。  2.质控品未按说明书正确使用操作。  3.加样器等移液器具未定期校验,出现异常。  检验方法的局限性  1.本试剂仅用于体外诊断。  2.本实验结果仅作为临床诊断辅助参考。  产品性能指标  1.批间差:用质控血浆重复测试不同批号试剂,所得结果变异系数(CV)应不超过10%。  2.重复性:用质控血浆重复测试所得结果的变异系数(CV)应不超过5%。  注意事项  1.样本避免出现泡沫。样本采集和凝血试验必须使用一次性塑料或硅化玻璃容器。  2.用浊度法测定终点的血凝仪,溶血和较明显的黄疸及脂血会影响测定结果,此时宜用  手工或电子机械血凝仪测定。  3.红细胞比容在20-55%范围之外时,应调整抗凝剂用量。  抗凝剂用量(ml)=0.00185×血液体积(ml)×(100-比容)  4.样本不宜采用草酸盐、EDTA和肝素做抗凝剂。  5.测定温度为37℃±0.5℃,需经常检查加热元件的温度。  6.实验器具必须清洁,不能有去垢剂存在。测定操作时佩戴一次性手套。
细胞冻存 123
血刺怪怪482021-08-06
细胞冻存注意事项:
1.欲冷冻保存之细胞应在生长良好(log phase) 且存活率高之状态,约为80 – 90 %致密度。
2. 冷冻前检测细胞是否仍保有其特有性质,例如hybridoma 应在冷冻保存前一至二日测试是否有抗体之产生。
3. 注意冷冻保护剂之品质,冻存液:10%DMSO+90%FBS,我做细胞试验从不加双抗,NAHCO3-未加
4. 冷冻保存的细胞浓度:
冻存方法
1.冷冻前一日前更换半量或全量培养基,观察细胞生长情形。
2.收集培养之细胞,取少量细胞悬浮液(约0.1 ml) 计数细胞浓度及冻前存活率。 离心速度不要大于1000rpm/min或800g/min。
3.离心弃上清,加入适量冷冻保存溶液,使细胞浓度为1-5 x 106 cells/ml,混匀,分装于无菌冻存管中,1 ml/vial,悬浮细胞可以浓一些。
4.冷冻保存方法1: 冷冻管置于4 oC 10 分钟→ -20 oC 30 分钟→ -80 oC 16~18 小时(或隔夜) → 液氮槽vapor phase 长期储存。 或4 oC 1h→ -20 oC 1h→ -80 oC 1h(或隔夜) → 液氮槽vapor phase
最常见的我的k562细胞就是这样做的。
阳离子脂质体法 :稳定转染,瞬时转染,所有细胞使用方法简单,可携带大片段DNA,通用于各种类型的裸露DNA或RNA,能转染各种类型的细胞,没有免疫原性。虽在体外基因转染中有很高的效率,但在体内,能被血清清除,并在肺组织内累积,诱发强烈的抗炎反应,导致高水平的毒性,这在很大程度上限制了其应用。
阳离子聚合物 :稳定转染,瞬时转染,所有细胞。除了具有阳离子脂质体的转染效率高,操作简单,适用范围广,重复性好等特点外,还具有在体内,转染效率高,细胞毒性低等特点,是新一代的转染试剂。
(转载,仅供参考)
1. 37℃水浴预热培养液(HUVEC-004)。
2. 从液氮中取出HUVEC的细胞管,快速将其置入37℃水浴中解冻,直到管中只剩下最后一片结晶(注意:不要让水没过产品管)。 用75%的酒精擦拭产品管外壁。
3. 将HUVEC的细胞管中的细胞移至15ml无菌离心管中,慢慢逐滴加入预温的37℃ 基础培养液(HUVEC-004B)培养液4-5ml混匀,边加边摇匀。
4. 用1ml的培养液冲洗HUVEC的细胞管,向15ml离心管中加入冲洗的细胞悬液,边滴加边摇匀。
5. 取10μl细胞悬液和10μl台盼蓝混匀后,取10μl计数。
这一步骤非常重要,能确定您收到的产品是否合格(详见如何计数复苏的细胞)
6. HUVEC的细胞悬液在1500rpm,室温条件下,离心10分钟,去除上清。
7. 加HUVEC完全培养液4-5ml, 轻轻混匀细胞,备用。
8. 接种前将 T25培养瓶中的包被液吸去,按2500-5000个细胞/cm2接种细胞。(1支冷冻的细胞可以种一瓶T25培养瓶)

9. 每个HUVEC的细胞培养瓶中加完全培养液(HUVEC-004)3-5ml, 后置于37℃、5%CO2 培养箱内培养。

我用bioteke的中量全血基因组DNA提取试剂盒(溶液型)提取冻存全血DNA:蛋白质沉淀液处理后上清呈褐色或淡红色,不是无色;在加入异丙醇后是褐色或淡红色絮状沉淀,不是白色絮状DNA沉淀。
我是参照试剂盒说明一步一步来的,请问这是什么原因?
是不是溶血啦,还是蛋白质没有沉淀完全,如何解决这一问题?
感谢啦!
具体看情况而定,实验室用的晶安生物的。

各位大神们,我的课题实验需要提取临床患者抗凝外周血的血浆进行冻存和后续研究,由于血样珍贵,老板让我把离心提取血浆之后所剩的沉淀也加以利用,从剩下的沉淀(血细胞)当中提取出白细胞并冻存,用于之后做western。我用自己的外周血标本试做了一下,5mlEDTA抗凝外周血,3000rpm4℃离心10min后,取上层血浆分装-80冻存用于相关ELAISA实验,然后在下层沉淀(血细胞)中加入3倍体积的溶血剂,静置10min使红细胞裂解之后离心,结果并没有明显的分层,我重复了加溶血剂裂解红细胞并离心的步骤,到最后的结果还是只能达到如图所示。可以看到一层灰白色物质,但无法完全分离提取白细胞,所以想请教各位大神:①我的操作中有哪些错误烦请大家指出;②我用的溶血剂是OptilyseC的溶血剂,是否是试剂的问题?是否需要购买专门的红细胞裂解液,或者自行配制?③为什么裂解红细胞之后分层并不明显,多次离心之后还是分不清楚?④如果可以提取出白细胞,是否可以直接加入冻存液将白细胞-80℃冻存用于之后的研究(主要是Western,不影响细胞内蛋白即可)?因为是第一次做实验,血样珍贵,这种处理方法做过的人也很少,烦请有经验的各位批评指正,向大家虚心请教学习,不胜感激!


这个问题由武汉新启迪生物来为您解答。
做ELISA实验,在处理样本前应该先了解收集样本的注意事项。
【标本收集注意事项】
1.收集血液的试管应为一次性的无热原,无内毒素试管。
2.血清和血浆避免使用溶血,高血脂标本。
3.标本应清澈透明,悬浮物应离心去除。
4.标本收集后若不及时检测,需按一次使用量分装,冻存于-20℃,-80℃电冰箱内,避免反复冻融。
5.可根据标本的实际情况,做适当倍数稀释(建议做预实验,以确定稀释倍数) 。
6.收集标本,尽量做到双份的用量,避免一次实验失败,重复实验时标本缺失,从而耽误实验进程。
7.收集标本时,应该做好防护措施(比如戴手套,口罩,护目镜等),认为所有标本都具有一定的潜在危险性。
8.样本处理应该在生物安全柜里面,并且正确使用生物安全柜。

样本正确的处理方法应该是这样的:
【标本处理办法】
1.血清:将采集的全血静置冰箱4℃过夜,然后1000-3000rpm离心10分钟,取上清立即测试,暂时不测可以放入-20℃(1-3个月)或-80℃(3-6个月)保存。
2.血浆:用EDTA,枸橼酸钠,肝素等作为抗凝剂,加入血液混匀后,1000-3000rpm离
心10分钟,取上清立即测试,暂时不测可以放入-20℃(1-3个月)或-80℃(3-6个月)
保存。
3.组织匀浆:切取组织块,0.01MPBS中过洗一次;按照1G组织加入5-10ml组织蛋白萃取试剂的比例,在冰水中匀浆。匀浆完成后,5000-10000rpm离心10分钟,取上清立即测试,暂时不测可以放入-20℃(1-3个月)或-80℃(3-6个月)保存。
4.细胞培养上清:1000-3000rpm离心10分钟,取上清立即测试,暂时不测可以放入-20℃(1-3个月)或-80℃(3-6个月)保存。
5.尿液,腹水,脑脊液等:1000-3000rpm离心10分钟,取上清立即测试,暂时不测可以放入-20℃(1-3个月)或-80℃3-6个月)保存。

注:样品稀释的一般原则
用户须查阅相关文献了解标本内待测因子的含量,决定适当的稀释倍数,以使稀释后样品中待测因子的浓度处于ELISA试剂盒的最佳检测范围。样品的稀释应有详细记录。

希望可以给您提供帮助,祝您科研顺利!
请问有没有做过冻存(液氮或者-70度冰箱)组织的蛋白(WB)检测,之前看到提取蛋白说明书对冻存组织的提取不好,请问大家建议使用的什么试剂盒呢?谢谢!
冻存组织的mirna会不会降解123
腐姐控控06102017-09-29
博陵科为 的 miRcute miRNA荧光定量检测试剂盒(SYBR Green),可检测pg级总RNA中miRNA的单碱基差异 miRcute miRNA荧光定量检测试剂盒( SYBR Green)中包含miRNA荧光定量检测的所有试剂,包括2×miRcute miRNA premix和Reverse primer。
2×miRcute。