Clophosome®-A- Clodronate Liposomes (Anionic)
Clophosome®-A, negatively-charged clodronate liposomes, offers superior efficiency of macrophagedepletion. Clodronate molecules are encapsulated in LUV liposomes for superior activity, physical and chemical stability, and convenience of use. It is formulated to an exceptionally high clodronate/lipid ratio. Free clodronate is cleaned out and the liposomal encapsulation efficiency of clodronateis more than 90%.Clophosome liposomes remain homogenous even after long term storage in fridge. It is not viscous and easy to inject even with fine needles.It is manufactured sterilefor long term shelf-life.
The product is suitable for dosing with various routes includingintravenous, intraperitoneal, subcutaneous, intranasal,intratracheal and etc. We have achieved > 90%depletion in splenicmacrophages (red pulp macrophages) 24 hours after a single 0.2 mL intravenous injection.A starting dose of 0.15-2 mL (i.v. or i.p.) for 20-25ganimal body weight is recommended for good consistency in macrophage depletion. Optimization is recommended for specific applications.
Specifications
Product name: Clophosome®-A
Product code: F70101C-A
Active: clodronate disodium.CAS: 22560-50-5, 7 mg/mL
Lipid composition:phosphatidylglycerol,phosphatidylcholine and cholesterol
Bulk solution:phosphate buffered saline (20mMsodiumphosphate, 09wt% NaCl), pH 7.0-7.5
Shelf-life:6 monthsguaranteed for unopened vials at 2-8 degree C (guaranteed starting from the date of delivery, replacement only)
See sample CofA
FormuMax科学公司位于加利福尼亚州北部硅谷的中心地带，是一家专业的药品配送公司，致力于满足医药/生物技术、化妆品和保健工业的配方开发外包的日益增长的需求。经营理念是成为**的伙伴，作为药物交付的***，特别是在制定具有挑战性的化合物脂质体和其他新的纳米技术。FormuMax拥有一支技术团队，在药物递送领域拥有***的专业知识，特别关注脂质体和其他基于脂质的技术。它们目前提供基础研究，配方可行性，定制配方准备，配方表征和分析科学的合同服务。FormuMax是**家提供大量预成型脂质体试剂的在线商店。已经成功地为来自世界各地的大学实验室、研究中心和各种行业的客户提供了服务和/或产品。
FormuMax供应主要产品：
Clophosome-氯膦酸盐脂质体
FormuMax提供两种预埋有氯磷酸盐分子的中性脂质体产品，该产品单次静脉或腹腔注射后可在脾脏经巨噬细胞清除率可达80-90%，并具有高度活性、稳定的理化性质（长期冰箱存放后仍保持均一性及悬浮特性），粘滞度低使用简便，适用于静脉、腹腔、皮下、鼻腔、气管等多种方式给药。
Doxoves-盐酸多柔比星脂质体
FormuMax可提供脂质定制的盐酸多柔比星脂质体（定制内容为脂质成分及脂质体大小）。FormuMax提供的产品为Doxoves，具有高度的产品稳定性和一致性,紧密的粒径分布和高效的药物包埋效率（高达4.0mg/mL(40mMlipid)的包埋药物浓度）。Doxoves系列产品在产品特性、稳定性及药代动力学特性上可媲美商业产品Doxil。
DrugLoadedliposomes
FormuMax提供多款包埋活性药物的脂质体产品，包括DoxorubicinHCl（含2.0mg/mL及4.0mg/mL两种浓度），IrinotecanHCl(2.0mg/mL)，TopotecanHCl(2.0mg/mL)，产品线仍在持续更新中。
预制脂质体
FormuMax供应的预制脂质体产品囊括多种通用的脂质体类型，使用世界*的优质脂类原料。该系列产品易于使用，稳定性、可靠性及可重复性高，节省时间和成本，并可为研究人员提供定制脂质体服务。目前FormuMax提供聚乙二醇化/非聚乙二醇化的常用脂质体，以及含浓度梯度Ammonium的脂质体
阳离子脂质体
FormuMax供应一系列的阳离子脂质体，用于需带正电荷的脂质体或细胞转染质粒DNA、反义/干扰RNA等。
荧光脂质体
FormuMax供应预制荧光标记的脂质体，包括常规荧光脂质体、生物素化的荧光脂质体以及Avdinized化的荧光脂质体，另外还提供客户定制的荧光脂质体（脂类及染料可选）。
脂质体制备薄膜
FormuMax供应一系列不同规格的聚碳酸酯薄膜，用于脂质体挤出制备。
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其次要看下你选择单位的规模如何，做的比较好的，还是上海这边的，你可以看下基尔顿生物，原代细胞培养，动物造模，整体课题外包。
不建议你用MDCK细胞，非常难转染。
GFP发出绿色荧光的原理是Ca离子进入GFP的beta-barrel结构中引起的特定能级，因此只要这个结构仍然保持着，就可以发出荧光。
由于GFP的beta-barrel结构非常稳定，一些版本的GFP蛋白（如EGFP）甚至能抵抗94C的高温几分钟而不完全变性，因此想在溶液状态下去掉GFP的荧光是很难的，一般需要用光漂白法。
基于其非常稳定的结构，即便细胞被固定了，仍然会有一部分的GFP蛋白保持其构象而发出荧光。此时荧光可能较弱。在荧光显微镜下是有可能看得到的。
我刚开始做转染，悬浮细胞，分别做过表达和敲减，看了很多文献，大都没有提及转染后是用转染的这同一批细胞同时做pcr，wb，cck8，凋亡，细胞周期；还是说这次转染只做pcr或wb，再转染一次做cck8或细胞周期。剩下的功能试验均同前，转染一次做一次？我养的是悬浮细胞，转染后做cck8这些功能试验前需要离心换液吗？跪谢解答！
可以用移液器将细胞吸出来并高速离心，沉淀重悬于PBS中洗涤，接着就可以裂解提取蛋白了。可以用超声，酶解等等，裂解后离心收集上清。
其次要看下你选择单位的规模如何，上海这边的，你可以看下基尔顿生物，原代细胞培养，动物造模，整体课题外包。
实验室一直都是用日常型质粒抽提试剂盒，转染细胞没问题。
我觉得只要是注意以下2点就可以了：
1，注意大肠杆菌(Escherichia coli)本身的污染，收集菌体沉淀时防止菌液散落，经常用75%的乙醇擦拭手套。
2，最后洗脱时最好使用无内毒素的水，我们是用注射用水的。
无论是小提还是大提我们都是用的日常型的，并没有刻意用转染级的，因为转染量大，去内毒素的操作太麻烦，损失太大。
转染分2种，一种是瞬时转染，即转染后让细胞表达目的蛋白后即提取蛋白，提一次蛋白，转染一次，这种方式一般不传代；
另一种转染为稳定转染，转染后加入一定选择压力进行筛选，没有转染的细胞不能存活，只留下转染的细胞，这种情况下可以筛选单个转染细胞，构建稳定表达某一特定蛋白或基因的细胞系。
