高胆固醇竟然是这4类癌症的“保护因子”
来自 : 蚂蚁淘
(Writtenfor35mmdishes?ifsmallerdishesareused,volumesofmatrigelmustbeadjustedtocorrectforthetendencyofmatrigeltoadheretothesidesofthedish.)
- Pre-coat35mmdishwith200to300microlitersofmatrigel.
- Placedishin37oCincubatorfor10to15minutesandallowmatrigeltopolymerize.
- duringpolymerizationofthematrigel,trypinsizecells.
- Pellet0.6to1.2x106cells,aspiratemedia,flicktubetobreakuppellet.?
- S1cells
1.0x106cells/1.2mlmatrigel
- T4-2.
0.7x106cells/1.2mlmatrigel.
- T4-2+AIIBII
0.7x106cells/1.2mlmatrigel
- T4-2+
- Onice,add1.2mlmatrigeltotube.
- CarefullyPipetteupanddowntodistributecellsbutnotintroducebubblesintothematrigel.
- Transfermatrigelandcellmixturetopre-coated35mmdish.
- Placein37oCincubatorfor15to30minutesandallowmatrigeltopolymerize.
- Oncegelisformed,add1.5to2.0mlmediatodish.
- ForS1:H14+EGFmedium
- ForT4-2:H14medium
- TorevertT4-2withtyrophorstin:H14medium+tyrophorstin80nM
- Wegrowourcellsfor10daystoallowspheroidstoform;changingmediaevery2to3days.
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